Universidad de Panam

Facultad de Medicina
Escuela de Medicina
Seminario de Hematologa
Presentado por:
Hctor Lezcano
Isamar Chvez
Evelyn Monterrey
Amaris Ramos
David Weng
Juan Alain

ANALIZADORES HEMATOLGICOS

INTRODUCCIN
El desarrollo de los Autoanalizadores hematolgicos
comenz en la dcada de los 50 con los hermanos
Wallace y Joseph Coulter, quienes inventaron en 1956 el
primer contador automtico de clulas sanguneas.
En 1980 se introduce el diferencial 3 Diff, adems del
estudio de la serie roja con los cmputos de eritrocitos,
la determinacin de la hemoglobina y el clculo de los
ndices eritrocitarios.
Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de
resultados: un informe numrico y un informe grafico
(histogramas), y ambos poseen un software que
contiene toda la informacin utilizando abreviaturas en
ingles de utilidad en el informe numrico.

COMPONENTES DEL ANALIZADOR

DILUIDOR
Disminuye la concentracin de la
sangre hasta el nivel adecuado para el
funcionamiento del contador.
Como lquido diluyente utiliza una
solucin isotnica con capacidad
conductora.

TRANSDUCTOR
Transforma las
seales, procedentes
del dispositivo de
medida,
en
impulsos elctricos.
Suele
ser
un
fotomultiplicador

COMPRESOR- ASPIRADOR
Aporta la presin y el vaco
necesarios para transportar la
sangre,
convenientemente
diluida, al dispositivo de
medida.

DISPOSITIVO
DE
MEDIDA
Es la cmara donde se
cuentan realmente las
clulas sanguneas (cmara
de medida o de lectura).

DISCRIMINADOR
Diferencia los impulsos
elctricos generados por
cada uno de los tipos de
clulas sanguneas.

REGISTRADOR
Imprime en papel los
resultados conseguidos.

PROCESADOR
Recoge los
datos obtenidos,
los procesa y los
proyecta en una
pantalla.

PRINCIPIO DE LOS ANALIZADORES

HEMATOLGICOS
IMPEDANCIA

RADIOFRECUENCIA

CITOMETRIA DE FLUJO

DISPERSIN PTICA

FLUORESCENCIA

PRINCIPIO DE
IMPEDANCIA
.El
El principio de impedancia en el conteo de clulas

sanguneas se basa en el aumento de la resistencia

producida cuando una clula sangunea con baja
conductividad pasa a travs de un campo elctrico.
El nmero de intermitencias indica la cifra de
clulas sanguneas y la amplitud de cada
intermitencia es proporcional al volumen de la
clula
Ejemplos de instrumentos con este principio
son el Contador Coulter, los instrumentos TOA
Sysmex y los instrumentos Abbot Cell-Dyn.
Mientras que las clulas sanguneas conducen
mal la electricidad, el lquido diluyente es un buen
conductor de la electricidad (posee una gran

El dispositivo de medida consiste en un pequeo orificio, a travs del cual se hace

pasar la sangre diluida. Tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su salida.
Tambin se hace pasar una corriente elctrica constante a travs de ese mismo
orificio.

Si el orificio es atravesado solamente por lquido diluyente, la

resistencia elctrica medida por los electrodos es mnima y constante,
pero cuando el orificio es atravesado por una clula sangunea, se
produce un aumento de la resistencia elctrica y un cambio de potencial
entre los electrodos.
El nmero de seales elctricas generadas indica el nmero
de clulas presentes en la sangre y la amplitud de estas
seales es directamente proporcional al volumen celular.

De
De este
este modo
modo es
es posible
posible la
la identificacin
identificacin de
de las
las clulas
clulas yy por
por tanto
tanto el
el
recuento
recuento

IMPEDANCIA

DISPERSIN PTICA

Ejemplos de
instrumentos que
atizan este
principio son los
Technicon H
System.

basa en las mediciones

de la dispersin de la
luz obtenidas de una
sola clula sangunea
que pasa ata travs de
un haz de luz (ptico o
lser

el lateral es una
medicin de la
granularidad de la
clula.

Estas clulas crean

una dispersin
hacia delante y
lateral las cuales se
detectan mediante
fotodetectores .

El grado de
dispersin hacia
delante es una
mediacin del
tamao de la celular

FLUORESCENCIA
Un fluorocromo es una molcula qumica que absorbe la luz a
una determinada longitud de onda (ENERGIA ) energa de
excitacin y emite a una longitud superior (MENOR ENERGIA)
Interacciona con la luz de excitacin procedente de el lser.

CMO ES OBTIENE?
Fluorocromo

Unin de
sitios
especficos

libera energa
absorbida por :
Vibracin y
disipacin del
calor.

absorbe
energa
del lser

Emisin de
fotones a una
mayor
longitud de
onda llamada
fluorescencia

VARIEDAD DE MODELOS

Contador Coulter serie

S-Plus: Introducido al
mercado en 1983, es un
analizador
automtico
multiparmetros, opera
por el principio de
impedancia.

Contador Coulter STKS: Es

una combinacin de tecnologas
para
enumerar
eritrocitos,
.plaquetas y leucocitos; y para
determinar un conteo diferencial
de cinco partes. Emplea el
principio de impedancia.

Sysmex
NE-800:
Realiza conteos de
clulas sanguneas ,
determinaciones
de
hemoglobina
y
diferenciales de cinco
partes

Sysmex NE-800: Realiza conteos de

clulas sanguneas , determinaciones de
hemoglobina y diferenciales de cinco partes

CITOMETRIA DE FLUJO
Tcnica de anlisis celular
multiparamtrico cuyo
fundamento se basa en hacer
pasar una suspensin de
partculas (generalmente
clulas) alineadas y de una en
una por delante de un haz de
lser focalizado.
Es una tecnologa (proceso) que
permite la medida simultnea
de mltiples caractersticas
fsicas de una sola clula.
Estas medidas son realizadas
mientras las clulas (partculas)
pasan en fila, a una velocidad de
500 a 4000 clulas por segundo,
a travs del aparato de medida
en una corriente de fluido.

Sistema Hidrulico
Controles neumtico y
fluidos para establecer un
flujo laminar que permita a
la suspensin celular
atravesar la cmara de
flujo.

Sistema ptico
Lser (Argn con luz
monocromtica de 488nm ,
filtros , lentes y detectores.

Sistema
Electroinformativo

Convierte la luz dispersa en

seales elctricas y las
procesa para su anlisis.

Parmetros

Caractersticas
Caractersticas
morfolgicas
morfolgicas de
de
las
las clulas
clulas

Tamao
Tamao Relativo
Relativo
(forward
(forward
scatter-FSC)
scatter-FSC)

Granularidad
Granularidad
relativa
relativa o
o
complejidad
complejidad
interna
interna
(( side
side scatter
scatter
SSC)
SSC)

Propiedad
Propiedad de
de
Dispersin
Dispersin

Caractersticas
Caractersticas
antignicas
antignicas de
de
las
las clulas
clulas
(Inmunifenotpic
(Inmunifenotpic
as)
as)
Fluorescencia
Fluorescencia
relativa
relativa
(FL1,
(FL1, FL2,
FL2, FL3)
FL3)
Determinacin
Determinacin
cuantitativa
cuantitativa de
de
caractersticas
caractersticas
antignicas,
antignicas,
bioqumicas
bioqumicas y
y
biofsicas
de
clulas
biofsicas de clulas
individuales
individuales

SEALES DE DISPERSIN

La luz dispersada frontalmente en ngulo cnico pequeo (010 grados ) coincidente con luz incidente y es proporcional a
tamao de la partcula que produce la dispersin.

SEALES DE DISPERSIN

La luz dispersada lateralmente es proporcional al la

complejidad de la estructura celular.

RADIOFRECUENCIA

Eritrograma
Se trata del anlisis de la serie roja e incluye los siguientes parmetros:
Recuento de glbulos rojos: se trata de la cantidad de eritrocitos en un
mm3. A partir del nmero de clulas contadas por unidad de volumen, se
genera el histograma de distribucin de eritrocitos.
Concentracin de Hemoglobina:
Valores Normales:
Hombres: 16 2 gr%
Mujeres: 14 2 gr%

Hematocrito: es el porcentaje de sangre que es ocupado por eritrocitos.

Valores Normales: Hombres: 47 5 gr%
Mujeres:

42 5 gr%

ndices Hematolgicos
Concentracin de hemoglobina media corpuscular (C.H.MC): Se refiere a
la concentracin promedio de hemoglobina por mililitro de eritrocitos. Puede
ser calculada utilizando los valores de hemoglobina y de hematcrito
o medida directamente mediante luz lser y su grado dispersin.
Valor normal: 32% a 36%

Volumen corpuscular medio (V.C.M): Expresa en micras cbicas (u3) el

volumen que ocupa un hemate de tamao medio. El valor de este
parmetro puede ser obtenido a partir del histograma de distribucin
de volumen de los eritrocitos o medido directamente mediante la
tcnica de dispersin de la luz lser.
Valor normal: 87 5 u3 um3

Hemoglobina corpuscular media (H.C.M.): Es el valor promedio de la

hemoglobina contenida en cada eritrocito. Puede ser calculada utilizando
los valores de hemoglobina y de hematocrito o medida directamente
mediante luz lser y su grado dispersin.

Valor normal: 27 32 pg

Contenido de hemoglobina presente en los reticulocitos (CHr):

Constituye un indicador precoz de eritropoyesis deficiente en hierro que es
mucho ms sensible a la suplementacin con hierro que otros parmetros,
tales como hematcrito, hemoglobina, VCM, RDW, HCM y ferritina. Es de
reciente incorporacin gracias a los analizadores hematolgicos.

La Amplitud de Distribucin Eritrocitaria (ADE o RDW): se utiliza como

indicativo de anisocitosis. Este ndice es facilitado por los contadores
automatizados.

Valor normal: 11,5 14,5%

LEUCOGRAMA

Es la fraccin del hemograma que se refiere al conteo total de los leucocitos

(glbulos blancos) y de las diferentes clases de leucocitos. En s est
compuesto por dos anlisis:

Conteo total de leucocitos: Los leucocitos son las clulas encargadas

de proteger al organismo contra las infecciones. La presencia de una
infeccin normalmente altera el nmero total de leucocitos. Valor normal:
4,500 a 10,000 glbulos blancos por microlitro (mcL)

Conteo de leucocitos diferencial: apodado simplemente "diferencial",

determina la proporcin o porcentaje de las principales clases de
leucocitos dentro del conteo total de leucocitos. (neutrfilos, eosinfilos,
basfilos, linfocitos y monocitos). Cada clase tiene un papel diferente
en la defensa del organismo. La cantidad de cada clase de leucocito da
informacin muy valiosa acerca del estado del sistema inmune.

LEUCOCITOS EN FROTIS

SERIE BLANCA

PLAQUETOGRAMA

Plaquetas (PLT): se refiere al recuento global de plaquetas realizado de

forma automatizada. Valor normal: 150 a 400 109/L.4

Volumen medio plaquetario (VPM): es un indicador del tamao de las

plaquetas y muestra una relacin inversa no lineal con el nmero de estas.

Plaquetocrito (PCT): se calcula relacionando el recuento de clulas con el

volumen medio plaquetario. Ofrece un estimado sobre la fraccin del
volumen sanguneo total ocupada por las plaquetas. Su valor aumenta en
situaciones que cursen con trombocitosis. Valor normal: 0,1 a 0,4 %.

Componente medio plaquetario o concentracin media de plaquetas

(CPM): es un indicador del grado de activacin plaquetaria y una variable
clnica til en el estudio y seguimiento de pacientes con riesgo de trombosis
como en el caso de dializados, diabticos, fumadores, angina inestable,
mujeres embarazadas.

Plaquetas reticuladas (PR): las PR son las ms jvenes de la sangre

perifrica con un contenido de ARN superior a las dems. Son detectadas
mediante la aplicacin del mtodo inmunolgico. El porcentaje normal de
PR es de 0,98 0,41 %.

INFORMACIN GRFICA

HISTOGRAMA DE ERITROCITOS
DISTRIBUCIN NORMAL

REL
NIo

VCM x ADE

CUERPO

DEDO

RBC

50

100

130

Artefactos
glbulos rojos
aglutinados

200

RBC 6.09
HGB 17.5
HCT 50.6
MCV 83.1
MCH 28.7
MCHC 34.6
RDW 13.0

300

fL

HISTOGRAMA DE LEUCOCITOS
Granulocitos

Recuento total de Leucocitos

EJEMPLO DE ANALISIS
DISTRIBUCIN NORMAL

REL
NIo.

Neutrfilos
WBC 8.3
LY # 2.5
MO # .8
GR # 5.1

MO o MID

Linfocitos

90

WBC 50

160

100

200

300

MO MID = Eosinfilo, Basfilo, Monocito

400

HISTOGRAMA DE PLAQUETAS
REL

DISTRIBUCIN NORMAL

NIo:

NOMOGRAMA NORMAL

PLT 319
PCT .239
MPV 7.5
PDW 16.3

PLT

10

20

FEMTOLITROS

RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Cuadrante 6
Eosinfilos

Cuadrante 3
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos

Cuadrante 2
Linfocitos
Cuadrante 5
Cel. Daadas

Cuadrante 1 Blastos

RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS DE CINCO

PARTES

RECUENTO DIFERENCIA DE LEUCOCITOS ANORMAL

1
9

1. Blastos

5. Eritrocitos
2

nucleados

2. Granulocitos
inmaduros

6. Linfocitos
7

Variantes

3. Neutrfilos
envejecidos

y lesionados

7. Blastos

6
8. Linfocitos

4. Plaquetas

Variantes

gigantes
5

4
9. Blastos

NEUTROPENIA Y LINFOCITOSIS
WBC

Cuadrante 4
Neutrofilos

Cuadrante 3
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinfilos

V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5

Cuadrante 2
Linfocitos

Cel. Daadas

DF1

Cuadran
te1
Blastos

LINFOCITOS ATPICOS
WBC

Cuadrante 3
Monocitos

Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 6
Eosinfilos

V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5

Cuadrante 2
Linfocitos

Cel. Daadas

DF1

Cuadran
te1
Blastos

EOSINOFILIA
WBC
Cuadrante 3
Monocitos

Cuadrante 4
Neutrofilos

Cuadrante 6
Eosinfilos

V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5

Cuadrante 2
Linfocitos

Cel. Daadas

DF1

Cuadran
te1
Blastos

GRANULOCITOS INMADUROS
WBC

Cuadrante 3
Monocitos

Cuadrante 4
Neutrofilos
Cuadrante 6
Eosinfilos

V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 5

Cuadrante 2
Linfocitos

Cel. Daadas

DF1

Cuadran
te1
Blastos

DISPERSOGRAMA

Ejemplos de Histograma

HISTOGRAMA NORMAL

ANEMIA POR DEFICIENCIA DE

VITAMINA B12

La curva se
desplaza a la
derecha

ANEMIA POR DEFICIENCIA DE

HIERRO

La curva se
desplaza a la
izquierda

HISTOGRAMA TALASEMIA BETA

La curva se
desplaza a la
izquierda

HISTOGRAMA DE LA SERIE ROJA

Lnea Verde: Microcitosis sin anisocitosis.

Lnea Roja: Macrocitosis sin anisocitosis.
Lnea Amarilla: Anisocitosis, y/o
Poiquilocitosis.
Lnea Azul: Doble poblacin

HISTOGRAMA DE LA SERIE PLAQUETARIA

Distribucin de plaquetas e
interferencias

Posible agregacin plaquetaria.

Interferencia producida por microcitosis marcada.

ALARMAS EN LOS ANALIZADORES

HEMATOLGICOS:
Cualitativas

Cuantitativas

Identifican blastos, clulas

anormales, granulocitos
inmaduros, etc.

Identifican
anemia/policitemia,
leucopenia/leucocitosis,
trombocitopenia/trombocit
osis

tiles

Deseables

Identifican anisocitosis,
tamao de plaquetas,
aglutinacin de eritrocitos,
plaquetas y hemoglobinas
anormales

Identifican eosinofilia,
eritrocitos nucleados,
clulas drepanociticas,
esferocitosis, fragmentos
de eritrocitos y clulas de
frotis.

UTILIDAD CLNICA

UTILIDAD CLNICA

Contribuye con la
valoracin del resultado
de una citometra
hemtica.
Valoracin de la funcin
medular sea. VPM bajo:
hipoproduccin medular.
VPM alto: trastorno
mieloproliferativo
A partir de los resultados
obtenidos se puede
proceder a hacer
pruebas ms profundas

UTILIDAD CLNICA

Ventaja: Buena apreciacion la distribucin

volumtrica real entre todos los tipos
celulares presentes en la muestra incluyendo
en algunas patologas la visualizacin aun de
linfocitos.

Diferenciacin entre ferropenia y talasemia

menor. Un VCM bajo y RDW: diagnstico de
ferropenia. Un VCM bajo y RDW normal:
diagnstico de talasemia menor

 Gracias