+

91.6
Francisco Garca
Daniela Garca
Marion Gonzlez
Aarn Gonzlez
Marcos Lara
Homero Minjarez

Laboratorio en el
diagnostico de VIH

Infectologa
Dra. Castellares

Mexicali, B.C. a 07 de Noviembre de 2014

Pruebas de tamizaje

ELISA
(pruebas
rpidas)

WB

Tipos de Ensayos
Pruebas rpidas
ELISA

Respuesta serolgica
a la infeccin

Deteccin
de Ac y/o
antgenos

Western Blot
Inmunofluorescencia
Antgeno p24

Deteccin Viral

Conteo de CD4
Carga Viral

PCR

A quien hacerlas?

Personas de 15-65
aos
Trabajadores sexuales
Embarazadas
Donadores
ITS
Hepatitis B, C
Tuberculosis

1ra
Generaci
n

1985: Kit de ELISA para deteccin en donantes de sangre

Elevada tasa de resultados falsos positivos y falsos negativos
(periodo de ventana = 63 das)
Antgenos utilizados provienen del lisado viral de un cultivo
Inmunoensayo indirecto para deteccin de anticuerpos IgG

2da
Generaci
n

Se redujo tasas de falsos positivos.

Periodo de ventana = 42 das
Utilizacin antgenos recombinantes y pptidos sintticos.
Mayor sensibilidad
Eliminacin de antgenos celulares que contaminan la prueba

3ra
Generaci
n

Deteccin del VIH-2

Desarrollo de ELISA sndwich
Deteccin de anticuerpos IgG e IgM
Reduccin de periodo de ventana a 22 das
Deteccin mediante PCR
Prueba del cido nucleico (NAT)

4ta
Generaci
n

Anticuerpos monoclonales para deteccin de antgeno p24

(combo)
Pruebas con mejor capacidad de deteccin del VIH en el periodo de
ventana (4-16 das)
ELISA 3ra generacin y deteccin de antgeno viral p24

Situaciones clnicas

Situacin #1

Masculino 32 aos

Refiere haber tenido relaciones sexuales

hace 24 hrs con trabajadora sexual con
proteccin (condn) rompindose este.

Acude a consulta por miedo a haberse

contagiado de VIH (+).

Sin mas antecedentes de importancia.

+
Que
hacer?

+
Evaluar
inmediatamente y
luego a los 3 y 6
meses

Pruebas rpidas
Sensibilidad
99.5%
Especificidad
99.7%

+
Prueba

Sensibilidad

Especificidad

GS HIV-1/2+O

99.8

99.4

Abbott

99.4

97.7

Vir HIV-1+O

99.7

99

Pptido GS HIV-1/2

98.7

99.8

GS rLAV

97.4

100

Vir HIV-1

99

98.4

Oraquick
Reveal
Uni-Gold

98.6
99
98.4

99.8
99.8
99.4

Categora
EIA 3era
generacin
EIA 3era
generacin
EIA 2era
generacin
EIA 2era
generacin
EIA 2era
generacin
EIA 1era
generacin
Prueba rpida
Prueba rpida
Prueba rpida

A1
Prueba para detectar HIV-1 o
HIV-1/HIV-2 en Sangre
(Prueba rpida)

A1 (+)
A1 (-)

A2
Negativo para
Ac contra HIV1/HIV-2
A1
(+)

A2(+
)

Se presume
resultado
positivo

A1
(+)

A2(-)

Resultado
inconcluso,
evaluacin
adicional

Realizar ELISA o
PCR

Confirmar
Ann Intern Med. 2008;149(3):204. The deadliest catch: fishing for HIV in new waters.
HIV
Testing
Pilcher
CD,Algorithms
Hare CB A Status Report. A Publication from the Association of Public
Health Laboratories and the CDC

Resultados
Falsos positivos
- Enfermedades
virales agudas
- Neoplasias
- Embarazo
- Enfermedades
autoinmunes
- Vacunacin
(Influenza, Hepatitis
B, Rabia)
- Trasplante de
rganos

Falsos negativos
- Fase temprana
- Inmunosupresin
- Neoplasias
- Quimioterapia

+ Western blot
OMS:
Dos glucoprotenas cualquiera
de: gp160, gp120, gp41
FDA:
p24+ (gp41 o gp120 o gp160) o
p32+ (gp41 o gp120 o gp160)
CDC:
2 de los siguientes: p24, gp41 y
gp120/160
ARC:
Al menos 3 bandas: 3 genes
estructurales: gag, pol y env
CRSS:
Al menos, una banda del core
(gag/pol) y otro de envoltura
(env)

CDC. nterpretation and Use of the Western Blot Assay for

Serodiagnosis of Human Immunodeficiency Virus Type 1
Infections

A1
(ELISA)

A1 (-)

A1 (+)

A1
(En
duplicado)

A1

(- -)

Se sospecha periodo
de ventana o el
paciente es de alto
riesgo

A1

( + +) (- +)

Realizar WB o
IFA

Positivo

Negativo

Positivo
para Ac
HIV-1

Negativo
para Ac
HIV-1

Negativo para Ac
contra HIV-1/HIV-2

PCR

Indeterminad
o

Repetir ELISA y
WB en 2-4
semanas

HIV Testing Algorithms A Status Report. A Publication from the Association of Public Health
Laboratories and the CDC

Falsos positivos

Nios
nacidos de
madres
VIH+

Personas
que se han
infectado
recientemen
te

Mujeres
embarazada
s

Resultados indeterminados

Periodo
inicial de
seroconversi
n

Tiroiditis de
Hashimoto

Lupus
eritematoso
sistemico

Linfoma de
Hodgkin

Inmunizaci
n reciente
para el
tetanos

PCR

Detecta el material gentico del

VIH, y puede identificar el virus
en la sangre dentro de 2-3
semanas de la infeccin.

Por tanto un infeccin reciente

podr ser detectada a tiempo y
en consecuencia potenciar la
efectividad
de
las
terapias
antiretrovirales.

Se busca la presencia de
secuencias
especficas
del
material gentico del virus y se
amplifica.

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Seguimiento

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Pruebas de seguimiento

CD4

Carga viral

Estudios basales

Conteo CD4
Estadificacin
Parmetro

para inicio TAR

Predictor,

progresin y supervivencia

Indicador

para inicio de profilaxis

Ann Intern Med. 1997;126(12):946. Plasma viral load and CD4+ lymphocytes as prognostic markers of
HIV-1 infection. Mellors JW, Muoz A,

Carga viral

Detecta cantidades tan pequeas como 50 virus por mililitro de

sangrey son capaces de dar resultados fiables a partir de las 48 72
horas inmediatamente posteriores a la infeccin.

Se aconseja repetir una PCR con resultado positivo al cabo de dos

semanas despus de haber realizado la primera y, en todos los
casos, est recomendado hacer un test ELISA de confirmacin al
cabo de tres mesesa partir de la fecha en la que se estima que se
produjo la infeccin.

Situacin #2

Masculino 28 aos
Antecedente de promiscuidad sexual (HSH)
10 parejas sexuales (PS) en el ultimo ao (30 PS
en toda su vida)
Ultima relacin sexual de riesgo hace 3
semanas

Acude a consulta por presentar desde hace 3 das:

Fiebre 38C
Mialgias, artralgias
Linfadenopatia generalizada
Cefalea
Faringitis
Rash maculopapular en cara y tronco

ELISA/prueba rpida

2 Pruebas rpidas o ELISAs

POSITIVO

Pedir WB a la brevedad

NEGATIVO

Pedir 2 Pruebas rpidas + WB a los 3 meses

Repetir a los 6, 9 y 12 meses en caso de repetidos resultados negativos

INDETERMINADO

Pedir prueba rpida + WB a los 3 meses

A1
(ELISA)

A1 (-)

A1 (+)

A1
(En
duplicado)

A1

(- -)

Se sospecha periodo
de ventana o el
paciente es de alto
riesgo

A1

( + +) (- +)

Realizar WB o
IFA

Positivo

Negativo

Positivo
para Ac
HIV-1

Negativo
para Ac
HIV-1

Negativo para Ac
contra HIV-1/HIV-2

PCR

Indeterminad
o

Repetir ELISA y
WB en 2-4
semanas

HIV Testing Algorithms A Status Report. A Publication from the Association of Public Health
Laboratories and the CDC

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Seguimiento

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Pruebas de seguimiento

CD4

Carga viral

Estudios basales

Conteo CD4
Estadificacin
Parmetro

para inicio TAR

Predictor,

progresin y supervivencia

Indicador

para inicio de profilaxis

Ann Intern Med. 1997;126(12):946. Plasma viral load and CD4+ lymphocytes as prognostic markers of
HIV-1 infection. Mellors JW, Muoz A,

Carga viral

Detecta cantidades tan pequeas como 50 virus por mililitro de

sangrey son capaces de dar resultados fiables a partir de las 48 72
horas inmediatamente posteriores a la infeccin.

Se aconseja repetir una PCR con resultado positivo al cabo de dos

semanas despus de haber realizado la primera y, en todos los
casos, est recomendado hacer un test ELISA de confirmacin al
cabo de tres mesesa partir de la fecha en la que se estima que se
produjo la infeccin.

INDEPENDIENTE DEL RESULTADO:

CD4+

Carga Viral

BH

Qumica sangunea (electrolitos, PFH, Lpidos)

EGO

VHC

VHB

VHA

Tuberculosis

Otras ITSs

Situacin #3

Femenino 20 aos

VIH (positivo)

Sin tx antirretroviral

Acaba de dar a luz

+
Que hacer
con ambos?

CD4

Carga viral

Estudios basales

Los bebs nacidos de madres VIH-positivas se prueban con una prueba

especial de PCR, porque su sangre contiene anticuerpos del VIH de la
madre durante varios meses. Esto significa que la prueba puede dar VIHpositivo en una prueba estndar de anticuerpos, pero una prueba de PCR
puede determinar definitivamente si los bebs tienen el VIH.

Situacin #4

Femenino 18 aos

Acude a consulta
violacin hace 24 hrs.

porque

refiere

+
Que
hacer?

A1
(ELISA)

A1 (-)

A1 (+)

A1
(En
duplicado)

A1

(- -)

Se sospecha periodo
de ventana o el
paciente es de alto
riesgo

A1

( + +) (- +)

Realizar WB o
IFA

Positivo

Negativo

Positivo
para Ac
HIV-1

Negativo
para Ac
HIV-1

Negativo para Ac
contra HIV-1/HIV-2

PCR

Indeterminad
o

Repetir ELISA y
WB en 2-4
semanas

HIV Testing Algorithms A Status Report. A Publication from the Association of Public Health
Laboratories and the CDC

Situacin #5

Masculino 25 aos

Interno en el HG

Refiere pinchazo accidental, desconoce si el

paciente es VIH (+).

+
Que
hacer?

Iniciar con profilaxis

Pruebas al paciente para confirmar si es VIH (+)

Pruebas al interno

Prueba rpidas

WB

PCR

Empezar con tratamiento antirretroviral

Bibliografa

http://www.who.int/hiv/pub/guidelines/ecuador_art.pdf?ua=1

http://www.censida.salud.gob.mx/descargas/biblioteca/documentos/guia_prueba_r
apida.pdf

http://aidsetc.org/guide/initial-and-interim-laboratory-and-other-tests

http://aidsetc.org/guide/hiv-classification-cdc-and-who-staging-systems

http://aidsetc.org/guide/cd4-and-viral-load-monitoring

http://aidsetc.org/guide/early-hiv-infection

http://www.geosalud.com/vih-sida/pruebas-para-la-deteccion-infeccion-porvih.html

http://foros.telva.com/salud/5256-pcr-vih-deteccion-directa-del-virus-infeccionesrecientes-esperar-3-meses.html