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Universidad Nacional

Pedro Ruiz Gallo


FACULTAD DE Ingeniera qumica e
industrias alimentaria
CINETICA DEL CONSUMO DE SUSTRATO
BIOTECNOLOGIA
INTEGRANTES:
CESPEDES DURAND ROMAEL
IVAN DE LA CRUZ BALDERA
FLORES VASQUEZ PAOLA
GIL PEREZ YSABEL

CINTICA DEL CONSUMO DE SUSTRATO


Cuando se siembran microorganismos en un medio de cultivo
apropiado, los mismos comienzan a dividirse activamente
empleando los nutrientes que le aporta el medio de cultivo para
fabricar nuevos microorganismos. Este proceso contina hasta que
algn nutriente del medio de cultivo se agota, este sera el sustrato
limitante. Consecuentemente el crecimiento se detiene. Tambin
puede detenerse el crecimiento por acumulacin de alguna
sustancia inhibidora formada por las mismas clulas como puede
ser una alta concentracin de alcohol.

CINTICA DEL CONSUMO DE SUSTRATO


El sustrato consumido por el microorganismo tiene como finalidad :
El crecimiento celular.
Mantenimiento de las actividades vitales.
La generacin de producto, para el caso donde la formacin de
producto no est asociada de forma directa al metabolismo
energtico.
A pesar de que le crecimiento de las clulas es un fenmeno muy
complejo, a menudo se puede obtener una descripcin global buena del
mismo a travs de ecuaciones relativamente sencilla.
Sustrato (S) + Clulas (X)
+ Producto (P)

ms clulas (X)

CINTICA DEL CONSUMO DE SUSTRATO


El sustrato normalmente es la fuente de carbono. El rendimiento
est en funcin de tal fuente de Carbono usada y las condiciones
del proceso. Puede variar durante el proceso. El consumo de
sustrato no est dedicado slo a la produccin de biomasa. ste
tiene tres cometidos, para asimilacin de los microorganismos como
material celular, provisin de energa para la sntesis celular y
energa para el mantenimiento del cultivo.
Entonces la siguiente ecuacin representa el consumo total del
sustrato:

S= ( S)MC + ( S) C+ ( S)M
Sustrato total = Sustrato empleado asimilacin materia celular +
Provisin Energa sntesis celular + Energa mantenimiento cultivo

LISTA DE SIMBOLOS EMPLEADOS EN LA


CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO

DEFINICIONES
Substrato. Fuente de carbono y energa.
Rendimiento.Relacion que existe entre el sustrato generado
y el sustrato consumido.
CONCENTRACIN DE BIOMASA.-Es bastantes evidente: la
concentracin de biomasa expresada en masa seca por unidad de
volumen de cultivo. Es usual encontrar Cb expresada en gramos por
litro (g/L), gramos por metro cbico (g/m3) o kg por metro cbico
(kg/m3)que es la unidad que corresponde al SI.
VELOCIDAD ESPECFICA DE CRECIMIENTO (). Es el parmetro que
relaciona Cbcon el tiempo t. Es una medida de la capacidad de
generacin de biomasa que tiene la unidad de biomasa. Es decir,
mide la cantidad de gramos de biomasa que es capaz de generar
cada gramo de biomasa en la unidad de tiempo. Su definicin
matemtica es la siguiente:

ECUACIONES EMPLEADAS EN LA
CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO
1)

Yx/s
2)

= - dx / ds

rs

3)

rX
rs

5)

rs

qs

7) qsxm
8) q02
9) q02 =

4)
6)

r / Yx/s
x
x / Yx/s
qs

/ Yx/s

m /

Yx/s

q02max C / ko + C

/ Yx/o

m0

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO


(rS)
Es la "velocidad" con la que el organismo consume el substrato.
Evidentemente, cuanto mayor sea la velocidad de consumo mayor
ser la velocidad de crecimiento (). Asimismo, cuanto mayor sea el
rendimiento del substrato consumido, tambin mayor ser la
velocidad de crecimiento.

Aplicando Yx/s

(Rendimiento Celular):

Si reordenamos la Ec. (1) y derivamos respecto al tiempo se obtiene


Ec. (a):
Yx/s

= - dx / ds

(1)

Yx/s

dx / dt

/ - ds / dt Despejando:

1 / Yx/s

- ds / dt

. dx /dt (b)

- ds / dt

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO


(rS)
Aplicando sus equivalentes:

rs

=
1 / Yx/s
sustrato

rx

donde: rs = velocidad de consumo


rx = velocidad de

crecimiento celular
Reordenando:

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO ( rs )

rs

rx / Yx/s .(a)

2.

Aplicando rx (velocidad de crecimiento celular):

rX =
de crecimiento

Introduciendo la Ec. (3)

rS

en la

Ec. (a) se obtiene Ec. (c):

x ..(3)
=

donde:

= velocidad especifica

rX / Yx/s (a)

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rS)

rsx

x / Yx/s

..(c)

VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO


(rS)
3.-Aplicando qS (velocidad especifica de consumo de
sustrato):
VELOCIDAD DE CONSUMO DE SUSTRATO (rs )

rS

tambin puede expresarse como:

rsx

qsx

. (d)

La velocidad de consumo de sustrato rs es directamente


proporcional a la concentracin de biomasa. El factor de
proporcionalidad se conoce como velocidad especfica de consumo
de sustrato qs.

VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO DE


SUSTRATO (qs)
Las velocidades especficas suelen brindar informacin acerca de
cul es la actividad metablica del microorganismo (o de la
biomasa) durante el cultivo, ya que el estar referidos a la unidad de
biomasa cualquier modificacin en el valor de , qs, etc. estar
indicando que "algo" est ocurriendo en el metabolismo del
microorganismo en cuestin.
1. Comparando rS (velocidad de consumo de sustrato):

Comparando las Ec. (c) y (d),


(c) y (d)

se obtiene Ec. (e)

x / Yx/s

qS . x

Despejando qS

qS

x / Yx/s . x

VELOCIDAD ESPECIFICA DE CONSUMO SUSTRATO (qS )

qs

/ Yx/s

..(e)

MANTENIMIENTO CELULAR
Los primeros trabajos realizados sobre cultivos de
microorganismos se llevaron a cabo en sistemas batch en los
cuales la poblacin crece durante gran parte del cultivo a su
mxima velocidad y en un ambiente que cambia
permanentemente. Bajo estas condiciones y en presencia de una
nica fuente de C y energa los microorganismos toman dicha
fuente de C a una velocidad que es proporcional a la de
crecimiento.

qs

1
Yx / s

PUEDE OCURRIR CONSUMO DE SUSTRATO SIN


QUE SE PRODUZCA CRECIMIENTO (GENERACIN
BIOMASA)?
ElDE
consumo
de sustrato observado cuando la velocidad de
crecimiento es nula representara la fraccin de la fuente de C y
energa destinada a producir energa no asociada al
crecimiento. La misma representa el consumo de sustrato que
no redunda en un aumento de biomasa sino en el
mantenimiento de otras funciones vitales. A este consumo de
FCE sin crecimiento de biomasa se lo conoce como
mantenimiento celular (propuesto por Pirt).
qs podra entonces
expresarse
como:
s
crecimient
o
mantenimie
nto

q q

qs
ms x
Yx/s

Los destinos de esta energa de mantenimiento constituyen: el


recambio de ARN, recambio de enzimas, protenas,
componentes de pared celular, transporte de iones,
mantenimiento de gradientes de concentracin (pH o presin
osmtica), movilidad, etc.

qs
ms x
Yx/s
Ecuacin de Pirt

Divido por .X

1
1
ms

+
Yx / s Y x / s

Otra forma de la ecuacin de Pirt

En la relacin entre los rendimientos Y x/s y Y x/s primeramente


debe destacarse que Y x/s es el es el coeficiente del rendimiento
experimental y que Y x/s es el coeficiente de rendimiento teorico el
cual solo puede calcularse por la segunda ecuacin.

El crecimiento microbiano involucra el consumo y la


transformacin qumica de unos pocos compuestos y elementos.
La energa para este proceso proviene principalmente de la
oxidacin de la fuente de C y energa. Si consideramos
entonces, el rendimiento en el contexto del metabolismo
principalmente de la fuente de C, los procesos involucrados en
la conversin en biomasa podran esquematizarse del siguiente
modo:

El ATP representado en el esquema es el proveniente tanto de


las reacciones de fosforilacin a nivel de sustrato, como de la
fosforilacin oxidativa (cadena respiratoria).
Este esquema sugiere que la fuente de C y energa que entra
a la clula es catabolizada para producir poder reductor y
esqueletos carbonados (metabolitos intermediarios). Una
porcin de los equivalentes de reduccin es oxidado por los
componentes de la cadena respiratoria resultando la sntesis
de ATP, y parte de ste junto con otra fraccin de poder
reductor, es utilizado para convertir los metabolitos
intermediarios en polmeros y biomasa. Otra fraccin del ATP
formado es destinado a otras funciones vitales.
Este modelo demuestra tambin que solo cuatro
componentes medibles experimentalmente estn asociados a
la formacin de energa que son: la fuente de C y energa,
el O2, el ATP y el CO2.

Debemos recalcar que la ec. de Pirt no es vlida para representar la


velocidad de consumo de la fuente de Nitrgeno u otros sustratos
distintos a los tres arriba mencionados. En estos casos la velocidad
de consumo estar representada por la ec.

qs

Yx

/ s

Hasta el momento hemos considerado el crecimiento de


microorganismos en aerobiosis y hemos despreciado la formacin de
productos. Los productos que pueden formarse pueden ser clasificados
en (a) los que se encuentran asociados a la formacin de
biomasa, y (b) aquellos que no estn asociados al crecimiento.
Los productos del tipo (a) (generalmente producidos en anaerobiosis)
no requieren gastos extras de consumo de sustrato para la formacin
del producto, por lo que la ecuacin de Pirt sigue siendo vlida.

FACTORES QUE
AFECTAN EL
MANTENIMIENTO
CELULAR
PH
Fuerza inica
temperatura

OTROS DESTINOS DE LA
ENERGIA DE MANTENIMIENTO
Ciclo ftil
Metabolismo de
sobreflujo

REQUERIMIENTO DE OXIGENO

Concepto de concentracin
critica de oxigeno disuelto
En
la
prctica
se
utiliza
principalmente el concepto de Cc
La Cc es el valor por encima del cual q02
es independiente de la concentracin
de oxgeno disuelto y por lo tanto el
crecimiento no est limitado por 02
En estas condiciones el valor
q02
depende del cual sea el valor de , el
cual ser funcin del substrato que
limita el crecimiento
Los valores de Cc para la mayora de
los organismos estn en el orden de 0.1
a 1 mg mg L-1 (3.1 -31 Um) valores
relativamente bajos si se compara con
la solubilidad del 02 , que a 30 C y
0.21 atmsfera en medios acuosos
diluidos es de 7.8 mg L-1

PROBLEMA RELACIONADO CON LA


CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO
Se tiene una poblacin microbiana creciendo activamente en un medio de
cultivo, obtenindose los siguientes datos experimentales:

Calcular el tiempo transcurrido hasta que la concentracin de 02 se hace


crtica e igual a 0.5 mg L-1
1.

CLCULO DE LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO (rx)


rx = u x
rx = 0.15x10 = 1.5g L-1 h -1

PROBLEMA RELACIONADO CON LA


CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO
2.-CLCULO DE VELOCIDAD DE CONSUMO DE OXIGENO (r02)
r02 = rx / Yx/o

m0 X

r02 = 1.500/1 + 2.6x10


r02

=1.526 mgL-1 h -1

3.-CONCENTRACIN CRITICA DE OXIGENO DISUELTO

Si se tiene:

rx

dx /dt

Por analoga:

ro2 = - dc / dt

u . x

= qo2 . x

ro2 = - dc / dt
Integrando sta ecuacin con la condicin
Donde

to

Co

Co : Concentracin de 02 disuelto a to = O
C :

Resulta:

Concentracin crtica de oxgeno disuelto a t


- dc / dt
C

ro2
t

PROBLEMA RELACIONADO CON LA


CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO
- dc

ro2 . dt

Co

to

Co - C
- C

ro2 ( t - to)

- Co + r o2 ( t - to)
concentracin critica de oxigeno disuelto:
C

Co - r o2 t

4.-CALCULO DEL TIEMPO NECESARIO PARA QUE Cc = 0.5

Despejando t:

Co -

rO2 t

rO2 t

- Co + C

rO2 t

Co - C

Tiempo requerido para concentracion critica de oxigeno:


Co - C
t

= -----------------rO2

De donde el tiempo necesario para que:

Cc = C = 0.5

ser:

7.8 mgL-1 - 0.5 mg L-1


t

= -------------------------------1526 mg L-1 h-1

4.8

. 10 -3 h

17.3 segundos

Por tanto, en escasos segundos el crecimiento comenzar a estar


limitado por el oxgeno, y eventualmente llegar a detenerse cuando
la concentracin sea nula, a menos que sea repuesto continuamente
y a una velocidad comparable a la del consumo.

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