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INFLUENCIA DE LA INOCULACION CON Rhizobium spp EN EL CRECIMIENTO DE

PLANTAS

FIJACION DE NITROGENO MEDIANTE


Rhizobium spp.

EL NITRÓGENO ES EL FACTOR LIMITANTE


MÁS IMPORTANTE PARA EL DESARROLLO
DE LAS PLANTAS, QUE LO NECESITAN
PARA FORMAR PROTEÍNAS, ÁCIDOS
NUCLÉICOS, ETC.
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PLANTAS

EL NITRATO ES LA FORMA MÁS USUAL TOMADA


POR LA PLANTA Y ES CLAVE EN LA NUTRICIÓN
•PUEDE HALLARSE EN EL SUELO DERIVADO
DEL CONTENIDO MINERAL DEL MISMO, DE
AQUEL QUE SE PUEDA INCORPORAR DE LA
ATMÓSFERA
•DE LA BIOTRANSFORMACIÓN DE LAS
MOLECULAS ORGÁNICAS QUE LO CONTIENEN
FORMANDO PARTE DE LOS RESTOS VEGETALES
Y ANIMALES QUE ALLÍ LLEGAN O DE LOS
PROPIOS MICROORGANISMOS QUE LO
HABITAN
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LA DESNITRIFICACIÓN, O REDUCCIÓN DEL NITRATO


HASTA NITRÓGENO MOLECULAR O DINITRÓGENO, N2,
ES UNA ACTIVIDAD MICROBIANA IMPORTANTE.
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LA FIJACIÓN DE NITRÓGENO PUEDE SER


PURAMENTE ABIÓTICA O BIOLÓGICA

•LA PRIMERA SE FORMAN ÓXIDOS COMO


CONSECUENCIA DE LA COMBUSTIÓN DE
COMPUESTOS ORGÁNICOS, DESCARGAS
ELÉCTRICAS, ETC., QUE SON ARRASTRADOS AL
SUELO POR LA LLUVIA.

•LA SEGUNDA, LA FIJACIÓN BIOLÓGICA DE


NITRÓGENO (FBN) ES LLEVADO A CABO POR
ORGANISMOS PROCARIÓTICOS, EL N2 ES
REDUCIDO A AMONIO E INCORPORADO A LA
BIOSFERA.
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LA FBN ES LLEVADA A
CABO POR
MICROORGANISMOS
PROCARIÓTICOS EN
VIDA LIBRE O EN
SIMBIOSIS, ESTO
ÚLTIMO SI OCURRE EN
ASOCIACIÓN
MUTUALISTA CON LAS
PLANTAS
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•SE TRATA DE UN PROCESO ALTAMENTE CONSUMIDOR


DE ENERGÍA.

•EL TRIPLE ENLACE QUE UNE LOS DOS ÁTOMOS DE


NITRÓGENO ES DURO DE ROMPER.

EL TRABAJO ES LLEVADO A CABO POR LA ENZIMA


NITROGENASA CON EL CONSUMO DE 16 MOLÉCULAS
DE ATP POR N2 REDUCIDO, SEGÚN LA ECUACIÓN:

N2 + 16ATP + 8E- + 8H+ = 2NH3 + 8H2 + 16ADP + 16PI


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EFICIENCIA DE FIJACION

•ALGUNOS FIJADORES LIBRES, COMO Azotobacter,


REQUIEREN HASTA 100 UNIDADES DE EQUIVALENTES DE
GLUCOSA POR UNIDAD DE NITRÓGENO FIJADO.
POR ELLO SU SIGNIFICACIÓN AGRÍCOLA ES BAJA.

•ESTA SIGNIFICACIÓN SE INCREMENTA


CONSIDERABLEMENTE EN EL CASO DE LA FIJACIÓN
SIMBIÓTICA, COMO Rhizobium-LEGUMINOSA, DONDE LA
RELACIÓN DISMINUYE A UNAS 12 UNIDADES DE
GLUCOSA POR UNIDAD DE NITRÓGENO.

•Azotobacter PROPORCIONA AL SUELO UNOS CIENTOS DE


GRAMOS DE NITRÓGENO POR HECTÁREA/AÑO

•ESTE VALOR SUBE EN LA ASOCIACIÓN DE Rhizobium CON


ALFALFA, TRÉBOL, GUISANTE O SOJA, A UNOS CIENTOS
DE KILOS.
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LA FIJACIÓN LIBRE
SOLA REPRESENTA A
NIVEL GLOBAL ALGO
MENOS DE LA MITAD
DE LAS 200-250
MILLONES DE Tn DE N2
FIJADO POR AÑO

LA SIMBIÓTICA, AUNQUE SEA MÁS ALTA, ESTÁ


LIMITADA A UNAS POCAS ESPECIES VEGETALES,
ENTRE ELLAS, ALGUNAS COMO LAS LEGUMINOSAS, DE
GRAN IMPORTANCIA ECONÓMICA Y SOCIAL.
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Rhizobium ESTÁ EVOLUTIVAMENTE


ESPECIALIZADO EN PROPORCIONAR NITRÓGENO A
LA PLANTA CUANDO SE ENCUENTRA ASOCIADO A
ELLA (LAS FORMAS BACTERIANAS QUE FIJAN
NITRÓGENO EN LOS NÓDULOS, LOS LLAMADOS
BACTEROIDES, NO SE MULTIPLICAN POR LO QUE
TODO EL NITRÓGENO FIJADO ES TRASPASADO AL
HOSPEDADOR),

EL N2 QUE FIJAN ESTAS BACTERIAS NO ES


EXPORTADO Y SOLAMENTE PUEDE SER
APROVECHADO DESPUÉS DE SU MUERTE Y LISIS Y
UNA VEZ QUE HAYA SIDO MINERALIZADO
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CADA LEGUMINOSA LIBERA


AL MEDIO UNOS
DETERMINADOS
INDUCTORES (P. E. LA
ALFALFA, LUTEOLINA Y LA
SOJA GENISTEINA) QUE LA
BACTERIA RECONOCE Y LA
LLEVA A SINTETIZAR EL
FACTOR NOD
CORRESPONDIENTE, QUE
ESTÁ CONSTITUIDO POR UN
ESQUELETO DE 4 A 5 N-
ACETIL GLUCOSAMINAS CON
BASTANTES SUSTITUCIONES
QUE DETERMINAN LA
ESPECIFICIDAD.
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ESTOS FACTORES DETERMINAN MODIFICACIONES EN


LOS PELOS RADICALES, LA FORMACIÓN DEL CANAL DE
INFECCIÓN Y LA DIVISIÓN DE CÉLULAS DEL CORTEX,
QUE CONDUCEN A LA FORMACIÓN DEL NÓDULO EN
CUYO INTERIOR, PERFECTAMENTE ESTRUCTURADO,
SE VA A LLEVAR A CABO LA FIJACIÓN
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•AL NÓDULO LLEGA EL FOTOSINTETIZADO,


EN FORMA DE SACAROSA, PARA SOPORTAR
EL PROCESO.

•SERVIRÁ DE FUENTE DE ENERGÍA, PODER


REDUCTOR Y ESQUELETO CARBONADO PARA
LA INCORPORACIÓN DEL AMONIO
RESULTANTE DE LA FIJACIÓN.

•SERÁ TRANSPORTADO POR EL XILEMA AL


RESTO DE LA PLANTA EN FORMA DE AMIDAS
O UREIDOS, SEGÚN EL HOSPEDADOR SEA DE
ORIGEN TEMPLADO O TROPICAL.
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AUNQUE POR MUCHO TIEMPO SE HA CREÍDO QUE EL AMONIO


PRODUCIDO ERA TRANSFERIDO A LA CÉLULA HOSPEDADORA
POR SIMPLE DIFUSIÓN PASIVA, RECIENTEMENTE SE HA
DESCRITO QUE TAN PRONTO COMO EL AMONIO APARECE SE
CONVIERTE EN ALANINA Y ASÍ ES TRANSPORTADO FUERA DE
LA BACTERIA.
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INFLUENCIA DE LA INOCULACION CON


Rhizobium spp EN EL CRECIMIENTO DE
PLANTAS
INFLUENCIA DE LA INOCULACION CON Rhizobium spp EN EL CRECIMIENTO DE
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QUE SE PRETENDE?

•COMPARAR LAS ACTIVIDADES QUE PROMUEVEN


EL CRECIMIENTO DE Rhizobium spp. CON OTRAS
ESPECIES QUE SE ASOCIAN A CEREALES EN
ARROZ EN CONDICIONES DE INVERNADERO

•LAS CEPAS USADA SE TOMARON DE ESTUDIOS


ANTERIORES DONDE SE OBSERVO QUE POSEEN
UNA AMPLIA ACCION DE INFECCION

•Rhizobial Inoculation Influences Seedling Vigor and Yield of Rice Jatish C. Biswas,
Jagdish K. Ladha,* Frank B. Dazzo, Youssef G. Yanni, and Barry G. Rolfe. Agron. J. 92:880-886
(2000).

•Influence of Rhizobial lnoculation on Photosynthesis -and Grain Yield of –Rice


ShaobingTPeng,* Jatish C. Biswas, Jagdish K. Ladha, Prasad Gyaneshwar, and Yizhu Chen. Agron.
J. 94:925-929 (2002).

•Evaluation of Rhizobial Inoculation Methods for Chickpea Stephen Kyei-Boahen, Alfred


E. Slinkard, and Fran L. Walley. Agron. J. 94:851-859 (2002).
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QUE SE PRETENDE?
•EVALUAR EL CRECIMIENTO EN LA
GERMINACION Y EN ESTADOS REPRODUCTIVOS
•INVESTIGAR LA SOBREVIVENCIA DE UNA CEPA
MARCADA DE Rhizobium EN ASOCIACION CON
LAS RAICES DEL ARROZ.
•ESTABLECER LA PRODUCCION in vitro DE
FITOHORMONAS Y LA ACTIVIDAD DE FIJACION
DE NITROGENO USANDO EL ENSAYO DE LA
REDUCCION DE ACETILENO
•INVESTIGAR SI LA INOCULACION CON
Rhizobium PUEDE INFLUIR EN LA FOTOSINTESIS
DE LA HOJA DE PLANTAS DE ARROZ BAJO
CONDICIONES DE INVERNADERO
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UN BUEN VIGOR SE PUEDE


OBTENER:
VIGOR DE LA
GERMINACION
• MANIPULACION GENETICA
ES CRITICO
A UN CULTIVO (MUY
CUANDO
COSOTOSO Y DEMORADO)
COMIENZA LA
COMPETENCIA • MANIPULACIONES
POR: CULTURALES
•LUZ 1. APLICACIÓN DE
FERTILIZANTES
•NUTRIENTES
2. MANEJO OPTIMO DEL
•AGUA
AGUA
•AIRE
3. TRATAMIENTO DE LAS
SEMILLAS
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TRATAMIENTO DE LAS SEMILLAS CON


MICROORGANISMOS BENEFICOS
•CONTROLAN LA INCIDENCIA DE PLAGAS Y
ENFERMEDADES
•APORTA NUTRIENTES PARA MEJORAR LA
EFICIENCIA
•PROMUEVE EL CRECIMIENTO QUE CONLLEVA
A UNA MEJOR PRODUCCION
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ACTIVIDADES QUE PROMUEVEN EL CRECIMIENTO


DE LAS PLANTAS INOCULADAS CON Rhizobium spp.
•PRODUCCION DE ANTIMICROBIANOS
•INDUCCION DE UN SITEMA DE RESISTENCIA A
ENFERMEDADES
•FIJACION DE NITROGENO
•SOLUBILIZACION DE NUTRIENTES MINERALES
PRECIPITADOS
•PRODUCCION DE REGULADORES DEL
CRECIMIENTO
•AUMENTO DE LA HABILIDAD DE LA PLANTA PARA
EXTRAER NUTRIENTES
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MECANISMOS QUE SE PROMUEVEN


CON LA INOCULACION CON
Rhizobium spp.

•PRODUCCION DE FITOHORMONAS
•SOLUBILIZACION DE FOSFATOS
•INHIBICION DEL CRECIMIENTO DE
HONGOS
•ANTAGONISMOS DE LA MICROFLORA
ENDEMICA DEL SUELO
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FOTOSINTESIS

• EL 90% DE LA BIOMASA DE LA PLANTA


ES DERIVADA DE LA ASIMILACION A
TRAVES DE LA FOTOSINTESIS
LA FOTOSINTESIS NETA DE UNA HOJA DE
ARROZ ES AFECTADA POR:
1. CONDUCCION ESTOMAL
2. CONTENIDO DE N EN LA HOJA
3. PESO ESPECIFICO DE LA HOJA
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ASOCIACION A NO LEGUMINOSAS
•NO FORMA VERDADEROS NODULOS
•EN AUSENCIA DE LEGUMINOSAS DISMINUYE
LA POBLACION

ASOCIACIONES CON ARROZ


•R. leguminosarum BU. TRIFOLI, EN FORMAL
NATURAL DESARROLLA ASOCIACIONES CON
EL ARROZ, AUMENTANDO LA PRODUCCIÓN Y
EFICIENCIA EN LA FERTILIZACIÓN
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EN LA RESPUESTA DE LA EFICIENCIA
INTERVIENEN LOS SIGUIENTES
FACTORES :

•VARIEDAD DEL ARROZ


•CONDICIONES CULTURALES
•CEPA QUE SE UTILICE
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ANTECEDENTES
•ESTUDIOS HAN DEMOSTRADO UN INCREMENTO
EN LA PRODUCCION DE GRANOS EN 10 A 45 %
Y DEL 8 AL 22 % (BISWAS et al, 2000)
•AUMENTO EN LA ABSORCION DE N, P , K Y Fe
•AUMANTO EN EL VIGOR DE LAS PLANTAS DE
SEMILLEROS
INOCULACION (LEGUMINOSAS)
EL ÉXITO DE LA INOCULACION ESTA LIMITADO POR:
•CONDICIONES AMBIENTALES
•NUMERO DE CELULAS INFECTIVAS APLICADAS
•PRESENCIA DE Rhizobium NATIVAS
•METODO DE INOCULACION
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METODO MAS COMUN DE


INOCULACION
TRATAMIENTOS DE LAS
SEMILLAS ANTES DE SER
PLANTADAS CON UNA
PREPARACION LIQUIDA O EN
POLVO

SCUDER EN 1975, OBTUVO UN


INCREMENTO EN LA PRODUCCION
DE SOYA DE UN 38 % BAJO
CONDICIONES DE SEQUIA Y
CALOR, UTILIZANDO UNA
PRESENTACION GRANULADA
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SE HA OBSERVADO QUE LA GRAN MAYORIA


DEL INOCULADO MUERE DESPUES DE
TRANSPLANTADA LA SEMILLA

EL USO DE PRESENTACIONES GRANULARES


PRODUCE MAYOR CRECIMIENTO:
•SON APLICADAS DIRECTAMENTE EN EL SUELO
•EVITA EL CONTACTO CON SEMILLAS TRATADAS
CON QUIMICOS
•SOPORTAN CAMBIOS ADVERSOS DEL
AMBIENTE
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PROFUNDIDAD DE LA
INOCULACION
•MOVIMIENTO
LIMITADO DE LA
BACTERIA
•INOCULACION EN LA
SEMILLA O A LA MISMA
PROFUNDIDAD DE
SIEMBRA

LAS RAICES LATERALES TIENEN UN MAYOR


PAPEL EN LA FIJACION DEL NITROGENO
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•EN UN ENSAYO DE LA INOCULACION DE


Trifolium ambigumm CON Rhizobium Y
FERTILIZACION CON NITROGENO SE OBSERVO
QUE TENIA UN BAJO ESTABLECIMIENTO DE LA
BACTERIA DEBIDO AL DESARROLLO CLONAL QUE
ESTABLECEN PLANTAS MAS SUCEPTIBLES A LA
COMPETICION CON OTRAS ESPECIES

•NITROGEN FERTILIZATION AND RHIZOBIAL


INOCULATION EFFECTS ON KURA CLOVER
GROWTH
•Philippe Seguin, Craig C. Sheaffer,* Nancy J.
Ehlke, Michael P. Russelle, and Peter H. Graham.
Agron. J. 93:1262-1268 (2001)
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MATERIALES Y METODOS

CEPAS UTILIZADAS
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INOCULACION
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EVALUACION DE LA RESPUESTA QUE PROMUEVE EL


CRECIMIENTO DESPUES DE LA INOCULACION

•DISEÑO AL AZAR
•4 REPLICAS
•DESPRECIANDO LOS BORDES

PROPIEDADES DEL SUELO


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UN PRIMER ESTUDIO PARA PROBAR COMO LA
BACTERIA AFECTABA LA GERMINACION
•VARIEDAD: PANKAJ
•CEPAS: E11, LRBG74
•CONCENTRACION: 3.5 *105 CELLS POR SEMILLA
•SIEMBRA INDIVIDUAL A UNA PROFUNDIDAD DE 1 cm
EN SUELO ARCILLOSO

SE DETERMINO EL NUMERO DE SEMILLAS GERMINADAS


DESPUES DE LAS 157 HORAS

UN SEGUNDO ESTUDIO PARA EVALUAR LOS


PARAMETROS DE GERMINACION Y DESARROLLO
•SEMILLAS INOCULADAS (100 POR CAJA)
•PLUMULAS Y RADICULAS FUERON MEDIDAS DESPUES
DE 120 HORAS
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UN TERCER ESTUDIO MIDE LOS EFECTOS DE LA


INOCULACION SOBRE VARIOS PARAMETROS DEL VIGOR
DE LA GERMINACION SOBRE CONDICIONES DE
INVERNADERO
•SEMILLAS PREGERMINADAS PANKAJ FUERON
TRANSPLANTADAS
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SE DETERMINO:
•ALTURA DE LA
GERMINACION
•LONGITUD DE LA
RAIZ
•ÁREA FOLIAR
•CONTENIDO TOTAL
DE NITROGENO EN
HOJAS Y TALLOS DE
IR74
•N DE LA
GERMINACION
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TAMBIÉN SE EVALUO:

•EL EFECTO DEL VIGOR DE LA SEMILLA SOBRE


LOS PARAMETROS DE PRODUCCION EN LA
MADUREZ DURANTE LAS ESTACIONES HUMEDAS
Y SECAS

•FOTOSINTESIS Y PARAMETROS RELACIONADOS


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I EXP. MEDICION DE LA FOTOSINTESIS NETA DE


UNA HOJA Y CONDUCCION ESTOMATICA EN 25 Y
40 DIAS DESPUES DE EMERGER
II EXP. MEDICION DE LA FOTOSINTESIS NETA DE
UNA HOJA Y CONDUCCION ESTOMATICA EN
ESTADO DE FLORACION
EN ESTOS DOS EXP. LAS
MEDICIONES SE HICIERON
CON EL EQUIPO LI-6400
III EXP. MEDICION CON
EL EQUIPO LI-6200
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•SE DETERMINO ÁREA FOLIAR,


FLUORESCENCIA Y CONTENIDO DE NITROGENO

PARAMETROS AGRONOMICOS
•PRODUCCION DE GRANOS
•PANICULAS POR PLANTAS Y ESPICULAS
POR PLANTAS
•HUMEDAD CONTENIDA EN LOS GRANOS
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RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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