MICROBIOLOG

IA CLINICA

MICROBIOLOGA
Ciencia que estudia a los organismos que no
se pueden ver a simple vista y que constituyen
el mundo microscpico : VIRUS BACTERIAS PROTOZOOS
HONGOS UNICELULARES

Tamao pequeo (consecuencias metodolgicas)

1. Uso de microscopio y normalmente tinciones.
2. Generalmente se estudian poblaciones enormes y se
sacan promedios.
3. Es muy raro estudiar un individuo cada vez.

Unicelulares que pertenecen al grupo de los

protistos inferiores. Son clulas de tamao variable
cuyo lmite inferior est en las 0,2um y el superior en
las 50um.

Clasificacin Bacteriana
Caractersticas
Fenotpicas
Morfologa
Cocos,

Bacilos, Espirilos
Gram positivo, Gram Negativo
Biotipeo

Bionmero

Serotipeo
Fagotipeo
Patrones

Antimicrobianos

Clasificacin segn su forma

Las ms comunes:
1) Cocos; 2) Bacilos;

3) Vibrios;

4) Espirilos

Otras formas son: filamentos, anillos casi cerrados, con

prolongaciones (prostecas)
5

Relacin entre forma y el

modo de vida
Cocos

Forma redondeada
(relacin superficie
volumen mnima)
Poca relacin con
el
exterior
Viven en medios
ricos en nutrientes
Se transmiten por
el aire
Muy resistentes
Suelen ser
patgenas

Bacilos

Forma alargada,
cilndrica (mayor
relacin superficie
volumen)
Obtienen
nutrientes de
manera ms eficaz

Espirilos y Vibrios

Forma de hlice y
de coma
Viven en medios
viscosos
Pequeo dimetro

Atraviesan
fcilmente las
Viven en medios
pobres en nutrientes mucosas
(suelos, aguas)

Menos resistentes
Suelen ser
saprfitas

Patgenas por
contacto directo o
mediante vectores
6

Clasificacin bacteriana
Analtica

Genotpica
Radio

Guanina ms
Citosina

Hibridacin

del DNA

Anlisis

de la secuencia
del Ac. Nucleico

Anlisis

de la secuencia
del plsmido

Reaccin

en cadena de
la polimerasa (PCR)

Anlisis

de los
componentes de la
pared celular

Anlisis

de la
composicin de los
lpidos totales

Anlisis

de la
composicin proteica

Tipeo

enzimtico

Cocos y Bacilos

Organismo Espirilar

Caractersticas de las
Eubacterias
Tipos de agrupacin
Cocos
Diplococos

dos cocos
Streptococos
cadenas
Ttradas y Sarcinas
Racimos

Bacilos
Letras

chinas
Empalizadas

Diplococcos
Streptococcus
Pneumoniae (+)

Neisseria spp.
(-)

Streptococcus: cocos en
cadenas

Eubacterias: tamao
Micrmetros:
Micras

1x10-6 metros

(um)

Cocos:

0.75 um a 1 um de dimetro

Bacilos:

0.5 a 1 um de dimetro
2 a 5 um de largo

Estructura Bacteriana

1)

Cpsula; 2) pared; 3) membrana; 4) mesosomas; 5) ribosomas;

6) flagelo; 7) ADN, cromosoma o genoma; 8) plsmidos.

14

Elementos estructurales
Cpsula: Se presenta en muchas bacterias, sobre todo patgenas. Es una estructura
viscosa compuesta por sustancias glucdicas. Tiene funcin protectora de la
desecacin, de la fagocitosis o del ataque de anticuerpos.
Pared Bacteriana: Formada por pptido glucanos y otras sustancias. Es una envoltura
rgida que soporta las fuertes presiones osmticas a las que est sometida la
bacteria. Por la estructura de su pared distinguiremos las bacterias Gram+ y Gram-.
Membrana plasmtica: Similar en estructura y composicin a la de las clulas
eucariotas.
Presenta unos repliegues internos llamados meso somas.
Mesosomas: Repliegues de la membrana con importantes funciones pues contienen
importantes sustancias responsables de procesos metablicos como el
transporte
de electrones, la fotosntesis o la replicacin del ADN.
Ribososmas: Similares a los de la clula eucariota aunque de menor tamao.
Intervienen
en la sntesis de protenas.
Cromosoma bacteriano: Est formado por una sola molcula de ADN de doble hlice,
circular superenrrollada y no asociado a histonas. Suele estar unida a los mesosomas

Plsmidos: Molculas de ADN extra cromosmico tambin circular.

Inclusiones: Depsitos de sustancias de reserva.
Fagelos: Estructuras filamentosas con funcin motriz, formados por fibrillas proteicas
Fimbrias o Pili: Filamentos largos y huecos con funciones relacionadas con el
intercambio de material gnico y la adherencia a sustratos.
15

Cromosoma Bacteriano
El

ADN de la bacteria
est constituido por
una sola molcula en
doble hlice (esta
molcula es muy
grande en
comparacin con el
tamao de la
bacteria), circular,
sper enrollada y
asociada a protenas
no histonas. Suele
estar unida a los
mesosomas.

16

Plsmidos
En

las clulas bacterianas

puede haber tambin una o
varias molculas de ADN
extracromosmico de
menor masa molecular que
el cromosoma denominadas
plsmidos.

Estos

plsmidos en algunas
bacterias pueden tener
genes que las protegen de
los antibiticos o tambin
genes que intervienen en
los procesos de
reproduccin (plsmido F).

17

Principales Estructuras
Bacterianas
Externas a la Pared
Flagelo
Pili o Fimbrias
Cpsula

Celular

Internas a la Pared Celular

Membrana citoplsmica
Citoplasma y sus inclusiones
Material Nuclear
Endosporas

Flagelos
Son

apndices filiformes
de mayor longitud que la
bacteria que permiten su
locomocin.
Se
presentan en nmero y
disposicin variable y
estn
formados
por
fibrillas
proteicas
compuestas
de
una
protena
llamada
flagelina.

20

Flagelo
Para

la locomocin
Flagelina

protena contrctil

Usada

en la
clasificacin
bacteriana
Componentes:
Estructura basal
Gancho
Filamento

flagelina

Estructura del Flagelo

Flagelo
Clasificacin
Atrico:

Sin flagelo
Monotrico: Un flagelo en un extremo
Anfitrico:Uno o ms flagelos en cada
extremo
Lofotrico:
Mechn de flagelos en un
extremo
Anfilofotrico:Mechn de flagelos en cada
extremo
Peritricos:
Flagelos alrededor de toda la
bacteria

Tipos de Flagelos

Peritricos

Polar

Lofotrico

Fimbrias o pili entre bacterias

Son

filamentos huecos, delgados

y rectos, situados en la superficie
de determinadas bacterias y cuya
funcin no est relacionada con la
locomocin, sino con la
adherencia a los substratos y el
intercambio de fragmentos de
ADN durante la conjugacin.

Ms

pequeos, ms cortos y ms
numerosos que los flagelos
Factor de Adherencia (un factor de
patogenicidad)
Solo vistos usando el microscopio
electrnico
Funciones:
Sexual (recombinacin
bacteriana)
Anclaje para virus (super
infecciones)
Adherencia a las superficies
mucosas

25

PILI O FIMBRIA

Bacteria Encapsulada
En

numerosas bacterias se forma en

la parte externa de la pared una
cpsula viscosa compuesta por
sustancias glucdicas. polisacaridos
Esta envoltura, (F. patogenicidad)
que se presenta en casi todas las
bacterias patgenas, las protege de
la desecacin y de la fagocitosis por
los leucocitos del hospedador, as
como del ataque de los anticuerpos,
lo que aumenta la virulencia de las
bacterias encapsuladas.
La presencia de la cpsula no es,
sin embargo, un carcter
diferenciador, pues determinadas
bacterias pueden o no formarla en
funcin de los medios de cultivo.
Permite realizar una evasin de la
accin de sistema inmune
Detectada usando la tincin de tinta
china

27

Cpsula

Pared Bacteriana
Est presente en todas las bacterias. Es una envoltura rgida, exterior a
la membrana. Da forma a la bacteria y segn su composicin confiere
ciertas particularidades a las bacterias, lo que permite su clasificacin
en Gram positivas y Gram negativas.

En las Bacterias Gram-positivas, la pared externa de la

envoltura celular tiene como base qumica fundamental el
peptidoglicano el que junto al resto de sus componentes
forman una malla especial llamada sculo de murena, de
vital importancia para conservar la forma y darle rigidez a la
clula bacteriana. Una funcin de esta pared es regular el
potencial hdrico de la clula. Si no existiera, la clula
podra reventar, debido a su gran potencial osmtico.
29

Pared Bacteriana (continuacin)

En

las bacterias Gram

positivas la red de
peptidoglucanos origina varias
capas superpuestas, es gruesa
y homognea y no hay
membrana externa.

En las Gram negativas

hay una sola capa de

peptidoglucanos sobre la que
se dispone una membrana
externa constituida por una
capa de fosfolpidos y otra de
glicolpidos asociados, estos
ltimos se asocian a
polisacridos que se
proyectan hacia el exterior

30

En las Bacterias Gram- negativas, la pared casi no

contiene peptidoglicano; presenta lipolisacaridos,
lipoprotenas y protenas: Es una estructura de dos
membranas: externa e interna; y entre ellas un espacio
periplasmtico. Esta membrana funciona
principalmente como una especie de filtro (porinas) y
gracias a esta selectividad de sustancias, las
bacterias Gram negativas son menos susceptibles a
los antibiticos.

31

Pared Celular
Estructura

rgida que protege y le da la

forma a las bacterias
Es una estructura exclusiva de las
bacterias
Indispensable en la replicacin bacteriana
Su estructura qumica permite dividir a las
bacterias en tres grupos:
Bacterias Gram positivo (azules)
Bacterias Gram Negativo (rojas)
Bacterias Gram Variable
Gram positivo que se decolora con
facilidad

Pptidoglucanos en la pared bacteriana

Los

pptidoglucanos de la pared bacteriana estn formados por

anillos de un polisacrido complejo enlazados por un oligopptido

34

Pared Celular
Estructura Qumica
Acido

Diaminopimlico
Acido Murmico
Acido Teicoico
Peptidoglican:
Estructura polimrica
Cadenas salteadas de Acetil
Glucosamina (AGA) y Acetil
Murmico (AMA)
Unidas entre s por un pptido de 5
a 6 aminocidos de configuracin D

Peptidoglican

Diferencias entre bacterias

Gram positivo y Gram Negativo
Gram Positivo
Pared celular

(tie azul)
menos compleja, pero ms
gruesa y resistente
Tiene Acido Teicoico

Gram Negativo (tie rojo)

Pared celular ms compleja

paro ms

delgada y menos resistente

Rica en aminocidos y lpidos
Tiene LPS (lipopolisacridos) o endotoxina
bacteriana
Presentan una membrana externa

Espacio Periplsmico
Solo en
Gram Negativo

Gram positivo vs Gram negativo

Gram Positivo
2 capas:
1.
Membrana citoplsmica
interna
2.
Capa de peptidoglican

Gram Negativo
3 capas:
1.
2.

3.

Membrana citoplsmica
interna
Delgada capa de
peptidoglican

Membrana externa

Bajo contenido de lpidos

Alto contenido de lpidos

Sin endotoxinas (excepto

Listeria monocytogenes)

LPS

Sin espacio periplsmico

Espacio periplsmico

Sin canales de porinas

Canales de porinas

Sensibles a pencilinas y
lisozimas

Resistentes a penicilinas y
lisozimas

LPS o Endotoxina
Bacteriana
Compuesto
Lpido

por:

A:
Actividad Endotxica
Polisacrido: Antgeno de clase
Antgeno O: Serotipeo de
especie

Estructuras Internas
Membrana Citoplsmica
Igual

que la membrana de una clula superior

Bicapa

fosfolipdica que controla el paso de

nutrientes y deshechos

Lugar

donde se encuentran los citocromos,

responsables de la respiracin celular
(respiracin oxidativa)

Se

encuentran las protenas transportadoras

Estructuras Internas
Mesosoma
Invaginacin

de la
membrana celular
Asociada a
procesos vitales
como el transporte
de electrones
(produccin de
energa)
Es quien forma el
septo en la
reproduccin
celular

Estructuras Internas
Citoplasma
Area Citoplsmica
Rica en RNA
Area Nuclear
Rica en DNA
Inclusiones
Grnulos metacromticos
Alamidn
Acido

B-hidroxibutrico

Endosporulacin
Forma

de resistencia bacteriana
Se presenta solo en condiciones
desfavorables para la clula
Solo en algunas bacterias Gram
positivo
Una espora por clula vegetativa
Una clula vegetativa da origen a
una espora y esta a su vez da
origen a una clula vegetativa

Esporulacin

Tipos de Esporas

Terminal
Subterminal
Central

Relacin al oxgeno
Aerobios

Requieren

del oxgeno

Anaerbicos
Se

inhiben con el oxgeno

Facultativos
Mejor

adaptacin

Capnoflicos
Requieren

CO2

Microaeroflicos
Requieren

del oxgeno pero en pequea cantidad

Cocos Gram Positivo

Aerbicos
Catalasa Positivo
Micrococcus
Stomatococcus
Staphylococcus
Coagulasa positivo
Staphylococcus aureus
Coagulasa Negativo
Catalasa Negativo
Aerococcus, Enterococcus
Streptococcus, Leuconostoc
Pediococcus, Lactococcus

Bacilos Gram Positivo

Aerbicos
Actinomycetos con Acido Miclico
Corynebacteriaceae
Nocardiaceae
Gordona, Nocardia, Tsukamurella,
Mycobacteriaceae

Rodococcus

Actinomycetos sin Acido Miclico

Actinomadura, Nocardiopsis, Streptomyces,

Trophyrema
Actinomycetes termfilos
Saccharomonospora, Saccharopolyspora
Miscelneos
Arcanobacterium, Bacillus, Erysipelothrix,
Gardnerella, Listeria

Bacterias Anaerbicas
Cocos Gram positivo
Peptostreptococcus,
Cocos Gram
Veillonella

Peptococcus

negativo

Bacilos Gram positivo

Actinomyces, Bifidobacterium,

Clostridium, Eubacterium,
Lactobacillus, Mobilluncus,
Propionibacterium
Bacilos Gram negativo
Bacteroides, Fusobacterium,
Prevotella, Porphyromonas

Cocos y Coco bacilos

Gram negativo
Branhamella
Branhamella

catarrhalis

Moraxella
Moraxella lacunata
Moraxella osloensis
Bacterias con tincin

bipolar

Neisseria
Neissria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Neisserias saprfitas

Bacilos Gram negativo

Fermentadores
Enterobacteriaceae
Citrobacter, Enterobacter,

Escherichia,
Klebsiella, Morganella, Proteus, Salmonella,
Serratia, Shigella, Yersinia

Vibrionaceae
Vibrios haloflicos
Relacin al NaCl

y no haloflicos

Aeromonadaceae
Aeromonas hydrophila
Aeromonas caviae
Plesiomonadaceae
Plesiomonas shigelloides

Bacilos Gram negativo

Fastidiosos
Pasteurellaceae
Actinobacillus, Haemophilus,
Bordetella
Bordetella

Pasteurella

pertussis, Bordetella
parapertussis
Bordetella bronchiseptica

Brucella
Brucella

abortus
Brucella mellitensis

Legionella
Legionella

pneumophila

Bacilos Gram negativo

No fermentadores
Pseudomonadaceae
Pseudomonas aeruginosa,

Pseudomonas fluorescenes,
Pseudomonas putida

Miscelneos
Acinetobacter,

Bartonella,
Burkholderia, Capnocytophaga,
Cardiobacterium, Eikenella,
Francisella, Stenotrophomonas,
Streptobacillus, Cardiobacterium

Bacilos Gram negativo

Microaeroflicos
Campylobacter
Arcobacter
Campylobacter

jejuni
Campylobacter coli
Campylobacter lary
Helicobacter
Helicobacter

pylori

Bacterias Miscelneas de
importancia mdica
Mycoplasmataceae
Mycoplasma, Ureaplasma
Spirochaetaceae
Borrelia, Treponema
Leptospiraceae
Leptospira
Chlamydiaceae
Chlamydia
Otras
Coxiella,

Ehrlichia, Orientia, Rickettsia

Funciones de Nutricin
Bacteriana

AUTTROFAS:

Emplean
compuestos
inorgnicos para
sintetizar
compuestos
orgnicos

Las auttrofas fotosintticas, como las bacterias sulfurosas

verdes y purpreas, no utilizan agua como dador de electrones en
la fotosntesis, sino otros compuestos, como el sulfuro de
hidrgeno, y no producen oxgeno. Al poseer pigmentos que
absorben luz casi infrarroja, pueden realizar la fotosntesis
prcticamente sin luz visible.
Las auttrofas quimiosintticas, a diferencia de las fotosintticas,
utilizan la energa que desprenden ciertos compuestos inorgnicos
al oxidarse. Transforman el CO2 en compuestos hidrogenados
(anabolismo). Sus fuentes son oxidadacin del hierro, bacterias
nitrificantes que oxidan sustancias amoniacales, bacterias
sulfooxidantes que oxidan el azufre.

HETERTROFAS:

Las bacterias de vida libre suelen ser saprfitas, viven sobre

materia orgnica muerta.
Muchas viven en relacin estrecha con otros organismos De ellas,
la mayora son comensales y no causan daos ni aportan
beneficios a su husped, algunas son parsitas (producen
enfermedades) y otras son simbiontes (flora bacteriana intestinal)

Emplean
compuestos
orgnicos para
sintetizar sus
propios
compuestos
Independientemente del tipo de nutricin, las bacterias pueden necesitar el
orgnicos

oxgeno atmosfrico (bacterias aerobias) o no (bacterias anaerobias). Para

algunas bacterias anaerobias el oxgeno es un gas venenoso (anaerobias
estrictas), otras lo utilizan cuando est presente, aunque pueden vivir sin l
59

Caractersticas de las
Eubacterias
Tipos de Reproduccin
Fisin

Binaria

Reproduccin logartmica
Una clula madre da origen a dos
clulas hijas

Otros

Tipos

Fragmentacin
Gemacin
Esporas Reproductivas

Fisin Binaria

Reproduccin Bacteriana
Generalmente las bacterias se multiplican por
Reproduccin biparticin o divisin binaria, tras la replicacin del
asexual
ADN, que est dirigida por la ADN polimerasa de los
mesosomas, la pared bacteriana crece hasta formar
un tabique transversal que separa las dos nuevas
bacterias. (Simple divisin)

62

Mecanismos parasexuales
(Confieren variabilidad gentica a la bacteria y son
cambios heredables)

A. Transformacin:

Consiste en el
intercambio gentico
producido cuando una
bacteria es capaz de
captar fragmentos de
ADN de otra bacteria
que se encuentran
dispersos en el medio
donde vive. Slo
algunas bacterias
pueden ser
transformadas. Las que
pueden serlo se dice
que son competentes.

Ej Cepas neumococo

63

.
.

B. Conjugacin:

Es un mecanismo mediante el cual una bacteria donadora

(bacteria F+ por tener un plsmido llamado plsmido F)
transmite a travs de las fimbrias o pili el plsmido F o
tambin un fragmento de su ADN a otra bacteria receptora,
a la que llamaremos F-, por no tener el plsmido F). La
bacteria F- se convertir as en F+ al tener el plsmido F e
incluso podr adquirir genes de la bacteria F+ que hayan
pasado junto con el plsmido F.

Conjugacin I

66

Conjugacin II

68

3. Transduccin:
En este caso la transferencia de material gentico de una
bacteria a otra, se realiza a travs de un virus
bacterifago que por azar lleva un trozo de ADN bacteriano
y se comporta como un vector intermediario entre las dos
bacterias. El virus, al infectar a otra bacteria, le puede
transmitir parte del genoma de la bacteria anteriormente
infectada.

69

Mutaciones
Una de las fuentes
usuales de biodiversidad
son las denominadas
mutaciones. Estas
consisten en cambios en
al secuencia de
nuclotidos del ADN. En
las bacterias tambin
puede ocurrir.

Si la mutacin se produce en un sector no

codificante o regulador del genoma, esta
no tendr trascendencia. Si afecta en
cambio un codn de una secuencia
codificante, puede significar un cambio
estructural o funcional de la misma y
afectar en forma negativa o positiva, la
funcionalidad y competencia de la misma.

Las mutaciones pueden ser causadas

por agentes fsicos, qumicos y
biolgicos.

73

Crecimiento Bacteriano
Rezago o letargo: las bacterias se estn adaptando a las condiciones

ambientales para iniciar su crecimiento, lo que requiere de la sntesis de

nuevas enzimas y protenas especficas.

Exponencial: las bacterias se dividen ilimitadamente, porque las condiciones

ambientales son ptimas y no existe ningn tipo de limitacin para su
desarrollo.

Estacionaria: el crecimiento experimenta una reduccin por el agotamiento

de los nutrientes y por la acumulacin de desechos metablicos

producidos por las propias bacterias, que les resultan letales. Finalmente
el aumento del nmero de individuos se detiene por completo,
alcanzando la fase estacionaria mxima, y luego comienza a disminuir.

Declinacin o muerte: la mortalidad de la poblacin aumenta

sostenidamente, lo que determina su extincin.

77

Taxonoma Bacteriana
Morfologa

Gram Positivo

Gram Negativo

Cocos

Streptococcus
Staphylococcus
Enterococcus

Neisseria, Moraxella,
Branhamellas

Bacilos

Corynebacterium
Listeria
Mycobacterium
Bacillus
Clostridium

Entricos, Campylobacter,
Helicobacter, Pseudomonas
Bacteroides, Fusobacterium
Haemophilus, Bordetella,
Legionella
Yersinia
Franciscella, Brucella,
Pasteurella
Gardnerella

Espirales
Filamentosos
Pleomrficos
Sin Pared Celular

Treponema, Borrelia y
Leptospira

Nocardia y
Actynomices
Chlamydia, Ehrlichias,
Coxiella y Rickettsia
Mycoplasma

Tincin de Gram
Teir

con Cristal
Violeta (azul) y
una mezcla de
Yodo ms
Yoduro de
Potasio
Decolorar con
Alcohol Acetona
Contra tincionar
con Safranina
(rojo)

Tincin de Ziehl Neelsen

Teir

con
Fuccina
Fenicada (rojo)
Decolorar con
Alcohol cido
Contrateir
con Azul de
Metileno (azul)

Tincin de Ziehl Neelsen

Formas Bacterianas

Organismos Bacterianos
Cocos Gram positivo

Bacilos Gram Negativo

Relacin Bacterias y Antibiticos

Antibiosis
es

La relacin general entre

un

Antibitico

Organismo Infeccioso

Homeostasis
El balance del cuerpo entre la salud y la enfermedad se llama
homeostasis. Que depende de la relacin del cuerpo y las
bacterias con que vive. Comnmente las bacterias invasoras son
destruidas por las clulas de sangre y por diversas acciones del
sistema inmune. Cuando hay demasiadas bacterias como para ser
manejadas por el sistema, o la persona infectada tiene una
resistencia baja a la infeccin, resulta la enfermedad y se
84
necesitan los antibiticos para ayudar a restaurar la homeostasis

Antibiticos
son

Sustancias obtenidas
de

Sntesis
Qumicas

Bacterias u
Hongos
Empleadas en

El Tratamiento de Infecciones
su

Va de Administracin puede ser

Oral

Tpica

Inyectable

85

Antibiticos
Actan a travs de dos mecanismos principales

Accin Bactericida

Accin Bacteristatica

Matan
microorganismos
existentes

Impide su
reproduccin

86

Tcnica del antibiograma

87