ACIDO NUCLEICO

Blgo. Carlos Cortegana Vargas

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ACIDO NUCLEICO
Los

cidos
nucleicos
son
macromolculas, polmeros formados
por la repeticin de monmeros
llamados nucletidos, unidos mediante
enlaces fosfodister.
Se forman as largas cadenas o
polinucletidos. Pueden alcanzar tamaos
gigantes (millones de nucletidos), siendo
las molculas ms grandes que se conocen.

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Cada

nucletido est
formado, mediante un
enlace ster, por un c.
fosfrico
y
un
nuclesido
(zona
sombreada de la figura),
este ltimo se constituye
por la unin de una
pentosa (la D-ribosa o la
2-desoxi-D-ribosa), y una
base
nitrogenada
(purina o pirimidina).
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El

descubrimiento de los
cidos nucleicos se debe a
Miescher que en la dcada de
1860 aisl de los ncleos de
las clulas una sustancia
cida a la que llam nuclena,
nombre que posteriormente
se cambi a cido nucleico
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FUNCION DE LOS ACIDOS

NUCLEICOS
Entre las principales funciones de estos
cidos tenemos:
Duplicacin del ADN
Expresin del mensaje gentico:
Transcripcin del ADN para formar
ARNm y otros
Traduccin, en los ribosomas, del
mensaje contenido en el ARNm a
protenas.
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COMPOSICIN DE LOS
ACIDOS NUCLEICOS
Pentosa: desoxirribosa (ribosa).
Bases Nitrogenadas:
Purinas: Adenina y Guanina.
Pirimidinas: Citosina y Timina (Uracilo).
cido Fosfrico: Contiene fsforo y 3
oxidrilos y es el encargado de unir la
cadena de cidos nucleicos
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Los cidos nucledos estn formados por:

Una azcar o pentosa:
Ribosa
Desoxirribosa

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Las bases nitrogenadas pueden ser :

Purinas: ADENINA y GUANINA

Pirimidnicas: CITOCINA, TIMINA y URACILO.

La timina solo puede formar ADN y el uracilo
solo est presente en el ARN.

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Acido fosfrico.

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FORMACION DE LOS ACIDOS

NUCLEICOS
LOS
NUCLEOSIDOS:
Los nuclesidos son las molculas
resultantes de la unin de una base
nitrogenada y una pentosa. La unin se
realiza mediante un enlace N-glucosdico
que se establece entre el C1 de la
pentosa y un nitrgeno de la base (el N1
si es pirimidnica y el N9 si es prica) con
la prdida de una molcula de agua.

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FORMACION DE UN
NUCLEOSIDO

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LOS NUCLEOTIDOS:

Los nucletidos son los steres fosfricos de los

nuclesidos. Se forman por unin de un
nuclesido con una molcula de cido fosfrico
en forma de in fosfato (PO4)3-, que le confiere
un carcter fuertemente cido al compuesto.
El enlace ster se produce entre el grupo alcohol
del carbono 5 de la pentosa y el cido fosfrico

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FORMACION DE UN
NUCLEOTIDO

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TIPOS DE CIDOS
NUCLICOS

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EL ADN
(ACIDO DEXOSIRIBONUCLEICO)
CONCEPTO:

Es un acido nucleico de doble cadena

que
tiene
forma
espiralada
y
bireccional, se encuentra en el medio
celular (ncleo), en la mitocondria
(clula animal) y en el cloroplasto
(clula vegetal).
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ESTRUCTURA:

Est formado por la unin de

muchos desoxirribonucletidos.
La mayora de las molculas de
ADN
poseen
dos
cadenas
antiparalelas (una 5-3 y la otra
3-5) unidas entre s mediante
las bases nitrogenadas, por
medio de puentes de hidrgeno.

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La adenina enlaza con la timina,

mediante
dos
puentes
de
hidrgeno, mientras que la citosina
enlaza con la guanina, mediante
tres puentes de hidrgeno.
El

ADN es el portador de la
informacin gentica, se puede
decir por tanto, que los genes estn
compuestos por ADN.
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ESTRUCTURA PRIMARIA
DEL ADN
Se trata de la secuencia de

desoxirribonucletidos de una
de las cadenas. La informacin
gentica est contenida en el
orden exacto de los nucletidos.

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ESTRUCTURA SECUNDARIA
DEL ADN

Es una estructura en doble hlice.

Permite
explicar
el
almacenamiento de la informacin
gentica y el mecanismo de
duplicacin del ADN. Fue postulada
por Watson y Crick, basandose en:
La difraccin de rayos X que
haban realizado Franklin y Wilkin
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Ejemplo
5
3

(ADN):
A AT T C G TAT C G AT TAG C T G C G T G C AG TAC G T C
T T AAG C AT AG C T AAT C G AC G C AC G T C AT G C AG

3
5

5
3

ARN:
A AT T C G TAT C G AT TAG C T G C G T G C AG TAC G T C
U U A A G C A U A G C U A A UC G A C G C A C G U C A U G C A G

3
5

3
5

T T A A G C A T A G C T A A T C G A C G C A C G T C A T G C A G 5
A A U U C G U A U C G A U U A G C U G C G U G C A G U A C G U C 3

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Es una cadena doble, dextrgira o levgira,

segn el tipo de ADN. Ambas cadenas son

complementarias, pues la adenina de una
se une a la timina de la otra, y la guanina
de una a la citosina de la otra. Ambas
cadenas son antiparalelas, pues el extremo
3 de una se enfrenta al extremo 5 de la
otra.
Existen tres modelos de ADN. El ADN de

tipo B es el ms abundante y es el
descubierto por Watson y Crick.
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ESTRUCTURA TERCIARIA
DEL ADN.
Se refiere a como se almacena el ADN en
un volumen reducido. Vara segn se trate
de organismos procariontes o eucarionte

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En procariontes :

se pliega como una super-hlice

en forma, generalmente, circular y
asociada a una pequea cantidad
de protenas. Lo mismo ocurre en
la mitocondrias y en los plastos.

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33

 En eucariontes:

El empaquetamiento ha de ser ms
complejo y compacto y para esto
necesita la presencia de protenas,
como son las histonas y otras de
naturaleza
no
histona
(en
los
espermatozoides las protenas son las
protaminas). A esta unin de ADN y
protenas se conoce como cromatina,
en la cual se distinguen diferentes
niveles de organizacin:
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Doble hlice y
fibra de
cromatina

Enrollamiento
de la cromatina

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Cromosom
a

Ncleo de
clula
eucariota

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DESNATURALIZACIN DEL
ADN.la temperatura alcanza el punto de fusin
Cuando

del ADN, la agitacin trmica es capaz de separar

las dos hebras y producir una desnaturalizacin.
Este es un proceso reversible, ya que al bajar la
temperatura
se
puede
producir
una
renaturalizacin.
En este proceso se rompen los puentes de
hidrgeno que unen las cadenas y se produce la
separacin de las mismas, pero no se rompen los
enlaces fosfodiester covalentes que forman la
secuencia de la cadena.
La desnaturalizacin del ADN puede ocurrir,
tambin, por variaciones en el Ph
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37

Funcin del ADN

La informacin gentica almacenada
en la secuencia de nucletidos de
ADN sirve para dos propsitos:
Es la fuente de informacin para la

sntesis de todas las molculas de

protenas de la clula y el organismo.
Provee la informacin heredada por

las clulas hijas de la progenie.

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Caractersticas principales
del ADN:
Dos cadenas se unen entre s formando una

doble hlice.

Ambas

cadenas
nitrogenadas.

se

unen

por

sus

bases

Entre las bases nitrogenadas enfrentadas se

forman uniones fcilmente rompibles llamadas

puentes de hidrgeno

Acorde a las evidencias, slo una pequea

parte del ADN constituye genes (menos del 10

%).
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EL ARN
(acido ribonucleico)
CONCEPTO:

Acido nucleico de una sola cadena lineal, se

encuentra en el citoplasma y en el nucleolo.

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ESTRUCTURA
Est formado por la unin de muchos

ribonucletidos, los cuales se unen entre

ellos mediante enlaces fosfodiester en
sentido 5-3 (igual que en el ADN).

Estn formados por una sola cadena, a

excepcin del ARN bicatenario de los

retrovirus.

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ESTRUCTURA PRIMARIA
Al igual que el ADN, se refiere a la secuencia de las
DEL
ARN que constituyen sus nucletidos
bases
nitrogenadas

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ESTRUCTURA SECUNDARIA
DEL
AlgunaARN
vez, en una misma cadena, existen

regiones con secuencias complementarias

capaces de aparearse.

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43

ESTRUCTURA TERCIARIA DE ARN

Es un plegamiento, complicado, sobre al estructura secundaria.

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CLASIFICACIN DE LOS
ARN.
Para clasificarlos se adopta la masa

molecular media de sus cadenas, cuyo

valor se deduce de la velocidad de
sedimentacin. La masa molecular y
por tanto sus dimensiones se miden
en svedberg (S). Segn esto tenemos:

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ARN MENSAJERO (ARNm)

Cadenas de largo tamao con estructura

primaria.
Se le llama mensajero porque transporta
la informacin necesaria para la sntesis
proteica. Esta se transporta mediante
tripletes de bases nitrogenadas llamados
codones
Cada ARNm tiene informacin para
sintetizar una protena determinada.
Su vida media es corta.
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ARN TRANSFERENCIA (ARNt)

Sus principales caractersticas son
Son molculas de pequeo tamao
Poseen
en
algunas
zonas
estructura

secundaria, lo que va hacer que en las zonas

donde no hay bases complementarias
adquieran un aspecto de bucles, como una
hoja de trebol. Este contiene los anticodon
que permite interpretar el mensaje del ARNm
Los plegamientos se llegan a hacer tan
complejos que adquieren una estructura
terciaria
Su
misin
es
unir
aminocidos
y
transportarlos hasta el ARNr para sintetizar
proteinas
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Grafico de ARN
transferente

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ARN RIBOSMICO (ARNr)

Sus principales caractersticas son:
- Cada ARNr presenta cadena de
diferente tamao, con estructura
secundaria y terciaria.
- Forma parte de las subunidades
ribosmicas cuando se une con
muchas protenas.
- Estn vinculados con la sntesis de
protenas.
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49

Caractersticas del
Polmero
de ribonucletido que forma
ARN:
sola cadena.

una

Esa cadena forma una hlice simple.

Presenta iguales bases nitrogenadas que el

ADN, pero reemplaza a la timina (T) por el

uracilo (U).
La pentosa que posee es la ribosa, de ah el
nombre del nucletido.
Es escaso en el ncleo, formando un
elemento llamado nuclolo; muy abundante
en el citoplasma, especialmente formando
organoides llamados ribosomas, presentes
en clulas vegetales y animales.
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50

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51

SEPARACION DE LOS
ACIDOS NUCLEICOS
CROMATOGRAFIA: Separacin del ADN a

travs de solventes orgnicos y la accin de

cromgenos para observar su ubicacin
ELECTROFORESIS: Separacin del ADN

por la accin de la corriente elctrica

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CROMATOGRAFA EN PAPEL
PROPIEDAD: Solubilidad
SOPORTE celulosa de papel de filtro
F. ESTACIONARIA (LQUIDA) H2O absorbida en la
celulosa.
F. MVIL (LQUIDA) Disolvente orgnico

H2 O
H2O
H2O HHH2O
HH2O
H2O
Molec. Hidroflica LENTA
Retenida por f.estacionaria

H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
Molec. Hidrofbica RPIDA
Disuelta en f. mvil

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (TLC)

PROPIEDAD: Hidrofobicidad
SOPORTE plancha de metal o vidrio
F. ESTACIONARIA (SLIDA) slido pulverizado sobre
plancha de metal o vidrio. El ms usado es el gel de slica.

F. MVIL (LQUIDA) Disolvente orgnico

-Si-OH H-Si-OH H-Si-OH H-Si-OH

-Si-OH
Molec. Hidroflica LENTA
Retenida por f.estacionaria

-Si-OH
-Si-OH
-Si-OH
-Si-OH
-Si-OH
Molec. Hidrofbica RPIDA
Disuelta en f. mvil

CROMATOGRAFA EN COLUMNA
EMPAQUETADO
COLUMNA

APLICACIN
MUESTRA

ELUCIN Y RECOGIDA DE FRACCIONES

RESERVORIO
f. mvil

LECHO
CROMATOGRFICO
f. estacionaria
COLUMNA

MUESTRA

FLUJO
gravedad

DIFUSIN

llave

SEPARACIN

CROMATOGRAFA EN COLUMNA
PERFIL DE ELUCIN

1 2 3 4 5 6 7 8 9

ANLISIS DEL
CONTENIDO DE LAS
FRACCIONES

Espectrofotomtrico
Abs 280nm Protenas
Otras Abs - Colorantes

respuesta del detector

FRACCIONES

Molc. distribuida en
f.mvil
Molc. distribuida en
f.estacionaria

8 9
fraccin

CROMATOGRAFA DE GEL FILTRACIN

PROPIEDAD: Tamao (y forma)
SOPORTE Resina de micropartculas esfricas formadas por
polmeros hidroflicos (dextrano, agarosa, poliacrilamida o
mezcla de ellos).

FASE MVIL

Tamaos de poro intervalo o rango de fraccionamiento.

P.e.

Sephadex G25:
Sephadex G200:

1000 5000 Da
5000 250000 Da

F. ESTACIONARIA (LQUIDA) solvente acuoso (el mismo

que el de la fase mvil) que se encuentra dentro de
micropartculas.
F. MVIL (LQUIDA) solvente acuoso que atraviesa la
columna por los espacios intersticiales (entre las
micropartculas).

F. ESTACIONARIA
MICROPARTCULAS

FUNDAMENTO DE LA ELECTROFORESIS

Estudia la migracin

de
las
particulas
coloidales en el seno
de
un
campo
elctrico

SEPARACIN DE LOS ELEMENTOS DE UNA

MEZCLA
Separa los diferentes elementos que
componen una mezcla compleja en
funcin de la carga elctrica de los mismos

MIGRACIN
ELECTROFORTICA
Es la movilidad de la molcula por unidad de
campo elctrico

Aplicacin

VELOCIDAD DE LAS
PARTICULAS Depende de ...
La carga de las

mismas
La intensidad del
campo elctrico y
Del coeficiente de
friccin de las
molculas con el
medio

APLICACIN DE LA ELECTROFORESIS

Fraccionamiento de

las hemoglobinas
Diferenciacin de la
hemoglobina fetal
Diagnstico de
talasemias, anemias
falciformes, etc

Protenas sricas
Protenas urinarias
Lipoprotenas
cidos nucleicos
Enzimas
Inmunoelectroforesis
Etc.

EQUIPO DE
ELECTROFORESIS
Fuente de
alimentacin
Soporte para las
tiras de acetato de
celulosa
Aplicador
Cubetas
Puente
Reactivos

FUENTE DE
ALIMENTACIN
150-400 voltios
1,25 miliAmperios
Temporalizador
Inversor de corriente
Varias tomas
Cable rojo y negro

CUBETA Y PUENTE
Las tiras sobre el

puente y en la
cubeta
Con tampn
Con la tapadera
para crear una
atmsfera saturada
Con los cables para
conectar a la fuente

EL RESULTADO FINAL