Introduo

As X Arroz

Inundao continua

Inundao intermitente ou irrigao por

asperso.
Introduo

Mo e o ciclo do arsnio.

Precipitao e reduo da biodisponibilidade.

Mo e a especiao do arroz.

iAs ,DMA, toxicidade e genotoxicidade.

 Objetivo

O objetivo do presente estudo foi estabelecer uma experincia

detalhada na qual os ciclos de ferro e arsnio pudessem ser decifrados
por mtodos fsico-qumicos e parmetros biolgicos, afim de definir
seu papel na contaminao de gros de arroz estabelecidos em
diferentes condies agronmicas.
Materiais e mtodos
2.1. Configurao experimental e regimes hdricos
O experimento foi conduzido no Centro de Pesquisa do Arroz (Ente Nazionale Risi)
em Castello d'Agogna (Pavia, Itlia) em 2013, em macrocosmos montados em
tanques de plstico de 0,83 m2 cheios com 30 cm de cascalho e 25 cm de solo de
um Paddy field

macrocosmos foram localizados em uma rea ao ar livre

trs regimes de gua diferentes: inundao contnua (FC); Irrigao rotacional ao

longo da estao de cultivo (arroz aerbico, AR) e inundao contnua com um
perodo de 14 dias de drenagem antes Florao
Materiais e mtodos
2.2. Anlise qumica do solo e dos poros

As amostras de solo foram secadas ao ar e todas as anlises foram realizadas na

frao de terras finas (<2 mm).
As espcies de arsnico foram medidas com(HPLC,
Agilent 1100, Agilent Technologies, EUA) numa coluna de permuta aninica PRP-
X100 equipada com uma pr-coluna.
Materiais e mtodos
2.3. Arsnio total e especiao em gros de arroz

A concentrao total de As no gro de arroz foi determinada por ICP-MS com

sistema de SRO. A separao e quantificao das espcies As foram realizadas
por HPLC imediatamente aps a extraco.
Materiais e mtodos
2.4. Coleo de solo e rizoplanos de rizosfera para anlises microbiolgicas

Resumidamente, Partes epignicas das plantas e o solo em massa ao redor das

razes foram removido.
Materiais e mtodos
2.5. Anlise de microscopia
Aps a secagem, os filtros foram montados em lminas de vidro Vectashield
(Vector Laboratories, Burlingame, CA), para reduzir a autofluorescencia das
amostras e observado com um microscopio de fluoresccencia (Zeiss Axioskop)
fornecido com uma lampada UV de Mercury de arco curto HBO 50W / ACL2
OSRAM e filtro Zeis 1 e 15 Conjuntos para DAPI e FISH, respectivamente.

As clulas foram contadas em 20 campos microscpicos utilizando uma grelha

calibrada
Materiais e metodos
2.6. Isolamento de cidos nucleicos e PCR quantitativo em
tempo real
O ADN total isolado utilizando o Kit de Isolamento de ARN RNA PowerSoil Total e o KIT de
Eluio de ADN RNA PowerSoil (MO BIO.

Cada amostra foi amplificada em triplicado. Para calcular o nmero de cpias do gene,
foram criadas curvas padro amplificando quantidades conhecidas de ADN isolado de
estirpes bacterianas Ou plasmdeos clonados contendo o alvo.
Materiais e metodos

2.7. Preparao da biblioteca de clones e anlise de sequncias

PCR padro

Os clones positivos Sequenciado e o plasmdeo extrado

Materiais e mtodos
2.8. Anlise estatstica

A anlise estatstica dos dados foi realizada com o SPSS Verso 21 do software.

Anlise de varincia unidirecional (ANOVA), anlise de varincia de Tukey B,

Duncan e t-teste em p <0,05 foram utilizados para comparaes.
Materiais e mtodos
2.9. Nmeros de acesso

Genbank ,nmeros de acesso de KX592445 a KX592464

Resultados
3.1. Caractersticas do solo

o solo era arenoso-argiloso texturizado.

cido e com um baixo contedo de C orgnico.
O teor de As foi de 11,4 mg kg- 1
A concentrao de As no variou
entre macrocosmos e no foram encontradas diferenas quando o
solo foi reanalisada aps o final da experincia.
Resultados
3.2. Dissoluo de ferro e arsnico em gua e gros de arroz
contaminao.

A baixo do LD antes da inundao

Florao
_Tratamento CF_125 mg-L___190mg L
_As(V) 140mg-L
_As(III) 40mg L
Resultados
Tratamento 2IED
Fase de florao As quase ausente
Aumento para 17mg-L no final da estao

Tratamento AR
As total e espcie permaneceu desprezvel

*FeIII seguiu as tendencias do As

Resultados
Resultados
Ph do solo acido variando de 5,7 e 6,5
As no arroz
CF 237mg-kg
2IED 68 mg-kg
AR 5mg-kg

*Em gros de arroz As (III) e DMA representaram

54,4% e 42,6%, respectivamente,enquanto que
As (V) representou apenas uma frao menor
Resultados
Resultado
3.4. Quantificao de genes envolvidos no
metabolismo do arsnico

Gene
AioA _a
ArsM_b
ArC_c
Resultado
Discusso
4.1. Qumica de poros e arsnico no gro de arroz
so afetados por tratamento de gua

Condio oxi/anoxi induzido pelos diferentes

regimes de inundao.
Biodisponibilidade gerada pelos mo.o.
Discusso
4.2. Populaes bacterianas envolvidas na ciclagem de ferro.

Discrepancias das populaoes_ diferentes tecnicas e possivel baixa

especificidade.
Metabolicamente versateis capaz de utilizar
diferentes aceitadores de e-.
FeRB da famlia Geobacteraceae e do FeOB Gallionellaeae e
Leptothrix sp. Rizoplane foram mais abundantes em 2IED
Plantas. Para FeOB, este aspecto pode ser explicado pela presena
de concentrao ptima de O2 necessria para o seu crescimento.
Discusso
4.3. Arsnico-processamento de populaes bacterianas

A maior abundncia de bactrias totais na rizosfera AR ja foi

relatado (Somenahally et al., 2011b). Isto pode ser
explicado pelo fato de que sob CF menos O2 est presente, com a
aumento de bactrias com metabolismos baseados em
aceitadores que produzem um crescimento celular mais lento.
Alm disso,a maior concentrao de As na gua porosa poderia ter
tido efeitos txicos e selecionados apenas para a frao Resistente a
comunidade total
Concluso
Contaminao resultante de processos diretos e
indiretos

Com a diminuio do ambiente hidrico ocorre a

diminuio do As em solos e em graos de arroz.

Bacterias promovem a especio.

Referencias
Arao, T., Kawasaki, A., Baba, K., Matsumoto, S., 2011. Effects of arsenic compound
amendment on arsenic speciation in rice grain. Environmental Science and
Technology 45, 1291e1297.
Beller, H.R., Chain, P.S.G., Letain, T.E., Chakicherla, A., Larimer, F.W., Richardson, P.M.,
Coleman, A.M., Wood, A.P., Kelly, D.P., 2006. The genome sequence of the
obligately chemolithoautotrophic, facultatively anaerobic bacterium Thiobacillus
denitrificans. Journal of Bacteriology 188, 1473e1488.
Borch, T., Kretzschmar, R., Kappler, A., Van Cappellen, P., Ginder-Vogel, M.,
Voegelin, A., Campbell, K., 2010. Biogeochemical redox processes and their
impact on contaminant dynamics. Environmental Science and Technology 44,
15e23.
Cahyani, V.R., Murase, J., Ikeda, A., Taki, K., Asakawa, S., Kimura, M., 2008. Bacterial
communities in iron mottles in the plow pan layer in a Japanese rice field:
estimation using PCR-DGGE and sequencing analyses. Journal of Soil Science
and Plant Nutrition 54, 711e717.
Cattani, I., Fragoulis, G., Boccelli, R., Capri, E., 2006. Copper bioavailability in the