ESPECTROSCOPIA UV-VIS

PRINCIPIO DEL MTODO

La espectroscopia UV-VIS involucra la
absorcin de radiacin UV-VIS por una
molcula (e- valencia), causando la promocin
de un electrn de un estado basal a uno
excitado, liberndose el exceso de energa en
forma de calor o mediante reacciones
fotoqumicas (fluorescencia o fosforescencia)
Algunos enlaces, como los dobles, generan
coloracin en las molculas ya que absorben
energa en el visible as como en el UV

Todas las molculas orgnicas son capaces de absorber la

radiacin electromagntica en esa zona del espectro.
Las energas de excitacin relacionadas con los electrones que
forman los enlaces ms sencillos son muy elevadas de forma
que su absorcin se restringe a la zona del UV de vaco (<185
nm), lo que genera problemas de trabajo experimental
Por encima de 185 nm la absorcin se restringe a enlaces ms
complejos o ciertos grupos funcionales (cromforos) con
electrones de valencia con energas de excitacin ms bajas

MEDIDA
La espectroscopia de absorcin molecular se
basa en la medida de la transmitancia T o de la
absorbancia A de disoluciones que se
encuentran en cubetas transparentes que
tienen un camino ptico de b cm

Las prdidas por reflexin son importantes. Por ejemplo, se puede demostrar que
aproximadamente el 8,5% de un haz de luz amarilla se pierde por reflexin cuando
incide perpendicularmente a travs de una cubeta de vidrio llena de agua.
Adems de las prdidas por reflexin, puede darse dispersin de la potencia del haz al
atravesar la disolucin debido a molculas grandes o irregularidades del disolvente.
Para compensar estos efectos se comparta la potencia del haza transmitido por la
disolucin con la potencia del haz transmitido en una cubeta solo con disolvente

TERMINOS Y SIMBOLOS

EJERCICIO

LEY DE BEER PARA

MEZCLAS

Calcular los datos de absorbancia para las

disoluciones
no
tamponadas
cuyas
concentraciones totales de indicador estn
comprendidas entre 2x10-5 y 16x10-5 M

LIMITACIONES DE LA LEY DE
BEER

DESVIACIONES QUMICAS

DESVIACIN DE UNA
SOLUCIN NO TAMPONADA

DESVIACIN POR LUZ

POLICROMATICA

DESVIACIN POR
RADIACIN PARASITA

INSTRUMENTO

ESPECTROFOTMETRO
Los espectrofotmetros UV-VIS son aquellos
instrumentos en los que se mide la absorcin o
trasmisin de la radiacin en la regin ultravioletavisible
Utilizan un complejo sistema ptico de seleccin de
longitud de onda (monocromador).
Permiten seleccionar la longitud de onda en forma
continua y en algunos casos con precisin de
dcimas de nm. Por lo tanto, es posible obtener en
forma continua el espectro de absorcin de una
molcula.

TIPOS DE INSTRUMENTOS
haz sencillo
Doble haz
Multicanal
Doble dispersin
Longitud de onda dual

COMPONENTES

ESPECTROFOTMETRO HAZ
SENCILLO
Tipo de espectrofotmetro ms simple, se
basa en la absorcin de la luz al pasar un
solo haz por la muestra a una longitud de
onda especifica
Este
instrumento
produce
luz
monocromtica y la detecta despus de
atravesar la muestra de estudio

CARACTERISTICAS
Equipo sencillo y econmico
Trabajan en la regin Vis y otros en la regin
UV/Vis
Producen anchos de banda de 2 - 8 nm.
DESVENTAJAS
Presencia de ruido de parpadeo de las fuentes y
detectores
Cambios de intensidad de la fuente y
sensibilidad del detector con la longitud de onda
de trabajo

ESPECTROFOTMETRO
DOBLE HAZ
En este tipo de instrumento la radiacin se divide
en dos (Po similares) uno pasa por la muestra y el
otro al blanco.
El doble haz realiza correcciones por:
La intensidad de la fuente de luz
Sensibilidad (respuesta) del detector
Transmisin del monocromador

VENTAJAS
Resultados ms confiables
Operan
automticamente,
eliminan
manuales (ahorrando tiempo)

ajustes

COMPONETES OPTICOS
Espejos giratorios: dividen el haz, ambos se juntan
por un espejo reticular que refleja uno y trasmite el
otro.
Detector: recibe pulsos alternativos del haz de
referencia y de la muestra
Sistema de seales: compara la respuesta de los
dos haces y efecta la correccin.
Dispositivos que igualan la intensidad de los dos
haces.

ESPECTROFOTMETRO
MULTICANAL
Tienen pocos componentes pticos
Obtencin rpida de barrido y espectros (1s)
Se acoplan a diferentes ordenadores personales
Elevada relacin S/N
Determinacin simultnea de multicomponentes

COMPONENTES
Lmparas intercambiables de deuterio y
tungsteno
El haz de luz despus de atravesar la
muestra se enfoca en la rendija de entrada y
pasa a una red de reflexin hologrfica
El detector es de serie de diodos de silicio
que consta de 316 elementos

FUENTE DE RADIACIN
Su misin es la generacin de un haz de
radiacin con suficiente potencia de salida y
estabilidad para que se detecte y se mida
con facilidad.
Pueden ser CONTINUAS , que emiten
radiacin que varia su intensidad en un
amplio y DISCONTINUAS O DE LNEAS,
que emiten un nmero limitado de lneas o
bandas de radiacin, cada una de las cuales
abarca un limitado .

FUENTES USADAS EN ESPECTROSCOPA

FUENTE

CONTINUAS

DE LINEAS

(nm)

TIPO DE ESPECTROSCOPIA

Lmpara de Xenn

250-600

Fluorescencia molecular y Raman

Lmpara de
Hidrogeno/Deuterio

160-380

Absorcin molecular (UV)

Lmpara de Wolframio

350-2200

Absorcin molecular (Visible/IR cercano)

Lmpara de
Wolframio/Halgeno

240-2500

Absorcin molecular (UV/Visible/IR

cercano)

Lmpara de Nicrom

750-20000

Absorcin molecular (IR)

Lmpara de Nernst

400-20000

Absorcin molecular (IR)

Fuente Globar

1200-40000

Absorcin molecular (IR)

Lmpara de Ctodo hueco

UV-Visible

Absorcin y fluorescencia atmica

Lmpara de descarga sin

electrodos

UV-Visible

Absorcin y fluorescencia atmica

Lmpara de vapor metlico

UV-Visible

Absorcin atmica, Fluorescencia molecular

y Raman

Lmpara LASER

UV-Visible-IR

Absorcin molecular , Fluorescencia

molecular y Raman

Lmpara de Wolframio
Lmpara de Deuterio

Arco de Xenn

CONTINUAS

Visible/IR
UV

SISTEMA PTICO

SELECTORES LONGITUD DE
ONDA
Para la mayora de los mtodos
espectroscpicos
se
necesita
una
radiacin constituida por un grupo limitado
y continuo de estrechas denominado
banda.

Para aislar una banda estrecha se utilizan

dos tipos de selectores: FILTROS Y
MONOCROMADORES

FILTROS
Su objetivo consiste en absorber toda la
radiacin procedente de la fuente continua
excepto una banda. Se caracterizan por su de
transmisin mxima y el ancho efectivo de
banda, que es la anchura de la banda para que
la absorbancia se reduzca a la mitad.
Pueden ser de dos tipos:
De Absorcin : Limitan la radiacin
absorbiendo ciertas regiones del espectro, y
que producen anchos efectivos de banda entre
30 y 250 nm.

 De Interferencia: Se basan en la
interferencia ptica para producir
bandas relativamente estrechas. Se
construyen
con
un
dielctrico
transparente, CaF2 MgF2, que ocupa
el espacio entre dos pelculas
metlicas semitransparentes muy
delgadas, generalmente de Ag. Todo
ello colocado entre dos capas de
vidrio transparente.
El grosor de la capa dielctrica, t, se
controla
cuidadosamente
y
determinar la que se transmite.

 Para que exista reforzamiento en 2 (rayo reflejado en

produzca una interferencia constructiva con el rayo
que incide en 2), la diferencia de camino ptico entre
los rayos debe ser un mltiplo entero de la en el
medio dielctrico.

MONOCROMADORES
Dispersan la radiacin separando espacialmente las
distintas de la luz policromtica proporcionando bandas
de anchura pequea. Varan de forma continua y en un
amplio y al mismo tiempo aslan una pequea banda
de la luz policromtica.
COMPONENTES:
1. Rendija de entrada
2. Lente colimadora o espejo cncavo que produce
un haz paralelo de radiacin
3. Elemento que dispersa la radiacin en sus
longitudes de onda individuales: prisma o red
4. Elemento de enfoque de salida
5. Rendija de salida

TIPOS DE
MONOCROMADORES

MONOCROMADOR DE
PRISMA
Un prisma dispersa la luz solar en siete colores
diferentes. Esto sucede por la refraccin de la luz. Las
radiaciones se refractan a diferentes medidas debido a la
diferencia en el ndice de refraccin del vidrio para las
diferentes longitudes de onda. Longitudes de onda corta
se refractan ms que las longitudes de onda mayores.

En un monocromador de prisma se obtiene un fino

haz de luz de la fuente cuando se hace pasar a
travs de una rendija de entrada. Despus es
colimado en el prisma con la ayuda de una lente.
Los rayos refractados se enfocan en una rendija de
salida. El prima se gira entonces en una forma
predeterminada para proporcionar la longitud de
onda deseada.

REJILLAS
MONOCROMADORAS
Una rejilla se hace cortando o grabando una
serie de ranuras paralelas espaciadas
estrechamente sobre la superficie lisa
reflectante de un material slido.
La superficie se hace reflectante mediante
una capa delgada de aluminio en l y el
ataque qumico se realiza con la ayuda de
una herramienta de diamante.

La intensidad de la radiacin reflejada por

una rejilla vara con la longitud de onda, la
longitud de onda de mxima intensidad es
dependiente del ngulo del cual la radiacin
se refleja de la superficie de la lnea de la
rejilla.

En la rejilla monocromadora ver figura 22, un fino

haz de la luz de la fuente cae sobre un espejo
cncavo a travs de una rendija de entrada. Esto
se refleja entonces en la rejilla la cual lo dispersa.
La radiacin dispersa se dirige entonces a una
rendija de salida. La gama de longitudes de onda
aislada por el monocromador se determina por el
grado de dispersin de la rejilla y la anchura de la
rendija de salida.

DETECTOR

DETECTORES
Un detector es un dispositivo que convierte una
propiedad fsica en una seal de medida , si esa seal
es elctrica y puede amplificarse, manipularse y
finalmente convertirse en nmeros que representan la
magnitud de la seal original, se trata de un
transductor.
Un transductor ideal de radiacin electromagntica
debe responder rpidamente a bajos niveles de energa
radiante en un amplio .

 sa seal elctrica producida debe ser directamente

proporcional a la potencia del haz P : donde es la
respuesta elctrica del detector en unidades de
corriente, resistencia o potencial , la potencia la
sensibilidad del detector y la que mide el detector
cuando no llega radiacin y que se puede y debe
compensar electrnicamente para que su valor sea 0.

TIPO DE DETECTORES
FOTNICOS :
Se basan en la interaccin de la radiacin (fotones) con una
superficie reactiva que produce electrones (fotoemisin) o
que eleva electrones a estados de E a los cuales pueden
producir electricidad (fotoconduccin).
Su uso esta restringido a las regiones UV-Visible, ya que los
fotones de estas no tienen suficiente E para producir
fotoemision en la regin del IR
DE CALOR O TERMICOS :
Poseen una diminuta superficie ennegrecida que al absorber
la radiacin IR (E), y en consecuencia aumenta la
temperatura, ese aumento se convierte en una seal
elctrica que se amplifica y se mide.

FOTOTUBOS
Est formado por un ctodo semicilndrico y un nodo de
filamento en una ampolla de cuarzo o vidrio donde se ha hecho
el vaco.
Entre los electrodos se aplica un voltaje y el material
fotosensible del ctodo (generalmente xidos de metales
alcalinos) emite electrones al ser irradiado : Efecto fotoelctrico.
Debido al voltaje aplicado entre los electrodos, los electrones se
dirigen al nodo, por el circuito fluye una corriente cuya
intensidad es directamente proporcional a la intensidad de la
radiacin que la provoca.
Se emplea en UV-V (150-1000 nm)

TUBOS FOTOMULTIPLICADORES.
Es un fototubo con una superficie fotoemisora (ctodo fotosensible), y
varias superficies adicionales que emiten una cascada de electrones
cuando son alcanzadas por los electrones procedentes del rea
fotosensible (dinodos)
Al incidir cada fotoelectrn sobre la superficie del dinodo cada electrn
acelerado produce nuevos electrones, que se aceleran hacia el
dinodo , y as sucesivamente, amplificndose la seal.

TUBO FOTOMULTIPLICADOR

RECIPIENTES PARA LAS

MUESTRAS

RECIPIENTES PARA LAS

MUESTRAS
Reciben el nombre de celda o cubeta y se
fabrican de :
plstico o vidrio (para la regin Visible)
slice fundido (cuarzo) (para la regin
Visible y UV)
vidrio de silicato para medidas entre 375 y
2000 nm (V e IR)
La longitud mas comn en la trayectoria de las
cubetas para Visible y UV, suele ser de 1 cm,
aunque las puede haber menores o mayores.