Produccin eficiente de cido LLctico por Saccharomyces cerevisiae

con un Gen L-Lactato Deshidrogenasa

integrado en el genoma.
Alejandro Sandoval

Policido Lctico

Polmero
Tereftalato de polietileno (PET)
Envases
Biodegradable
100,000 toneladas anuales.
Menor precio que plsticos
basados en petrleo.

Lactobacillus vs
Saccharomyces

pH <2.8 inhibe crecimiento

celular y produccin cido lctico
Difcil de cultivar en alta
densidad.
Levaduras son ms tolerantes a
bajos pHs que las bacterias cido
lcticas.

Piruvato
Descarboxil
asa
(PDC)

Lactato
Deshidroge
nasa (LDH)

Levadura que produce cido lctico

eficientemente.
La regin que codifica para piruvato
descarboxilasa (PDC1) en el cromosoma XII es
sustituida por la que codifica para L-Lactato
deshidrogenasa (LDH) por recombinacin
homloga. La expresin del LDH integrado en el
genoma es regulada por el promotor nativo de
PDC1, mientras que la PDC es interrumpida
Se utiliz el promotor nativo PDC1 en el
cromosoma XII. PDC1 codifica para piruvato
descarboxilasa, que convierte cido pirvico en
acetaldehdo y luega un papel importante en la
produccin de etanol.

YEBO-1B

YIBO-7A

Cepas utilizadas
LDH B. longum
YEp
17.2%

LDH B. longum
YIp (PDC1)
29.5%

LDH Bovino
YEp
19.2%

YEBL
-8A

YEB
O-1B

YIBL2D

YIBO
-7A
LDH Bovino
YIp
62%

Resultados

Produccin de cido lctico y etanol en

cultivo batch en medio YDP a base de
glucosa 10%

El rendimiento de lactato por YEBL-8A, que expresa el LDH de B. longum, fue casi el mismo que
el dado por YEBO-1B, con ninguna diferencia en aumento vista entre los dos tipos de LDH.
El rendimiento de YIBO-7 fue el triple que el de las cepas provenientes del plsmido YEp, y el
doble que 2D que el gen LDH fue de origen Bifidubacterium longum.

YEBL
-8A

YEB
O-1B

Etanol
Lactato

YIBL2D

YIBO
-7A

LDH B. longum
YIp (PDC1)
29.5%

LDH Bovino
YIp
62%

Et

o
an

Lactato

Lactato
Etanol

Resultados

Para la expresin de la enzima

LDH en levaduras, se utiliza
generalmente un plsmido YEp
(Episomal).
En este estudio no se observ
aumento en produccin de cido
lctico con clulas obtenidas a
partir de este plsmido.
El rendimiento de lactato por
YEBL-8A, que expresa el LDH de
B. longum, fue casi el mismo
que el dado por YEBO-1B, con
ninguna diferencia en aumento
vista entre los dos tipos de LDH.

Resultados
. La cepa YIBO-7A expresando LDH
bovino bajo el control del promotor
PDC1 produjo tanto lactato (55.6 g/L) y
etanol (16.9 g/L), con hasta 62.2% de
la glucosa siendo transformada en
cido lctico.
This recombinant, including two copies
of the LDH gene on the genome,
showed higher production than the
transgenic strain, which had
integrated one copy of the LDH gene on
the genome
Su rendimiento fue el triple que el de
sus cepas competidoras a partir de
plsmido YEp.

Conclusiones

Desalinizacin eleva costos.

Ser posible disminucin de
costos si se obtiene cido
lctico directamente de
condiciones de no
neutralizacin.
Para mejorar la produccin
bajo estas condiciones, es
necesario ms progreso con
respecto a la tolerancia al
pH de S. cerevisiae.
Saccharomyces cerevisiae
puede sustituir a bacterias
lcticas en la produccin de
cido lctico.