Algunas aplicaciones de

los microorganismos

 Industria Alimentaria
Industria Qumica
Agricultura
Industria Farmacetica
Procesos Ambientales

Bibliografa: Brock, Biologa de los microorganismos, 8va Ed.

Hugo y Russell, Pharmaceutical Microbiology 6th Ed. 1998.

Cronologa del desarrollo de la Biotecnologa

Era pre-Pasteur (anterior a 1865)
Bebidas alcohlicas (cervezas, vinos)
Productos lcteos (quesos, jogur)
Vinagre

Era Pasteur (1865 - 1940)

Fermentaciones Industriales (etanol, butanol, acetona, glicerol)
Produccin de cidos orgnicos (actico, ctrico, lctico)

Era Antibitico(1940-1960)
Produccin a gran escala de Ab
Transformaciones esteroidales (cortisona, estrgenos)

Era post-antibitico (1960-1975)

Produccin de: Aminocidos, Enzimas industriales
Enzimas inmovilizadas
Protena unicelular, Polisacridos

Era Biotecnologa Molecular (1975-presente)

Tecnologa ADN recombinante
Primeros productos aparecen en el mercado en 1982 ( vacunas, insulina humana)

Microbiologa Industrial: objetivos

* Biomasa microbiana
* Enzimas especficas
* Metabolitos
Origen de las cepas industriales
* Colecciones de cultivos
* Cepas nativas
* Cepas con genes clonados

Propiedades de un microorganismo para uso

industrial
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Disponible en cultivo puro

Genticamente estable
No patgeno y libre de toxinas
Crecimiento rpido en cultivo en gran escala con
alto rendimiento del producto deseado
Debe poder protegerse de la contaminacin
Crecer en un medio de cultivo lquido y barato
Fcil recuperacin del producto del medio de
cultivo
Susceptible a la manipulacin gentica

Dnde encuentramos micorroganismos

con estas caractersticas?
Aislamiento de la naturaleza
Maximizar la produccin:
a) Seleccin de variantes naturales
b) Seleccin de mutantes inducidas
c)

Obtencin de recombinantes

Metabolitos primarios
Se producen durante la fase logartmica de crecimiento como
producto del metabolismo, y son esenciales para la funcin del
microorganismo (aa, c. pirvico, etanol, cido lctico ). La produccin
neta se relaciona con el crecimiento y la cantidad de sustrato.
TROFOFASE

Metabolitos secundarios

Se producen en la fase temprana estacionaria de crecimiento

y son productos finales de vas metablicas complejas. No son
crticos para la funcin de los microorganismos (antibiticos,
pigmentos, hormonas, vitaminas, etc).
IDIOFASE

Cintica de produccin de metabolitos

log cells (o)

product ()
trofofase

idiofase
o

o
o o o

tiempo

Origen de metabolitos secundarios

constituyente celular
intermediarios

Nucletidos
Aminocidos
Azcares
Acetyl CoA
Terpenos

cidos nucleicos
Protenas
Polisacridos
Lpidos
Esteroles
metabolitos secundarios

Penicilinas, Cefalosporinas
Ab peptdicos, alcaloides
Ab aminoglicsidos
Tetraciclina
Giberelinas

El objetivo en microbiologa
industrial es producir:
3. biomasa microbiana
4. enzimas especficas
5. metabolitos

Productos microbianos
1.Enzimas:
Enzimas amilasas, glucosa isomerasa, proteasas.
2.Aditivos para alimentos: aa (fenilalanina en Nutrasweet, glutamato
monosdico), vit. (B12, riboflavina)
3.Productos qumicos comunes:
comunes citrato, c. actico, etanol. Solventes
industriales, alcoholes y acetona producidos por fermentacin.
4.Farmaceticos:
Farmaceticos Ab (penicilina, estreptomicina). Por ingeniera
gentica las bacterias pueden producir insulina de uso humano.
5.Productos agrcolas:
agrcolas utilizacin de inoculantes de leguminosas y para
silos. Control biolgico ej: Bacillus thuringensis

Tipo de cultivo a escala industrial

Cultivo en Batch
Cultivo Fed-Batch
Cultivo Continuo

Etapas del proceso aerobio a anaerobio

1.
2.
3.
4.

Preparacin del medio de cultivo

Esterilizacin
Preparacin del inculo
Crecimiento del microorganismo en el
fermentador
5. Extraccin y purificacin
6. Disposicin de efluentes

Biomasa

Cultivo
stock

Matraz de
laboratorio

Fermentador
inoculante

Medio esterilizado

Sobrenadante
Fermentador de
Produccin
Extraccin del
Producto

Preparacin
del medio
Envasado

Purificacin del
Producto

Tratamiento de
efluentes

Procesos de inters
Levaduras: panificacin, bebidas alcohlicas, etanol,
vitaminas
Iniciadores para la industria alimentaria: bacterias cido
lcticas (BAL)
Inoculantes para la fijacin de nitrgeno: Rhizobium,
Bradyrhizobium, para control biolgico Pseudomonas,
Thrichoderma harzianum)
Proteinas unicelulares, de levaduras, bacterias
Bioinsecticidas: Bacillus thuringensis
Virus y bacterias para vacunas

Productos de fermentaciones

Metabolitos primarios
Etanol

Alcohol comn
Alcohol para combustible
Alcohol de bebidas destiladas
Vino
Cerveza
Sidra

Acidos orgnicos
Ctrico: A. Niger
Propinico: Propionibacterium
Lctico: bacterias del cido lctico

Metabolitos primarios
Vinagre
Acetobacter sp y Gluconobacter

Solventes
Acetona y butanol: Clostridium acetobutilicum

Aminoacidos
Vitaminas
B12 Propionibacterium
Riboflavina

Polisacridos
Dextranos
Xantanos

Leuconostoc
Xanthomonas

Fermentaciones lctica y
alcohlica

Lactobacillus

Streptococcus

Leuconostoc

Principales estrategias aplicadas en la

industria lctea

1. Utilizar el producto de un microorganismo que

puede modificarse genticamente o no (EPS,
sustancias antimicrobianas, bacteriocinas)

2. Utilizar organismos genticamente

modificados (OGMs) como starters.

La industria de los fermentos lcticos busca

permanentemente nuevas cepas para integrar a
sus productos
a.
b.
c.

Cepas nativas (estudiar posibilidades de uso

industrial)
Obtener mutantes espontneas por ej: resistencia a
fagos.
Modificacin de las cepas para aprovecharlas mejor
en la industria.

Actividades importantes:
de las BAL

actividad proteoltica
capacidad de autlisis
resistencia a fagos
produccin de bacteriocinas

produccin de compuestos
aromticos y otras actividades enzimticas.

Sustancias con actividad antimicrobiana

producidas por la BAL
1. Varios compuestos antimicrobianos como: cidos
orgnicos, etanol, diacetilos, perxido de H (H2O2)
2. Bacteriocinas, son pptidos que inhiben a cepas
relacionadas ( patgenas como Bacillus, Clostridium,
Staphylococcus y Listeria)
Nisina producida por Lactococcus lactis de uso permitido
Acidofilina, producida por L. acidophilus. (contra E. Coli y
Salmonella panama).

Otras propiedades producidos por BAL.

(texturizantes naturales o EPS)
juegan un rol importante en evitar la separacin
del agua (sinresis), por ej. Yogur
S. thermophilus LY03 se usa como cepa modelo de
estudio, produce dos heteropolisacridos compuesto
de glucosa y galactosa

Preparaciones comerciales de quimosina

recombinantes
ADN de origen

Ismero de
quimosina

m.o productor

Nombre
comercial

Estmago de
ternero

Kluyveromyces
lactis

MAXIREN

Estmago de
ternero

Aspergillus

CHYMOGEN

Biosinttico

A/C

niger
E. coli

CHY-MAX

Preparaciones comerciales a partir de Lactococcus lactis,

Saccharomyces cereviseae y Bacillus se encuentran en desarrollo

Probiticos
Se definen como Alimentos suplementados con
microorganismos viables que benefician al
consumidor por mejoramiento del balance
microbiano

Criterios para seleccin de probiticos

1) Seleccin por su habilidad de sobrevivir en el
tracto gastrointestinal
2) Produccin de sustancias antimicrobianas
3) Bajo tg (alta vc), buena vida media
4) No patgenas y con habilidad para estabilizar la
microflora
Habilidad de sobrevivir a bajo pH y en la
presencia de bilis

Produccin de levaduras
Son los microorganismos ms ampliamente
utilizados en la industria
Importancia econmica
a) biomasa celular ( para pan, cerveza, vino)
b) componentes celulares (vitaminas, aa, )
c) productos finales de la fermentacin (etanol,
CO2)
El proceso de produccin de material celular es
aerbico.
El proceso de fermentacin alcohlica es
anaerbico.

Fermentacin alcohlica
MOSTO

Glucosa
Fructosa (200g/l)
pH = 3.0-3.8
Anaerobiosis
Acidos:tartrico y
mlico
aa, NH4+, vitaminas

VINO
Etanol (11%)
Azcares < 2g/l
pH = 3.0-3.8
Acidos =
aa, NH4+, Vit.
+ AROMAS

Fermentacin malolctica
VINO A
Etanol (11%)
pH = 3.0-3.8
Acidos:tartrico y
mlico
aa, NH4+, Vit.
+AROMAS

VINO B
Etanol (11%)
pH
0.1-0.2 u
Acidos: tartrico =
mlico
lctico
aa, NH4+, Vit.
++ AROMAS

Bacilos G+, esporulados

Ej. Bacillus
Endosporas resistentes
Son anaerobios facultativos
Importancia:
* B. anthracis patgeno a humanos y
animales
* B. subtilis y B. polymyxa productores de
antibiticos
* B. thuringiensis control biolgico de
insectos.
Biodegradadores, produccin de enzimas.

Otros ejemplos de aplicacin

Insecticida microbianos
B. popillae y B. thuringiensis
Esporulados, flagelos pertricos
Producen toxinas y un cuerpo
paraesporal: protena txica que en el
intestino de los insectos produce
parlisis de las larvas.
Se utilizan como esporas muertas
por calor en cultivos vegetales.

Bacilos GEj: Agrobacterium

El gnero comprende organismos que producen tumores en
vegetales.
* A. tumefaciens posee un plsmido Ti responsable de la
virulencia.
* Se han construdo vectores de
transferencia generalizado para plantas

Bacilos GRhizobium
Mviles
Poseen grnulos
No forman esporas
EPS (plsticos sintticos)
Fijan N2 en simbiosis (FBN)

Bacilos GPseudomonas
*
*
*
*
*

Importantes en suelos:
Denitrificacin (P. fluorescens, P. aeruginosa)
Enfermedades en plantas (P. syringae)
Enfermedades en animales
Biocontrol
Biodegradacin

Actinomicetes
Ej: Streptomyces
G+, aerobios, producen geosminas (aroma a
tierra mojada).
*Producen antibiticos
*Algunos son patgenos (podredumbre de la
papa)

Antibiticos
Son productos del metabolismo secundario
La mayora de los comerciales son producidos por hongos y
bacterias
Se conocen ms de 8000 sustancias antibiticas y cada ao
se descubren cientos de nuevos productos
Produccin de antibiticos

1)

Deteccin de organismos productores (siembra de suspensiones de

suelo en medios slidos: colonias con halos de inhibicin)

2)

Mtodos de extraccin y purificacin eficientes y obtencin de un

producto cristalino de elevada pureza

3)

Acabar con un producto nico en alta concentracin

4)

Determinar el espectro de accin (microorganismos sensibles)

Clostridium , G+
Endosporas
Comn en suelos
Producen poderosas toxinas.
Causantes de ttanos,
botulismo, gangrena gaseosa.
Se usan para producir
butanol por fermentacin.
Algunos fijan N2

Usos de microorganismos y sus productos en

bioensayos

Dosificaciones:
Dosificacin de antibiticos
Dosificacin de vitaminas y aminocidos

Biosensores

Uso de microorganismos para remocin de metales

pesados de suelos y aguas
* Bacterias como: Ralstonia eutropha y Ps. mendocina, son
resistentes a los metales pesados por la presencia de un
sistema de eflujo eficiente
* Algunas promueven la bioprecipitacin ej: biomineralizacin
y/o cristalizacin por pp de metales en la superficie celular.
* Este fenmeno se puede deber a la sntesis y secrecin de
exopolmeros (EPS, protenas).
* Contienen plsmidos de resistencia a Cd, Co, Cr, Cu, Pb, Hg,
Ni y Zn
**** el tratamiento de suelos y efluentes contaminados es una

de las aplicaciones potenciales de este tipo de microorganismos