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Ciclo
biolgico de la malaria
Diferentes
Mtodos
especies de Plasmodium
de diagnstico.
Cultivos.
sensibilidad
a medicamentos.
Diagnstico
en el mosquito.
Especies de Plasmodium
Especies de Plasmodium
Diagnostico: Toma de la
muestra
vdeo
Mtodos de Diagnostico:
Frotis y Gota gruesa
Usar lminas con borde esmerilado.
Realizar una buena puncin digital para
evitar doble puncin. Una vez ejecutada
la gota gruesa (1.5 cm2) es necesario
fijar el frotis con metanol pero al mismo
tiempo se debe cuidar de no fijar la
gota. La gota debe deshemoglobinisarce
con agua destilada.
Preparar la solucin trabajo de Giemsa
(1/10) al momento de efectuar la
coloracin y colorear las lminas.
Lectura en el frotis
El
porcentaje de parasitemia:
CONTROL DE CALIDAD
Se debe tener en cuenta 1:
Valorar la preparacin del material, toma de
muestra, coloracin y microscopa.
Prueba de eficiencia, donde se emplea un
cuejo de lminas con diagnstico conocido.
La calificacin ser segn escala:
Excelente: 95-100% correctos
Bien:
85-94% correctos
Regular: 70-84% correctos.
Mal: menos de 70% correctos.
Dipstick: Se detecta la Ptna. rica en histidina-2 (HRP2) (Shiff et al.2), que es secretada por los eritrocitos con
P. falciparum.
Especificidad = 100%, sensibilidad = 94%; valor
predictivo positivo 100%, VPN 97%.
Dio negativo para pacientes con P. vivax3.
ICT Malaria P.f. (ICT Diagnostics, Sydney, Australia),
tambin detecta solo P. falciparum.
OptiMAL detecta tanto P.vivax y P. falciparum
Estas pruebas estn siendo evaluadas por WHO.
Deteccin de Anticuerpos
Se
usa florescencia
indirecta de
anticuerpos (IFA).
Puede ser usado en:
Screening en
donadores, donde la
parasitemia es baja.
En pacientes con
sntomas o que
recibi TX con lmina
negativa
QBC
A: Gel de agarosa
S: Pb estndar (50pb
ladder)
1: P. vivax (120 pb)
2: P. malarie (144 pb)
3: P. falciparum(205 pb)
4: P. ovale (800 pb)
Cultivos
Para el cultivo in vitro se han propuesto dos tcnicas:
1.- Un cultivo de maduracin de corta duracin:
Donde se obtiene generaciones sucesivas de parsitos.
Esto facilitan los estudios bioqumicos, inmunolgicos y
quimioterpicos.
2.- Cultivos de multiplicacin (intenta reemplazar al
husped natural). Su objetivo consiste en mantener in
vitro una fase especfica del desarrollo (por ejemplo
formas exoeritrocticas o formas eritrocticas a sexuadas).
Lo ideal sera poder obtener varias generaciones
sucesivas pero han tenido poco xito.
Cultivos de formas
eritrocticas
Los
Cultivo P. falciparum
Informes
Cultivo: Aislamiento de
Ookinetos
Para el aislamiento de Ookinetos de eritrocitos
no
infectados se usa dos mtodos:
1. Cojines de Nycodenz
11
2. Aislamiento de Ookinetos:
Usando un magneto para
retener a los ookinetos12
La columna se lava con 2.5
mL Medio de Scheneider
antes de pasar la muestra y
luego se pasa la muestra con
una jeringa lentamente y los
ookinetos son seprados por
un campo magnetico y de
reciben en 1mL de medio
para ookinetos,
Sensibilidad a
medicamentos.
En