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BACTERIAS

SULFATO
REDUCTORAS
Sonia Gabriela Ruz Lpez
Citlaly Arleth Prez Hernndez
Yadit Belem Izquierdo Hernndez
Jos Alfredo Suarez Snchez
BSR
Se clasifican en
dos mtodos

Mtodos de
Mtodo Directo
Cultivo

Todos los NO requiere del


Mtodos de estudios de este crecimiento de
cultivo mas tipo son las bacterias
usados incubados a 350 durante la
C prueba

Clulas de APS Reductasa


Ensayo de ATP
epifluorescencia de Anticuerpos

Botellas de Agar Tubos de


Caldo Profundo Agar liquido
MTODOS DE
CULTIVO
Botellas de Caldo
Este medio usa una base media o lactate

Cuando hay presencia de BSR se produce Sulfato Ferroso

Las seales de presencia de BSR provocan un ennegrecimiento en


un periodo de 28 das
Procedimiento
Si las
Se toma 1 ml
Se toma 1ml bacterias son
de la
de la botella muy altas el
muestra y se El proceso se
y se vuelve a proceso
inyecta a la Se agita repite 5
inyectar a la puede
botella o series
siguiente repetirse de
medio de
botella. 10 a 12
cultivo.
veces

Datos importantes

Si una botella Si hay mas 3 botellas


esta de dos ennegrecid
ennegrecida botellas as
ennegrecidas

Solo hay 1 Hay 10 Hay 100


organismo de organismos de organismos de
BSR BSR BSR presentes
Cuando el smbolo aparezca significa
que todas las series de botellas se
tornaron negras ejemplo:

Son reportados con un 10^5- 10^6


rango especifico ejemplo

4 botellas
rango 10-
104
En caso de encontrar variedad de color en
las muestras se tomar como resultado la
ultima botella con ennegrecimiento.
Agar Profundo

El
ElSulfato
relativode Sodio es
numero de incluido como un
valores son
El Agar profundo describe una
estimadosagente
tomando oxidante reductor
en cuenta la rapidez
modificacin
con la que se oscurecede Caldo)
de RP38(Botellas
Procedimiento
Esta incubacin
tiene una duracin
Aceite mineral y
de 5 das y el
Se inserta a un Dixido de carbono ennegrecimiento
frasco con Agar son adheridos para es revisado
semislido. excluir el aire. Se
Trabaja con la capta en un frasco diariamente.
inmersin de una
tubera limpia dentro
una muestra sin diluir.
Tubos lquidos de Agar

As como la
tcnica de Agar
Usa el tripfono profundo, esta
como nico utiliza el Sulfato
nutrimiento. de Sodio como un
eliminador de
Oxigeno.
Procedimiento

Posicionar las Dejar enfriar Las


tuberas los tubos en disoluciones
Luego los
dentro de un medio de de la muestra
tubos son
agua 40 a 45C deben ser
incubados por
hirviendo antes de hechas en
3 das
para mezclar adherir la una serie de 6
el medio. muestra veces (10^6)

Estas disoluciones
son pipeteadas del
fondo de la
tubera.
Datos importantes del mtodo

Es importante tener
Los resultados son el color de la
interpretados por disolucin para
un numero mltiplo tener un nmero de
contable. clulas/ml de la
muestra.

Si el tubo est
generalmente
oscurecido y no son
visibles las colonias
significa que las BSR son
muy numerosas para ser
contadas.
MTODO DIRECTO
Ensayo o prueba de ATP

Este mtodo estima el numero total de organismos por la medicin


de la cantidad de Adenosintrifosfato (ATP) en la muestra.

El ensayo de ATP es una tcnica usada para estimar el numero


relativo que incluyen BSR
Procedimiento
Involucra la
filtracin de la Esta muestra
Este emite como
muestra para filtrada se le
resultado el
remover los adhiere un
numero de las
solidos disueltos reactivo que
clulas
y sales que comunica las
bacterianas
podran interferir clulas de ATP.
con la prueba.

Este reactivo es una


enzima especial que
reacciona con el ATP
Clulas de Epifluorescencia

Este anticuerpo esta elaborado por un


componente
Este
Estomtodo fluorescente,
se pueden
es basado
ver conen que
unun ataca el lugar
microscopio
anticuerpo
especifico
especifico que donde estn
epifluorescente
ataca a las las BSR
clulas BSR
Procedimiento
La muestra es
relavada con un
fluido especial
Se vuelve a incubar por
20 min con un segundo
agente de anticuerpo que
contiene un compuesto
Incubarla por 20 min fluorescente.
con un agente
anticuerpo primario
Involucra el revolver la
muestra

El calculo es
terminado cuando
est a 1000 x su
magnificacin
debajo de una
inmersin de aceite.
APS Reductasa de Anticuerpos

Este mtodo
involucra
anticuerpos
desarrollados
por adenosina- Una enzima interna
5-fosfosulfato encontrada en todas
las BSRs
Procedimiento

La muestra
La muestra es
primero es lavada Luego esta es Esta es lavada 4
sumergida dentro
para remover los tratada por veces y su color
de la pipeta para
qumicos inferidos pequeos se desarrolla en la
tratar y analizar
como el Sulfuro ultrasonidos solucin
sus poros
de Hidrogeno

Este instrumento
trabaja con pilas que
rompe y abre las
clulas de las
bacterias y realza la
enzima reductasa
(APS)
Datos importantes

La coloracin de la
Si la APS presente
muestra es
en la muestra este
proporcional con la
se muestra de color
cantidad de
AZUL despus de
enzimas que se
10min.
encuentren.

El color que se
Los resultados obtenga es
relacionado con
son ledos por el los nmeros
color aproximados de
BSR.
CRITERIOS DE
EVALUACIN
Estos mtodos han sido evaluados por las bases de 6 criterios: EXACTITUD,
ESPECIFICIDAD, USO FACIL, TIEMPO REQUERIDO EN OBTENER LOS
RESULTADOS, USO APROPIADO PARA EL LABORATORIO Y
LIMITACIONES.

Exactitud

Para determinarla, las muestras contiene el nmero de clulas de BSRs probados


por cada mtodo en el laboratorio.

Especificidad

La exactitud implica la habilidad de contar el numero total de BSR. La


especificidad incluye:
1.- Contar los varios tipos de Sulfato Reductores.
2.- Descartar otros tipos de bacterias presentes.

Uso fcil

Algunos mtodos requieren un alto nivel de actuar para su uso exitoso mientras que
otros pueden usarse con una pequea tcnica.