Establecimiento de lmite y

evaluacin de resultados
Los lmites de accin por lo
general
son
los
lmites
establecidos por farmacopeas o
entidades segn la calidad
del agua y el uso que se le va a
dar.

Lmite de accin
Se define como un valor numrico que, una vez excedido,

indica que el proceso est operando fuera de los

parmetros normales.

Lmite de alerta
Se define como un valor numrico que cuando es

excedido indica que el proceso podra operar fuera de los

parmetros normales.

Mtodos alternativos
Bioluminiscencia.
Citometra de flujo y en fase slida.
La Epifluorescencia.
La PCR.

Citmetria de flujo

La citometria de flujo (CMF) es una tcnica de anlisis celular multiparametrico

cuyo fundamento se basa en hacer pasar una suspensin de partculas
(generalmente clulas) alineadas y de una en una por delante de un haz de lser
focalizado.

 La citometra de flujo es una tecnologa (proceso) que

permite la medida simultnea de mltiples caractersticas

fsicas de una sola clula. Estas medidas son realizadas
mientras las clulas (partculas) pasan en fila, a una
velocidad de 500 a 4000 clulas por segundo, a travs del
aparato de medida en una corriente de fluido (1).

La Epifluorescencia
El

microscopio de epifluorescencia es un
microscopio ptico. En un microscopio ptico
convencional la luz atraviesa la muestra
estudiada, mientras que en un microscopio de
epifluorescencia la luz que incide sobre la muestra
estudiada no la atraviesa sino que el mismo lente
ilumina y recibe la luz emitida por la muestra.

Se

observa un esquema de funcionamiento del

microscopio de epifluorescencia. La luz procedente de la
fuente (lmpara de mercurio o xenn), atraviesa un
primer filtro que selecciona la longitud de onda capaz de
excitar al fluorocromo, antes de incidir sobre la muestra.
Esta luz se refleja en un espejo dicromtico (o dicroico) e
incide sobre la muestra, excitando al fluorocromo, el que
emite fotones de una longitud de onda mayor que la
incidente. La luz emitida por la muestra no se refleja
sino que atraviesa el espejo dicroico y llega a un
segundo filtro que selecciona la longitud de onda de
emisin del fluorocromo. Finalmente, la luz ingresa a un
fotomultiplicador que la convierte en una seal elctrica.

La PCR
es una tcnica de biologa molecular desarrollada en 1986

por Kary Mullis,1 .Su objetivo es obtener un gran nmero

de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de
un mnimo; en teora basta partir de una nica copia de ese
fragmento original, o molde.
Esta tcnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su
utilidad es que tras la amplificacin resulta mucho ms fcil
identificar con una muy alta probabilidad, virus o bacterias
causantes de una enfermedad, identificar personas (
cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN
amplificado.

Termociclador: aparato en el que se

efecta la PCR convencional.

Monitoreo del sistema de produccin y

distribucin de agua de uso farmacutico y
cosmtico
El propsito del monitoreo del sistema de agua es:
Asegurar la estabilidad y el control del proceso de

todo
el
equipamiento
de
generacin,
almacenamiento y distribucin del sistema, y el
control de calidad para una asegurar que
consistentemente se cumplen los requerimientos
microbiolgicos, de endotoxinas bacterianas y la
pureza qumica del agua.

Asegurar que el control de los parmetros crticos son adecuados para

asegurar que pequeos cambios no afectan al sistema.

Proveer la garanta de la efectividad de los procesos de
mantenimiento, limpieza y sanitizacin.
Los datos del monitoreo son capaces de identificar tendencias y un
alerta temprano de desviacin del estado de control y de aumento de
la contaminacin.
Salvo para el monitoreo del agua para inyectables (WFI), el cual debe
ser diario, no existe una normativa que establezca la frecuencia del
monitoreo microbiolgico de aguas de uso farmacutico, la frecuencia
debe ser suficiente para asegurar que la calidad del agua cumpla con los
criterios de aceptacin segn el tipo de agua y el uso que se le va a dar.

Investigacin de resultados
La interpretacin e investigacin de los resultados
del anlisis microbiolgico de aguas puede ser
dificultosa debido a:
La

formacin
de
biofilms,
que
puede
desprenderse parcialmente en forma discontinua,
obtenindose recuentos errticos, que no siguen
una tendencia.

Por lo general el sistema de aguas opera en forma

continua, y no hay un lote definido.

Es posible que en el sistema en diferentes momentos

durante el da haya cambios de temperatura,

concentracin de ozono -si lo hubiera-, cantidad de
agua utilizada o caudal de agua que se repone, u otra
variable que pueda afectar a la calidad microbiolgica
del agua en algn punto de muestreo.
Las muestras de agua no pueden conservarse hasta

obtener el resultado utilizando los mtodos

tradicionales con medios de cultivo-, por lo que no es
posible el reanlisis de una muestra similar a la
original.

http://

www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neur
obioquimica/libros/celular/citometria.htm
http://

iie.fing.edu.uy/investigacion/grupos/gti/timag
/trabajos/2007/proteus/epifluorescencia.html