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ELISA,IFI,HEMOAGLUTINACION
ELISA
La tcnica de ELISA es un
inmunoenzimtico.
Pasos generales de un ELISA.
procedimiento
de
ensayo
Fundamento.
Interpretacin de resultados
Inmunofluorescencia indirecta
La inmunofluorescencia secundaria, o indirecta hace
uso de dos anticuerpos; el anticuerpo primario es el que
reconoce y se une a al molcula diana, mientras que el
secundario que es el que se encuentra marcado con el
fluorforo, reconoce al primario y se une a l.
Procedimiento
1.Preparar el PBS Buffer
2.Preparar una dilucin 1/5 de los sueros controles y las muestras con el absorbente
(v.g.: 10 ul de muestra + 40 ul del absorbente
3.Sacar los portaobjetos (sustrato), emplear las improntas necesarios
4.Cubrir las reas reactivas con las diluciones del control reactivo, no reactivo y muestras
problemas
5.Incubar en cmara hmeda 30 minutos a temperatura ambiente
6.Lavar rpidamente con PBS, usando pizeta. Luego realizar dos lavados de 5 minutos
cada uno, colocando los portaobjetos en el coplin, conteniendo PBS, agitarlo suavemente
7.Diluir la antigamma (G,A,M) humana FITC en PBS, aprox. 1/100. Tener en cuenta la
dilucin sugerida por el fabricante
8.Sacar las improntas del PBS, sacudir el exceso sobre papel toalla, pero manteniendo
hmeda las reas reactivas
9.Cubrir cada rea reactiva con la dilucin de antigammaglobulina humana, e incubar en
cmara hmeda 30 minutos a temperatura ambiente
10.Lavar como en paso 6. Secar como en paso 8
11.Colocar medio de montaje sobre un cubreobjetos y cubrir las reas reactivas sin
presionar evitando la formacin de burbujas
12.Se recomienda leer inmediatamente en el Microscopio de Fluorescencia o dentro de
las 24 horas conservados entre 2 8C en oscuridad
Fundamento
Hemoaglutinacin
Hemoaglutinacin directa
Hemoaglutinacin indirecta
Pasos
Fundamento
Aplicaciones
ELISA
HEMOAGLUTINACION
IFI