COLIFOR

MES

Coliformes: Son un
bacterianas que tienen
bioqumicas en comn
intestino. Agrupa a todas

Escherichia
Salmonella
Shigella
Klebsiella
Enterobacter
Citrobacter
Yersinia
Serratia
Proteus

grupo de especies
ciertas caractersticas
y que colonizan el
las enterobacterias:

Caractersticas generales del

grupo:
Bacilos Gram (-).
Su tamao oscila entre 0.5 y 2.0 m de
ancho y de 2.0 a 4.0 m de largo.
Bordes rectos y extremos curvos.
Temperatura ptima de crecimiento: 37C.
Aerobias o anaerobias facultativas.
Mviles o inmviles
Poseen o no capsula.
Fermentan o no la lactosa.

Familia
8 Tribus con Enterobacteriaceae
los correspondientes gneros en cada una
de ellas
Tribu I: ESCHERICHIEAE: Gnero I: Escherichia /

Gnero II: Shigella

Tribu II: EDWARSIELLEAE : Gnero I: Edwarsiella

Tribu III: SALMONELLEAE: Gnero I : Salmonella
Tribu IV: CITROBACTEREAE : Gnero I : Citrobacter
Tribu V: KLEBSIELLEAE: Gnero I: Klebsiella / Gnero II:
Enterobacter
Gnero III: Hafnia/
Gnero IV: Serratia
Tribu VI: PROTEEAE: Gnero I: Proteus / Gnero II: Morganella
Gnero III: Providencia
Tribu VII: YERSINIEAE : Gnero I : Yersinia
Tribu VIII: ERWINIEAE : Gnero I: Erwinia

TIPIFICACIN
BIOTIPIFICACIN: CARACTERES BIOQUMICOS
SEROTIPIFICACIN: ANTGENOS O (SOMTICOS), K
Vi (CAPSULARES) y H (FLAGELARES)
SEROGRUPOS Y SEROTIPOS
FAGOTIPIFICACIN: DE VALOR EN Salmonella y E. coli
PATRN DE RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS
GENOTIPIFICACIN MOLECULAR: GRUPOS
CLONALES, etc.

Antgenos de
Enterobacteriaceae
K Ag

Salmone
lla
Clasificaci
n:

Subgrupo
1

Subgru
po 2

Subgrupo
3

Subgrup Subgru
o4
po 5

Subgru
po 6

S. typhi
S.
choleraesui
s
S.
paratyphi
S.
gallinarum
S.
pullorum

S.
S.arizonae S.
S.
salamae S.
houtenae bongori
diarizonae

S. indica

CARACTERSTICAS DEL
GNERO:

Bacilos Gram (-).

Anaerobios facultativos.
Flagelos periticos.
No posee cpsula
No forma esporas
Mviles.
Producen H2S.
Glucosa (+).
Lactosa (-)

MORFOLOGA COLONIAL
Colonias
transparentes

MacConkey

EMB

Salmonella-Shigella Agar

Colonias
transparentes con
centro negro

Hektoen Enteric Agar

Colonias azulverdosas con centro

negro de H2S.

XLD Medium

Colonias rojas con

centro negro (H2S).

Agar sulfito de
bismuto

Colonias negras
con brillo
metlico.

PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO

KIA

GAS H2S

Salmonel
la

K/A

+ +

IND CIT

MO
V

LIS ARG

OR
N

- + + + +/- +

URE

Shigella
Clasificaci
Serogrup Serogrup
n:
oA

S.
dysenteriae

oB

S. flexneri

Serogrup Serogrupo
oC
D
S. boydii

S. sonnei

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Bacilos Gram (-)
No forma esporas
Inmviles
Aerobios-anaerobios facultativos.
Citocromo-oxidasa negativos.
Fermentan la glucosa sin produccin
de gas.
No decarboxilan la lisina.
No fermentan la lactosa.
No utilizan el citrato como nica
fuente de carbono.

MORFOLOGA COLONIAL

Colonias transparentes

Agar Hektoen
entrico

Colonias verdosas y
plidas en la
periferia

Agar SalmonellaShigella

Colonias transparentes sin

ennegrecimiento,
traslcidas u opacas y lisas

XLD Medium
Colonias rojas transparentes

PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO

KIA GAS H2S

IND CIT

MO
V

LIS ARG

Shigella
Grupos
A,B y C.

K/A

-/
+

S.
sonnei

K/A

OR
N

URE

Klebsiella
Clasificaci
n:
K. oxytoca

K.
ornithinolytica

ESPECIES
K. planticola K. pneumoniae
Subespecies:
K. ozanae
K. rhinoscleromatis

K. terrigena

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Bacilos Gram (-)
Inmviles
Anaerobios facultativos.
Fermentadora fuerte de lactosa
Fermenta la glucosa
Poseen una prominente cpsula de
polisacridos
Descarboxilan la lisina
No decarboxilan la ornitina (excepto K.
ornithinolytica)
Hidrolizan lentamente la urea
Utilizan el citrato como fuente de
carbono

MORFOLOGA COLONIAL

MacConkey:Colonias
grandes mucoides de
color rosa fuerte

EMB:Colonias grandes
color prpura, aspecto
mucoide, sin brilo

XLD: Colonias amarillo

brillante por
fermentacin de ms
de un carbohidrato.

PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO

KIA

GAS

H2S

IND

CIT

MOV

LIS

ARG

ORN

URE

K.
pneumonia
e

A/A

++

K. oxytoca

A/A

++

Enteroba
cter
Clasificaci
n:
E. aerogenes
E.
amnigenus
E. asburiae

ESPECIES Y SUBESPECIES
E.
cancerogenus

E. cloacae
E.
sakazakii

E. gergoviae
E. hormaechei

E.
dissolvens
E.
intermedius
E. pyrinus

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Bacilos Gram (-)

Movilidad por flagelos
Anaerobios facultativos.
Fermentadora de lactosa
Fermenta la glucosa
Decarboxilan la ornitina
Indol negativo
Utilizan el citrato como fuente
de carbono.

MORFOLOGA COLONIAL

E. Aerogenes y E. coli

K. pneumoniae y E. coli

EMB

E. Aerogenes

K. pneumoniae

XLD:
E.
aerogenes.
Colonias amarillas de 2-5
mm,
brillantes
y
prominentes.

PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO

KI
A

GAS

H2S

IND

CIT

MO
V

LIS

ARG

OR
N

URE

E.
Aerogen
es

A/A

E.
cloacae

A/A

+
+
+
+

+ -/+

Serratia
Clasificaci
n:
ESPECIES Y SUBESPECIES
S.
entomophila
S. ficaria
S. Fonticola

Gpo: S.
liquefaciens
S. grimesii
S. proteamaculans

S.
marcescens

S. plymuthica

S. rubidaea

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Bacilos Gram (-)
Movilidad por flagelos
Anaerobios facultativos.
Productora de Dnasa, lipasa y gelatinasa
Algunas cepas son productoras de
pigmento rojo (S. marcescens).
Resistentes a la cefalotina y colistina.
No fermenta la lactosa.
Fermenta la glucosa.
Productora de gas.

XLD:
colonias
pequeas de borde
entero
con
pigmentacin roja y
halo amarillo.
Brillantes.

Serratia marcescens

Neisseria
gonorrhoeae

CUADRO CLNICO
Agente causal de la gonorrea
Hombre: uretritis; secrecin purulenta , prurito y
miccin dolorosa.
Mujer: endocervicitis; disuria, leucorrea, prurito
genital y dolor abdominal.
Infecciones no tratadas: bacteriemia gonocccica;
lesiones cutneas: ppulas o pstulas hemorrgicas.

Oftalmia neonatal gonocccica.

Diagnostico en
el laboratorio

Identificacin en medios de cultivo

Exigente a nivel nutricional.
Medios selectivos enriquecidos:
Thayer Martin modificado: vancomicina (3 g/ml), colistina
(7,5 g/ml),nistatina (12,5 g/ml) y lactato de trimetropim
(5 g/ml) .
New York City.
Agar Mueller Hinton modificado.
Agar Martin Lewis.
Medios enriquecidos:
Gelosa chocolate.
Se caracteriza por ser de difcil cultivo.
Se incuban a 35 C durante 24- 48 horas.
Atmsfera hmeda con 5% de CO2.
pH: 7.2 7.6.
Sensibles a las desecacin, luz UV, cambio de temperatura y
pH.

Morfologa colonial
Colonias pequeas
Elevadas
Convexas
Brillantes
Aspecto mucoide
Cremosas
Bordes enteros
Color blanco grisceo
Tamao de 0.5 a1 mm.
Cultivos clnicos o subcultivos selectivos: T1 y T2: colonias
brillantes y pequeas (0.5mm). Poseen pili.
Subcultivos no selectivos: T3, T4 y T5: colonias grandes( 1.0
1.2 mm), planas y casi incoloras y opacas(no poseen pili).

Morfologa microscpica.

Diplococos.
Gram (-).
Lados adyacentes planos .
Tamao (0.6 1 m) de dimetro.
Dispuestos aisladamente con apariencia de rin o
granos de caf.
Ttradas (colonias jvenes).
Intracelulares (PMN N).
Carece de cpsula.
Posee pilis (factor de virulencia).
Inmvil.
No forma esporas.

Identificacin presuntiva: Prueba de la oxidasa

Prueba de oxidasa
Utiliza reactivo de Kovac (una solucin al 1% (p/vol)
de
N,N,N,Ntetrametil-pdihidroclorofenilendiamina)
para
detectar
la
presencia de citocromo c en la cadena respiratoria
de un microorganismo bacteriano; si el reactivo de
oxidasa es catalizado, se torna color prpura.
Mtodo del hisopo.
Mtodo del papel de filtro humedecido.
Mtodo directo en placa.
Nota: Deben utilizarse en crecimientos de 24
horas.
los diplococcos gramnegativos, oxidasa positivos aislados en medios
selectivos para gonococos deben identificarse presuntivamente como
N. gonorrhoeae.

Pruebas suplementaria enzima-substrato: Prueba de la

catalasa

Las cepas de N. gonorrhoeae

tienen una reaccin tpica muy
fuerte
(4+),explosiva
al
contacto
con
el
reactivo
superoxol.

Pruebas suplementarias bioqumicas

Reaccin de azcares en agar cistina tripticasa para la

produccin de cido de los carbohidratos por aislamientos de
Neisseria gonorrhoeae.

Chlamydia
trachomatis

Espectro clnico

Generalidades
Carecen de mecanismos para la produccin de energa (ATP).
Bacterias intracelulares obligadas aerobias e inmviles.
Poseen membrana interna y externa
Carecen de peptidoglicano.
Replicacin a travs de un ciclo de crecimiento nico.
Poseen un cuerpo elemental de 0.2-0.4 m (nunca se divide y es
infeccioso).
Poseen un cuerpo reticulado de 0.5-1.0 m (se multiplica al interior de
la vacuolas de la clula hospedera y no es infeccioso).
La replicacin intracitoplasmtica produce la formacin de inclusiones
compactas con una matriz de glucgeno en las cuales estn incluidos los
cuerpos elementales (cuerpos de inclusin).

Ciclo de desarrollo

DIAGNSTICO EN EL
LABORATORIO

DETECCIN
MUESTRAS:

DIRECTA

DE

LAS

Loscuerposdeinclusin deC. trachomatis contienenglucgeno,quesetien

con yodo y Giemsa, despus de incubar 48 a 72 h, los cubreobjetos se extraen y se
tien.
Las inclusiones se localizan dentro del citoplasma de las clulas epiteliales, a
menudosuubicacinesperinuclear.
Se requiere de microscopia especializada en las clulas epiteliales del raspado
conjuntival teido con anticuerpos fluorescentes o Giemsa. Sensible para el
diagnstico deinfeccionesocularesenrecinnacidosyenuretritis.

EL CULTIVO
Eselmtodomssensibleconsideradocomo lapruebadeoroparaeldiagnsticode
infeccionescausadas porC. trachomatis,deltractogenital.Sensibilidadde7085%.
Muestras uretrales de hombres y mujeres asintomticas, las nasofarngeas, rectales,
vaginales.
Las lneas celulares ms utilizadas son las clulas McCoy (fibroblastos de ratn),
HeLa 299 (carcinoma humano), las BHK21 (clulas de ovario de hmster) y
recientemente las clulas BGMK. Inoculacin en el saco vitelino de huevos de pollos
embrionadosde68 dasdeedad.

El cultivo se propaga en una monocapa sobre un cubreobjetos inoculado con las

muestras.
Si hay suficiente nmero de cuerpos elementales de clamidias ellos infectarn las
clulasycrecernenforma deinclusionescitoplsmicas,luegodeserinfectadas,las
inclusiones pueden observarse despus de 4872 h de incubacin y teidas con
anticuerposmarcadosconfluorescena.
La observacin directa de las inclusiones que posee una morfologa distintiva
contribuyeal100%deespecificidad.