Determinaciones

Analticas

INTRODUCCIN
El apartado 9 nos ayuda a identificar las pruebas que
tenemos que realizar a la sangre del donante para
cerciorarnos que la sangre sea sana y compatible para
el receptor. Esta norma es muy importante ya que si
no se cumple cada requisito que se pide o se hace de
una forma incorrecta se esta poniendo en peligro la
vida de la persona a la que se le va a transfundir la
sangre. Como laboratoristas debemos de tener mucho
cuidado no solo con los resultados sino tambin con la
elaboracin de estas pruebas y al utilizar la sangre de
los donadores.

Para la realizacin de las pruebas de deteccin de

agentes infecciosos el personal asignado por el
responsable sanitario del banco de sangre deber
observar lo siguiente:
a)

El personal deber recibir capacitacin adecuada para

elaborar las pruebas y tendr constancia de ello.
nicamente se emplearn reactivos validados que cuenten
con nmero de registro sanitario de la Secretara
b)

c) Las pruebas se realizarn siguiendo las recomendaciones e

instrucciones proporcionadas por el fabricante de los reactivos.

 Los bancos de sangre:

Debern contar con procedimientos escritos
para el manejo, trasvasado y etiquetado de las
muestras que permitan garantizar su correcta
trazabilidad.
Tener y conservar registros de todas las
determinaciones analticas
Garantizan la identificacin de muestras de
donantes y receptores
Los resultados sern notificados al personal que
suministre las unidades para traslado o
transfusin

PRUEBAS DE DETECCION
DE AGENTES INFECCIOSOS
TRANSMISIBLES POR
TRANSFUCION

 Con las muestras tomadas en cada donacin se

deben efectuar las pruebas para detectar los agentes
antes del uso teraputico.
Se deben incluir obligatoriamente:
a) Treponema pallidum;
b)
Virus B de la hepatitis;
c)
Virus C de la hepatitis;
d)
Virus de la inmunodeficiencia humana
tipos 1 y 2, y
e)
Trypanosoma cruzi;

 Por la situacin epidemiolgica de la regin geogrfica donde se

encuentra el establecimiento o del lugar de donde venga el
donante, sus antecedentes y factores de riesgo para adquirir
enfermedades, el banco de sangre debe adquirir pruebas
adicionales:
a)
Brucella;
b)
Plasmodium;
c)
Citomegalovirus;
d)
Toxoplasma;
e)
Retrovirus HTLV tipos I y II, y
f)
Otros agentes.
Para que el banco de sangre autorice el uso teraputico de las
unidades deber contar con resultados inequvocamente
negativos en las pruebas de deteccin de agentes transmisibles.

Primer resultado de las pruebas de tamizaje, efectuado con la muestra del suero del donante

Negativo

Utilizar la unidad y sus

fracciones con fines
transfusionales

Dudoso
Dudoso
10%
por
debajo
10% por debajo de
de valor
valor de
de corte
corte de
de
conformidad
a
lo
que
estipule
el
conformidad a lo que estipule el fabricante
fabricante

Reactivo

Dar
Dar destino
destino final
final a
a la
la unidad
unidad implicada
implicada y
ya
a los
los componentes
componentes de
de que
que ella
ella se
se hubiesen
hubiesen obtenido
obtenido

Con
Con la
la misma
misma tcnica,
tcnica, repetir
repetir la
la prueba
prueba de
de tamizaje
tamizaje por
por duplicado,
duplicado, empleando
empleando la
la alcuota
alcuota de
de la
la
muestra
muestra original
original que
que result
result reactiva
reactiva y
y una
una alcuota
alcuota tomada
tomada de
de la
la unidad
unidad implicada
implicada.

NEGATIVO
NEGATIVO
en
en ambas
ambas muestras
muestras

REACTIVO
REACTIVO
en
en ambas
ambas muestras
muestras

Considerar el resultado
como negativo

REACTIVO

Hacer prueba confirmatoria, o en su caso,

suplementaria.

INDETERMINADO
INDETERMINADO

POSITIVO
POSITIVO

Notificar al donante de conformidad a lo sealado en el

captulo 5 de esta Norma y Reportar el caso a la Secretara

Dudoso
Dudoso o
o reactivo
reactivo
en al
en
al menos
menos una
una de
de las
las
muestras
muestras proceder
proceder conforme
conforme
a
a lo
lo sealado
sealado en
en el
el apartado
apartado
9.4.6
9.4.6 de
de esta
esta Norma)
Norma)

Solicitar una segunda muestra al donante y repetir la

prueba de tamizaje con la misma tcnica empleada
originalmente.

NEGATIVO

Considerarlo como negativo

 El control de calidad debe demostrar resultados

confiables, el personal que realiza las pruebas debe
seguir como se explico en el cuadro anterior.

De haber discrepancia entre la muestra original y

de la alcuota, no deber liberarse el lote de
unidades estudiadas hasta haber identificado la
unidad reactiva.
Para la notificacin de las anomalas ha que
proceder como el apartado 18.3 de esta norma

Detencin de Treponema pallidum

Tamizaje. Se deber realizar mediante:
A)Pruebas de aglutinacin de partculas,
-VDRL
-RPR
sfilis
B) Identificacin de anticuerpos mediante pruebas treponmicas con
especificidad=98.50% como:
-Inmunocromatografa
-Ensayo inmunoensimtico
Confirmatoria. Pruebas treponemicas especificidad 99%
A) Hemaglutinacin contra treponema
B) Anticuerpos florucentes contra el treponema
C) Inmunofluorecencia indirecta
D) Inmovilizacin del treponema
La prueba se validara con las instrucciones del fabricante ya que son confiables.

Detencin del virus de la hepatitis B

Tamizaje. Pruebas de detencin del antgeno de superficie del
virus B de la hepatitis, con sensibilidad 9.5% y especificidad
99.0%, tales como:
A) Ensayo inmunoenzimtico
B) Inmunoensayo por quimioluminiscencia
El control de calidad se demuestra cuando la prueba tiene
sensibilidad para detectar un control positivo dbil.
Se deben realizar mediante la detencin de antgenos con una
prueba de neutralizacin con anticuerpos de especificidad
99.5%

 Deteccin del virus C de la hepatitis

Tamizaje. Pruebas de deteccin de anticuerpos contra el virus
o deteccin simultanea de antgenos virales y anticuerpos
contra el virus que tenga una sensibilidad de 99.5%
A)Ensayo inmunoenzimatico
B)Inmunoensayo por quimioluminiscencia
Control de calidad. La prueba se demuestra cuando la
prueba tiene una sensibilidad suficiente para detectar un
control positivo dbil.
Confirmatoria. Se deber realizar mediante la prueba de
inmunoblot , la prueba se validara a travs de los controles
que seale el fabricante

Virus de la inmunodeficiencia humana, tipo 1 y 2

Tamizaje. Se deber realizar pruebas de marcadores de infeccin
del virus, que tengan una sensibilidad y especificidad de 99%
A) Ensayo inmunoenzimatico combinado para la determinacin
de antgenos y anticuerpos virales.
B)Ensayo inmunoenzimatico,
C)Ensayo por inmunoluminiscencia
El control de calidad de la prueba de tamizaje se demuestra
cuando la prueba tiene una sensibilidad suficiente para
detectar un control positivo dbil.
La confirmacin se deber realizar mediante una prueba de
deteccin de anticuerpos contra el VIH tipos 1 y 2
-inmunoelectrotransferencia (westem blot)
-inmunoflourecencia
-inmunoensayo recombinante

LOS BANCOS DE SANGRE QUE EFECTAN PRUEBAS

DE AMPLIFICACIN DE CIDOS NUCLECOS.
A)No sustituyan a las pruebas de deteccin de agentes virales
transmisibles por transfusin
B) Debern verificarse por la Organizacin Mundial de la Salud
Deteccin de Trypanosoma cruzi
Tamizaje. Se deber realizar pruebas de deteccin contra el
trypanosoma cruzi.
A)Ensayo inmunoenzimatico
B) Aglutinacin directa
C)Tira reactiva
El control de calidad de la prueba se demuestra cuando la
prueba tiene una sensibilidad suficiente para detectar un
control positivo dbil.

Prueba suplementaria. Se emplea una prueba de

deteccin de anticuerpos contra el trypanosoma cruzi,
que tenga un formato distinto a la prueba empleada
para el tamizaje.
PRUEBAS PARA LA DETENCCION DE AG
TRANSMISIBLES.
Detencin de brcela.
Se practicaran personas consideradas de riesgo que
ingieren productos lcteos, personas que trabajan con
animales domesticados; as como las que trabajan en
granja, mataderos, curtiduras y los veterinarios.
a) Tamizaje. Pruebas de aglutinacin en placa con
antgeno teido con rosa de bengala para la deteccin
de anticuerpos totales o de tipo IgM

Prueba confirmatoria. Metodologas como

anticuerpos mediante aglutinacin mediante de 2
mercatoetanol.
Detencin de plasmodium.
Se practicaran para definir la aceptabilidad de un
donante que se encuentra en cualquiera de las
condiciones optimas de un donador.
a)Ensayo inmunoenzimatico
b)Inmunoflourescencia
c) Investigacin del parasito con micro tubo con
naranja de arcidina.

DETECION DE CITOMEGALOVIRUS
Pruebas de detencin de anticuerpos tipo IgM.
a) Ensayo inmunoezimtico
b) Inmunoflourscencia
Deteccin de Toxoplasma gondii
Pruebas de deteccin de anticuerpos mediante
ensayo inmunoenzimtico
Retrovirus HTLV I y II
a) Tamizaje. Deteccin de anticuerpos por
pruebas que tenga sensibilidad y especificidad
de 95% :
-) Ensayo inmunoenzimtico
-) Amplificacin de cidos nuclecos

HEMOCLASIFICACIN Y
HEMOCOPATIBILIDAD
Los bancos de sangre y servicios de transfusin
debern realizar las pruebas de compatibilidad
sanguneas, antes de cada transfusin alogenica
(clulas trasplantadas viniendo de un donante).
Las pruebas que se emplean para demostrar
compatibilidad sangunea incluyen
a) Hemoclasificacin de los sistemas ABO y RH
b) Investigacin de anticuerpos irregulares de
importancia clnica
c) Pruebas cruzadas en: tubo, soporte solido, gel o
esferas de vidrio.

Antes de cada transfusin se realiza prueba cruzada

mayor, se debe realizar el control de calidad de los
reactivos y equipo.
Se deben conservar 7 das las muestras si se efectan
pruebas de compatibilidad
Conservacin: plasma o suero -18C y eritrocitos +2C
y +6C
Grupo ABO se realiza a donantes y receptores
Pruebas de aglutinacin:
Prueba Directa
Prueba Inversa
Identificacin del antgeno D
a)Prueba de aglutinacin directa
b)Prueba de antiglobulina humana

 Grupos distintos a ABO se realizan mediante pruebas de

aglutinacin.
Las pruebas cruzadas incluyen: Prueba mayor, prueba
menor y autotestigo y tiene vigencia mxima de 72
horas.
Los bancos y servicios de transfusin debern contar
con procedimientos normalizados de operacin que
especifiquen como deben actuar en caso de urgencias
transfucionales.

 Las pruebas de hemocompatibilidad en neonatos

y menores de cuatro meses debern incluir:
Investigacin de los grupos ABO y Rh (D)
empleando una prueba de aglutinacin directa
mediante la genotipificacin sangunea no se
requiere realizar prueba inversa.
Rastreo de anticuerpos irregulares y pruebas
cruzadas se emplea el suero o plasma de la
madre.

Conclusin
La sangre tiene que pasar por muchas
pruebas para que sea sana y pueda ser
utilizada con fines teraputicos, evitando
daar a los receptores. Es importante que
se cumplan todas estas reglas para que la
sangre tenga una mejor calidad y su uso
sea el adecuado.