ESPECTROMETRA

Mtodos Colorimtricos

Los mtodos empleados en anlisis colorimtrico:

Tipo Series.

Dilucin.

Duplicacin.

Balanceo.
Tipo Series
Volumen determinado de la muestra en un tubo aforado.
Volumen particular de reactivo.
Se compara con una serie de tubos testigos.
Las caractersticas de los tubos testigos son conocidas.

Dilucin
La muestra y el testigo se colocan en dos tubos graduados.
Se les agrega el mismo volumen de reactivo hasta que desarrollen la coloracin.
Se les agrega agua destilada al de mayor concentracin.
Igualados los colores, se obtiene la concentracin por unidad de volumen.
Duplicacin

La muestra y el testigo se ponen en dos tubos de ensaye graduados.

Se agrega el mismo volumen de reactivo.
Se coloca agua destilada en un tercer tubo.
Se agrega la solucin del tubo testigo y se agrega el agua destilada.
Hasta obtener en el mismo volumen la misma coloracin en la muestra como en el tercer
tubo.
Mtodos Colorimtricos de Anlisis
Diagrama del Colormetro
de Duboseq.
Ley de Lambert Beer

Considera la relacin entre el poder de radiacin de la luz incidente y el de la
transmitida, en funcin del paso optimo y de la concentracin.

donde k es una constante de proporcionalidad.

b la longitud del paso ptico.
c la concentracin.
Mtodos colorimtricos de anlisis

Medicin o especificacin de colores. Se analiza por medio de colormetros el

cual es un dispositivo para comparar el color de la solucin con la solucin
patrn.

Probetas de Hehner
Colormetro de Duboseg
Espectroscopia de Absorcin

La ciencia de espectroscopia de absorcin atmica ha producido tres tcnicas

de uso analtico, las cuales son:

La Emisin.
La Absorcin.
La Fluorescencia.

Estado Fundamental. (Configuracin orbital normal).

Estado Excitado. (estado inestable).

0 1X seg Hasta minutos

Fluorescencia Fosforescencia
 Longitud de onda de la luz emitida es una propiedad especifica de cada
elemento.
El proceso de excitacin y decaimiento al estado fundamental es comn para
los tres campos de la espectroscopia.
Emisin Atmica (la muestra es sometida a una alta energa y temperatura.
Tcnicas de Emisin (para determinar cuanto de un elemento esta presente
en una muestra.

la caracterstica de inters en las medidas por absorcin atmica, es el

monto de luz, a la longitud de onda resonante, que absorbida, cuando la luz pasa
a travs de una nube atmica.
El tercer campo en la espectroscopia atmica es la Fluoroscencia atmica.
(los tomos en estado fundamental oxigenados por llama, son excitados al
hacerse aadir un rayo de luz sobre el vapor atmico.
Se mide la emisin resultante del decaimiento de los tomos excitados por
la fuente de luz.
 PRISMA: desdobla la radiacin policromatica en pequeas bandas de
longitudes de onda para que la radiacin desdoblada pase a travs de la
rendija de salida y el prisma se hace girar hasta obtener la longitud de onda
deseada, estas utilizan el ndice de refraccin para efectuar la dispersin.

MATERIAL DEL PRISMA: El que se usa en los Monocromadores para el

ultravioleta visible e infrarrojo debe elegirse cuidadosamente para un
funcionamiento optimo. El cual puede utilizar un prisma de cuarzo y slice el
cual emite una radiacin aproximada de 200m y tiene una dbil banda de
absorcin. Silice de alto grado tiene una radiacin hasta 185m. Bromuro de
potasio no se emplea para el infrarrojo cercano da buenos resultados en las
regiones entre 14.3 y 23.5.

REJILLA DE DIFRACCION: Son superficies aluminizadas de alta reflexin con un

gran numero de surcos paralelos y a igual distancia. Tiene de 600 a 2000
lneas por milmetro dependiendo de la regin del espectro para el cual se
usen.
 LENTES Y ESPEJOS: La radiacin se Colima y enfoca mediante estos en la
regin del infrarrojo se usan espejos porque la mayora de los materiales no
son lo suficientemente transparentes lo cual provoca perdidas de energa muy
notables.

RECIPIENTES PARA MUESTRAS: Estas pueden ser celdas o cubas las cuales
estudian la regin ultravioleta o del visible y se puede utilizar para gases o
soluciones. se colocan despus del monocromador en los aparatos del
ultravioleta y visibles estos para reducir al mnimo la descomposicin que
pudiera causar otra longitud de onda de alta energa de la radiacin sin
desdoblar.

LONGITUDES DE LAS CELDAS SON:

1. Para gases de 0.1 y 100 mm.
2. Para soluciones de 1 a 40 cm.
3. Para muestras pequeas microceldas con condensador de haz.
 INSTRUMENTOS DE DETECCION: Absorben energa de los fotones que chocan
contra el y la convierte en una cantidad demorada como en una placa
fotogrfica, o cambios trmicos.

REQUERIMIENTOS DE UN DETECTOR:
1. Alta sensibilidad con un nivel de ruido pequeo para poder detectar
poderes radiantes pequeos.
2. Tiempo de respuesta pequeo.
3. Estabilidad a largo plazo, para asegurar la exactitud de la respuesta
cuantitativa.
4. Seal electrnica que sea fcilmente amplificada por cualquier
instrumento de lectura.
Instrumentos para la ESPECTROFOTOMETRIA

Los aparatos que se emplean en la emisin y en la absorcin son los

espectrmetros o fotmetro, los componentes bsicos de los espectrmetros
son:
1. Fuentes estables de energa.
2. Monocromadores para desdoblar la radiacin en las longitudes de onda.
3. Recipiente transparente para la muestra.
4. Medidor o registrador.

FUENTE DE ENERGIA: Tiene una sustancia que excita una energa elevada atraves
de una descarga elctrica y cuando regresa a su energa fundamental emite
fotones que corresponden al incremento en la energa igual a la diferencia entre
el estado excitado y el de menor energa.
 TIPOS DE FUENTES:

FUENTES DE RADIACION ULTRAVIOLETA: Estas son lmparas de hidrogeno o

dauterio la cual se compone de una par de electrodos dentro de un tubo de
vidrio y una ventana de cuarzo lleno de hidrogeno o deuterio a baja presin.
Aqu los electrones regresan a su estado fundamental que emiten una radiacin
continua en la regin entre 180 y 350.

FUENTES DE RADIACION VISIBLE: Son lmparas de tugsteno donde el filamento

se calienta con CC o una batera de un acumulador la cual emite una radiacin
continua de 350 a 2500m.

FUENTES DE RADIACION INFRARROJO: Son las lmparas de Nerst y las lmparas

Globar. Las lmparas de Nerst tienen un electrn hueco Zirconio de vidrio se
calienta a 1500 C con corriente elctrica emite una radiacin entre 0.4 y 20,
esta no es una fuente constante. Las lmparas Globar estn formadas por un
electrodo de carburo de silicio el cual se calienta a una temperatura de 1200 C
y emite una radiacin de 1 a 40, esta es una fuente constante.
 MONOCROMADORES: Ya que las fuentes emiten radiacin continua los
Monocromadores van a desdoblar las longitudes de onda que la forman separando
las bandas de longitud de onda muy angostas. Las ventajas de las longitudes de
onda de bandas angostas son:
1. Resolucin de absorcin muy prximas.
2. Un pico se puede medir perfectamente en su mximo de absorcin aumentando
la sensibilidad.
3. La absorcin se apega mas a la ley de Beer y mide solamente la radiacin que se
absorbe.
Las partes que constituyen al monocromador son:
1. Rendija de entrada donde entra la radiacin policromatica de la fuente.
2. Espejo.
3. Dispersor o prisma.
4. Lente de enfoque.
5. Rendija de salida.
El tomo y la Espectroscopia Atmica.
La ciencia de espectroscopia de absorcin atmica ha producido tres tcnicas
de uso analtico: la emisin, la absorcin y la fluoroscencia.
Con el objeto de entender la interrelacin entre estas tcnicas, se hace
necesario tener un conocimiento del tomo y de los procesos atmicos
involucrados en cada una de estas tcnicas.

El tomo esta, de hecho, constituido por un ncleo rodeado por electrones.

Cada elemento tiene un numero especifico de electrones que esta directamente
relacionado con el ncleo atmico y que conjuntamente con el, da una
estructura orbital, que es nica para cada elemento.

Los electrones ocupan posiciones orbitales en una forma predecible y ordenada.

La configuracin mas estable y de mas bajo contenido energtico, es conocida
como estado fundamental y es la configuracin orbital normal para el tomo.
 Si a un tomo se plica energa de una magnitud apropiada, esta ser
absorbida por el e inducir que el electrn exterior sea promovido a un
orbital menos estable o estado excitado. Como este estado es inestable, el
tomo inmediata y espontneamente retornara a su configuracin
fundamental.
El electrn por lo tanto retornara a su orbital inicial estable y emitir energa
radiante equivalente a la cantidad de energa inicialmente absorbida en el
proceso de excitacin.
 La intensidad de la fluorescencia se incrementa conforme se incrementa la
concentracin de los tomos.
El detector lumnico cuantifica solo la fluoroescencia que sucede en la llama
y no la luz de la lmpara.
Son mas brillantes las lmparas para la fluorescencia atmica que las
utilizadas para la absorcin atmica.
La tcnica de la Absorcin Atmica es la mas aplicada de las tres tcnicas.
 cantidad de luz absorbida se determina por comparar la intensidad de luz
La
final a la intensidad de luz inicial.

Existen distintos trminos para definir la cantidad de luz absorbida.

1. Transmitancia.
2. Absorcin.
3. Absorbancia.

La absorbancia caracteriza la absorcin de luz en la espectrofotometra de

absorcin, puesto que esta cantidad guarda una relacin lineal con la
concentracin. La ley de Beer define esta relacin A=abc. Donde la
absorbancia es directamente proporcional a la concentracin de las especies
absorbentes para unas condiciones instrumentales usadas.
Espectrometra de Absorcin
Lmpara de Ctodo Hueco
El ctodo de la lmpara es un cilindro hueco, cuyo espectro debe producirse.
El nodo y el ctodo se encuentran en un cilindro de vidrio sellado y lleno de
nen o argn.
El extremo del cilindro se ha fundido una ventana transparente a la radiacin
emitida.
Procesos de la Lmpara de Huecos
Lmpara de Descarga sin Electrodos
En la sig. Figura tenemos la lmpara de descarga sin electrodos, una pequea
cantidad del elemento o sal del elemento para el cual se usara la lmpara, se
encuentra sellada en el interior de un bulbo de cuarzo; este bulbo es
colocado en el interior de un cilindro cermico sobre el cual se enrolla la
antena de un generador de radiofrecuencia cuando se aplica un campo RF de
suficiente potencia la energa asociada vaporiza y excitara los tomos en el
interior del bulbo emitiendo su espectro caracterstico.
 Las lmparas de descarga sin electrodo ofrecen las ventajas analticas de
mejor precisin mas bajo limite de deteccin. Adems de ofrecer rendimiento
superior, la vida til de una LDE para el mismo elemento excede a la de la
lmpara de ctodo hueco. Se dispone de lmparas de descargas sin electrodos
para los siguientes elementos.

ELEMENTOS
Antimonio
Arsnico
Bismuto
Cadmio
Cesio ELEMENTOS
Germanio Seleno
Plomo Telurio
Mercurio Talio
Fosforo Estao
Potasio Zinc
Rubidio Titanio
Monocromador

Un cuidado especial se debe tomar en el rea del monocromador del sistema

ptico para evitar excesiva perdida de luz. La dispersin de las longitudes de
onda se logra por medio de una red o superficie reflectiva rallada por muchas
lneas finas paralelas muy cercanas unas de otras.
La reflexin en esta superficie rallada genera un fenmeno de interferencia
conocida como difraccin, en el cual diferentes longitudes de onda divergen
de la red con diferentes ngulos.
 En la sig. Figura se muestra un monocromador tpico. La luz de la fuente
entra al monocromador por la apertura espectral de entrada y es dirigida
hacia la red de difraccin en donde tiene lugar la dispersin. Las longitudes
de onda divergentes son dirigidas hacia la apertura espectral de salida.
 El ngulo de dispersin en la red de difraccin se puede controlar por la
densidad de rallado de las lneas de la rejilla. Alta dispersin va a resultar de
una densidad alta de lnea. Para una buena resolucin (separacin clara de
lneas) es necesario que la apertura de entrada y salida sea del mismo
tamao.
 Monocromadores de alta dispersin permite el uso de aperturas especiales
mas amplias, lo cual le permite un uso mayor de aparatos disponible de la
lmpara.

Otro factor que afecta la eficiencia ptica del monocromador es el ngulo con
que fue cortada la red. En la sig. Figura aparece una ilustracin de este
ngulo. El rallado de la red hace unas ranuras en forma de V y grabados sobre
la superficie de la red.
Temperaturas adiabticas de la flama y
velocidades de quemado de las flamas
Premezcla, las mas comunes
 Los requisitos necesarios de la flama:
Temperatura apropiada es decir proporcin adecuada de combustible y
oxidante
El espectro de la propia flama no intervenga con la observacin de la
caracterstica de emisin que se este midiendo
Los componentes de la llama tambin limitan el intervalo til de longitudes
de onda mayores de 2100 Amstrongs.
Para lograr un equilibrio de los gases debe haber un numero suficiente do
colisiones entre las partculas del sistema, (vibracin 105; excitacin y
disociacin 107; ionizacin 109
Velocidades de flama:
- oxigeno-acetileno 1200 cm/seg
- aire acetileno 160 a 460 cm/seg
 A menor velocidad hay una mayor sensibilidad pues hay mas tiempo
de residencia

APLICACIONES

Flama DE AIRE COMBUSTIBLE

principalmente para metales alcalinos y alcalinoferreos

Flamas MAS CALIENTES

Para elementos que forman compuestos refractarios o cuya volatilizacin es
inhibida por elementos concomitantes en la solucin.
 Interferencia de Matriz
El primer lugar del proceso de la llama sujeto a interferencia es
la nebulizacin. Si la muestra es ms viscosa o tiene una tensin
superficial caracterstica considerablemente diferente a la de
los patrones, la velocidad de aspiracin de la muestra o la
eficiencia de nebulizacin pueden ser diferentes entre las
muestras y los patrones. Si las muestras y los patrones no son
introducidos en el proceso a la misma velocidad, es obvio que el
numero de tomos en el rayo de luz y por consiguiente, la
absorbancia no correlacionar entre los dos Existir entonces
una interferencia generada por la matriz.
Un ejemplo de este tipo de interferencia es el efecto de la
concentracin del cido sobre la absorbancia. Se puede ver en
la Fig. 3.2 que conforme se incrementa la concentracin del
cido fosfrico, la viscosidad incrementa, disminuyendo la
velocidad de aspiracin y se reduce la absorbancia de la
muestra Altas concentraciones del cido o slidos disueltos
producirn un error negativo si es que no sabemos reconocerlos
a tiempo. Las interferencias de la matriz tambin pueden
producir un error positivo. La presencia de un solvente orgnico
en una muestra producir un mejoramiento de la eficiencia de
nebulizacin, lo que resulta en un incremento de la absorcin
Una forma de compensar este tipo de interferencia es la de
asemejar lo mas que sea posible los componentes mayores de la
matriz en los patrones y muestras Algn cido o cualquier otro
reactivo, aadidos a la muestra durante su preparacin,
deberan ser aadidos a los patrones en las mismas
 Interferencia por Ionizacin

Hay una tercera interferencia mayor, la cual a menudo se encuentra en llamas

calientes. Como se ilustra en la Fig. 3.1 el proceso de la disociacin no termina
necesariamente en el tomo en estado fundamental. Si se aplica energa
adicional, el tomo al estado fundamental puede ser trmicamente elevado al
estado excitado o si la energa termal es suficiente, el electrn puede ser
completamente removido del tomo originando un ion. Como estos rearreglos
electrnicos disminuyen el nmero de tomos disponibles en estado fundamental
para absorcin de luz. Se reducir la absorcin atmica a la longitud de onda de
resonancia. Cuando un exceso de energa destruye el tomo en estado
fundamental, existe una interferencia por ionizacin.
Se puede eliminar la interferencia por ionizacin aadiendo un exceso de un
elemento que sea muy fcil de ionizar, lo que originara un gran nmero de
electrones libres en la llama y que a su vez eliminara la ionizacin del analito.
Comnmente se emplean el sodio o el potasio como supresores de ionizacin. La
Fig. 3 4 muestra la eliminacin de la ionizacin en la determinacin de bario en
una llama de xido nitroso-acetileno. El incremento en absorcin en la lnea de
resonancia para el barrio y el decrecimiento correspondiente en la absorcin en
la lnea del ion bario, como una funcin del potasio aadido, ilustra el
mejoramiento de las especies en estado fundamental, conforme se suprime la
forma inica Los efectos de la ionizacin pueden ser eliminados por la adicin de
2000 g/mi a 5000 g/ml de potasio a todas las soluciones patrn y muestras.
ESPECTOFOTOMETROS

Hoy en da existen numerosos espectrofotmetros comerciales. Algunos se han diseado

solo para la regin visible; otros se aplican para regiones ultravioleta y visible.
Espectrofotmetro spectronic 20, se emplea una fuente de luz de filamento de
tungsteno, la cual funciona mediante una fuente de alimentacin estabilizada que
proporciona radiacin de intensidad constante. Despus de la direccin es una sencilla
red de reflexin, la radicacin pasa a travs de la cubeta de la
muestra o de referencia hacia el fototubo.
La seal elctrica del detector amplificador, acciona el medidor a una escala r.de 14
cm, calibrada en transmitancia y absorbancia. Est dotado por un obturador consiste en
una placa que se coloca en forma automtica entre el haz y el detector, siempre que la
cubeta se retira del portacubetas, entonces se realiza el ajuste al 0 % de T. El
dispositivo de control de la luz mostrado en la figura siguiente consiste en una ranura en
forma de V, que puede moverse hacia adentro y hacia fuera del haz, para colocar el
medidor al 100%.
Tipos generales de instrumentos de
mediciones de absorcin molecular

La siguiente figura nos muestra el instrumento de un solo haz. El selector de

longitud de onda es o un filtro o un monocromador. La determinacin de la
transmitancia supone tres etapas sucesivas separadas en el tiempo.
1. Ajuste al 0% de T colocando el obturador en posicin.
2. Ajuste al 100% de T con el disolvente en la trayectoria de la luz.
3. Medicin del % de T con la muestra colocada

Este tipo de instrumento
requiere que la fuente y el
sistemaelectrnicoPresenten
un comportamiento constante
durante el tiempo necesario
para completar las tres
etapas.
Fotmetros de un Haz y de doble Haz
De emisin de flama

Una tcnica muy conocida por los qumicos clnicos es la espectrofotometra de

emisin de flama llamada comnmente fotometra de flama.
Fundamentalmente es muy similar a la espectroscopia de emisin. No
obstante, la fuente de energa de excitacin es una flama. Esta es una fuente
de energa muy inferior y por tanto el espectro de emisin es ms sencillo y
con menos lneas adems, la muestra se introduce a la flama en forma de
solucin, y por tanto la tcnica es muy fcil de cuantificar.
Al poner la muestra en la flama en forma evaporada los tomos absorben
energa de la flama y pasan a un estado electrnico excitado. Al regresar al
estado basal los tomos excitados emiten fotones.
Pero como la flama es de temperatura baja solo una pequea fraccin del total
de los elementos se excita y pocos se determinan, Con flamas de oxi acetileno
si es posible determinar mas elementos.
 El funcionamiento de un fotmetro de flama resulta obvio al analizar la Fig.1,
que muestra esquemticamente sus principales componentes. La solucin
problema; es succionada por un atomizador que utiliza un combustible
gaseoso y se alimenta a la llama en forma de un roco fino. La luz emitida se
colecta por medio de un espejo parablico y un lente, y se hace pasar por un
monocromador (prisma o red) o simplemente a travs de un filtro. La luz de
la longitud de onda apropiada incide en un fotodetector y el medidor seala
la magnitud de la seal elctrica. Adems de las llamas d aire y gas natural
(I900C) se emplean otras de mayor temperatura, tales como gas-oxigeno
(2800C), hidrgeno-oxgeno (2800C) y acetileno-oxgeno (3000C).

Figura 1. Diagrama esquemtico de los componentes

de un fotmetro de emisin de flama.
Figura. Detalles del sistema ptico de Fluorometro Turner modelo 110.
 El siguiente instrumento es de un espectrofotmetro mas sofisticado de dos
canales con registrador y que utilizan una red plana de 45 x 45 mm con 1440
lneas/mm. Su intervalo va de 190 a 750 nm y puede ampliarse hasta 900 nm.
Intercambiando su rendimiento se puede escoger anchuras de banda de 0,2,
0.5, 1.0 y 3.00 nm. El instrumento tiene una exactitud fotomtrica de 0.003
A, su radiacin parsita a 220 a 340 nm es menor 0.1% de Po.
Figura. Esquema de un dispositivo para alternativamente excitar y observar
la fosforescencia.
Determinacin Fluorimetrica de especies
inorgnicas

Los mtodos inorgnicos fluorimtricos son de dos tipos. Los mtodos directos
que implican la formacin de un quelato fluorescente y la medida de su
emisin y un segundo grupo que se basa en la disminucin de la fluorescencia
que resulta de la accin atenuadora de la sustancia que va a ser determinada.
La ltima tcnica ha sido ms ampliamente utilizada en la determinacin de
aniones.
Cationes que forman quetalos
fluorescentes
Existen dos factores que limitan mucho el nmero de iones de metales de
transicin que forman quelatos fluorescentes. En primer lugar, muchos de
estos iones son paramagnticos, esta propiedad aumenta la velocidad de
cruzamiento entre sistemas al estado triplete y, por tanto la desactivacin por
fluorescencia es poco probable, si bien puede observarse fosforescencia. Un
segundo factor es que los complejos de los metales de transicin estn
caracterizados por muchos niveles de energa poco espaciados que exaltan la
probabilidad de desactivacin por conversin interna. Los iones de los metales
que no son de transicin son menos susceptibles a los procesos de
desactivacin anteriores y es para estos elementos, para los que se han
desarrollado las principales aplicaciones inorgnicas de la fluorimetra. Hay
que sealar que los cationes de os metales que no son de transicin son
generalmente incoloros y tienden a formar quelatos que tambin los son. Por
ello, la fluorimetra a menudo complementa a la espectrofotometra.
FLURESCENCIA

FOSFORECENCIA

FLUORESCENCIA ATOMICA

FLUORESCENCIA MOLECULAR
ESQUEMA DE LA ABSORCION, LA EMISION Y DE LA FLUORESCENCIA ATOMICA
DIAGRAMA DE ENERGIA PARA LA FLUORESCENCIA ATOMICA
COMPONENTES DE UN INSTRUMENTO PARA FLUORESCENCIA
DIGRAMA DE ENERGIA PARA LA FLUORESCENCIA
DIAGRAMA DE BLOQUES DE UN FLUOROMETRO
 Espectro de emisin del
fosforo empleado en lmparas
fluorescentes.

LAMPARA FLUORESCENTE
DIAGRAMA DE BLOQUES DE UN ESPECTROFOTOMETRO DE FLUORESCENCIA
APLICACIONES
Los mtodos de fluorescencia son muy prometedores para la determinacin
de varios hidrocarburos aromticos poLiciclidos que la Enviromental
Protection Agency (Agencia de Proteccin Ambiental) ha clasificado como
"contaminantes prioritarios"

Determinacin de la secuencia
de nucletidos en el DNA con
marcas Fluorescentes
Algunos compuestos que
presentan Fluorescencia til en
qumica analtica
Espectrometra de Masas
Espectro: Conjunto de las lneas resultantes de la descomposicin de una luz
compleja.
La espectrometra de masas (EM) es un mtodo de separacin y medida de masas de
partculas a escala molecular con fines analticos. La espectrometra de masas
permite la determinacin de la pureza de una muestra y el anlisis cualitativo y
cuantitativo de mezclas. Esta tcnica es de una elevada sensibilidad pudiendo
utilizarse para la deteccin de pequeas cantidades de determinados compuestos
en mezclas complejas (pruebas antidoping, anlisis de contaminacin ambiental).
Es espectro de masas se da cuando suministrarnos energa superior a la necesaria
para la ionizacin a un conjunto de molculas. Los iones obtenidos inicialmente
(que en general son los iones moleculares, M+) se pueden fragmentar por ruptura de
alguno de sus enlaces produciendo un buen nmero de iones secundarios. La mezcla
de iones resultante es separada en un analizador segn sus relaciones masa/carga.
 Las trayectorias de los iones son fcilmente controladas
mediante la aplicacin de campos elctricos y magnticos
permitiendo una separacin de las especies de acuerdo con
sus relaciones masa/carga Con el fin de evitar
interacciones entre las partculas se mantiene en los
espectrmetros de masas un alto vaco de forma tal que el
recorrido libre medio de las mismas sea superior a las
dimensiones del instrumento.
La fragmentacin de los iones moleculares M + en los iones
fragmento (m1+, m2+, m3+ ...) est relacionada con la
estructura molecular Una informacin importante que
suministra el espectro de masas es la masa molecular
relativa El proceso primario que ocurre en el espectro es la
ionizacin de las molculas Fig. 1

Figura 1. Obtencin de un espectro de masas

Espectrometra de Masas

Espectro: Conjunto de lneas resultantes de la descomposicin de una luz

compleja.
La espectrometra de masas es un mtodo de separacin y medida de masas
de partculas a escala molecular con fines analticos.
De elevada sensibilidad, pudiendo utilizarse para la deteccin de pequeas
cantidades de determinados compuestos en mezclas complejas.
Permite la determinacin de la pureza de una muestra y el anlisis cualitativo
y cuantitativo de mezclas.
La espectrometra de masas se desarrolla sobre la base del anlisis de los
iones positivos.
Descripcin de los componentes del instrumento.

SISTEMADEENTRADADEMUESTRAS.

Elobjetivodelsistemadeentradaesel
de introducir una pequea cantidad de
muestra en el espectrmetro de masas,
donde sus componentes se convierten en
ionesgaseosos.

En general existen tres tipos de
entradas:

*SistemasDiscretosdeEntrada.
*SistemasdeEntradaporsondadirecta.
*Sistemasdeentradacromatogrficos.
Figura a. Esquema de un sistema de introduccin de muestra
externo.
Figura b. Sonda para introducir una muestra en la fuente de
iones.
SISTEMAS DE ENTRADA DE MUESTRAS

La finalidad del sistema de entrada es la introduccin de una muestra representativa

en la fuente de iones con la mnima prdida de vaco.
Los tres tipos de entradas capaces de acomodar diversos tipos de muestras son:
Sistemas Discretos De Entrada. En el cual la muestra se volatiliza externamente y se
introduce en la regin de ionizacin que est a baja presin. Se usa para muestras
gaseosas y lquidas con puntos de ebullicin de hasta 500C. Para muestras gaseosas
un pequeo volumen medido de gas se recoge entre dos vlvulas colocadas en el rea
de medicin y entonces se expande en un recipiente contenedor. Para los lquidos se
introduce en un contenedor una cantidad pequea de la nuestra, normalmente con
una jeringa de microlitros. En ambos casos, el sistema de vaco se usa para alcanzar
una presin de muestra de 10-4 torr a 10-5 torr. Para muestras con puntos de ebullicin
mayores a 150C, los contenedores y los tubos se deben mantener a temperatura
elevada mediante un horno y unas cintas de calentamiento La temperatura mxima
del horno es de 350C. Este mximo limita al equipo a 500C.
 La muestra una vez, en fase gas; entra en el rea de ionizacin del espectrmetro a travs de
un diafragma de metal o de vidrio que contiene uno o varios pequeos orificios Ei sistema ce
entrada es normalmente de vidrio para evitar prdidas de analitos polares por adsorcin
Fig. a. Entrada Por Sonda directa Para lquidos y slidos no voltiles, se puede introducir a la
regin de ionizacin mediante un soporte de muestra o sonda, el cual se inserta a travs de
una cmara intermedia de vaco. La cmara intermedia est diseada para limitar el volumen
de aire que puede entrar en la regin de ionizacin durante la insercin de la sonda. La sonda
se utiliza tambin cuando la cantidad da muestra es limitada, debido a que se pierde menos
muestra que con el sistema discreto En una sonda la nuestra se pone generalmente en la
superficie de un vidrio o en un tubo capilar de aluminio, un alambre fino o una copa pequea y
la sonda se coloca a unos pocos milmetros de la fuente de ionizacin y de la rendija que
conduce al espectrmetro. Normalmente la colocacin de la muestra se hace tanto calentando
como enfriando. La baja presin del crea de ionizacin y la proximidad de la muestra a la
fuente de ionizacin a menudo hace posible la obtencin de espectros de compuestos
inestables trmicamente antes de que se descompongan. La baja presin proporciona tambin
una mayor concentracin de compuestos relativamente no voltiles en el rea de ionizacin,
de nodo que, la sonda permite el estudio de materiales no voltiles tales como carbohidratos,
esteroides, especies organometlicas y sustancias polimricas de bajo peso molecular, Fig. b.
Fuentes de ionizacin
La ionizacin se lleva a cabo por energa trmica o elctrica.

Se clasifican en duras y blandas, y estn en funcin de la energa en exceso que

posea el ion molecular (M+)
Las formas de suministrar energa son:
- Impacto de electrones (el mas usado).
- Foto ionizacin (UV).
- Por laser.
- Por descarga elctrica (chispa).
- Por accin del campo elctrico.
- Por desorcin activada por campo elctrico.
- Qumica.
- Por bombardeo con tomos rpidos.
- Por desorcin activada por plasma.
- a presin atmosfrica.
- Trmica
Caractersticas por Impacto de Electrones
Los iones moleculares se forman por impacto con electrones de alta energa.

Se puede variar la energa de los electrones ionizantes obtenindose un EM

(espectrmetro molecular) con baja sensibilidad (12-15 eV).

La ionizacin ocurre en especies moleculares en fase gaseosa, por lo tanto no

pueden obtenerse EM de muestras poco voltiles que no soporten el
calentamiento para elevar su presin de vapor.
Fotoionizacin

La ionizacin de las molculas requiere energas del orden de 10 eV que

corresponden a fotones de longitud de onda de 124 nm.
Se han desarrollado fuentes de ionizacin que utilizan radicaciones UV de alta
energa. La eficiencia de la ionizacin es del orden de 1/10 6, comparable a
las fuentes El. Esta tcnica es blanda predominando en el em el ion
molecular. Dado el control que puede ejercerse sobre la energa de los
fotones (haz monocromtico) pueden determinarse potenciales de ionizacin
con gran precisin.
Ionizacin por laser

Es una fuente monocromtica, de elevada intensidad (10 7 - 1011 w cm-2) se

utiliza en forma creciente en especial para el anlisis de pequeas secciones.
El haz de un lser puede concentrarse en una pequea regin de la muestra (
1x 10 _ 6 m ) y producir la ionizacin. Este tipo de fuente se combina con
frecuencia con analizadores de tiempo de vuelo.
Ionizacin por descarga elctrica

Esta tcnica se utiliza fundamentalmente para el anlisis de muestras

orgnicas y consiste en la aplicacin de una descarga elctrica entre dos
electrodos, uno de los cuales contiene la muestra La elevada energa produce
atomizacin de las muestras con la formacin de numerosas especies
multicargadas.
Ionizacin por bombardeo con tomos
rpidos
Si se hacen incidir tomos con elevada energa cintica (8 K eV) sobre una
superficie, estos dispersan hacia la fase gaseosa un gran nmero de partculas
neutras e inicas. (El bombardeo con iones no resulta til pues se carga
rpidamente el portador) En la Fig. siguiente se muestra esquemticamente
este equipo
Los diferentes analizadores son:
Analizador magntico.
Analizador electrosttico.
Filtros de masas de cudruplo.
Analizador de tiempo vuelo.
Analizador cicloidal.
De doble enfoque.
Analizadores de trampa de iones.
De transformada de Fourier.
Computarizados.
DETECTOR O COLECTOR. EL detector convierte el haz de iones en una seal elctrica que
puede ser procesada, almacenada y registrada.
TIPOS: "Multiplicadores de electrones" y "La copa de Faraday".
Parmetros de Eficiencia de un EM

Poder de resolucin. Expresa la capacidad del equipo para diferenciar dos

iones de relaciones masa/carga cercanas. Puede incrementarse usando
magnetos de mayores dimensiones.

Sensibilidad. Expresa la capacidad para detectar seales correspondientes a

un ion. Depende del compuesto seleccionado y de las caractersticas
constructivas del equipo.

Alcance de masas. Expresa el valor mximo de la relacin masa/carga

susceptible de ser detectado en un espectrmetro de masas.
La copa de Faraday
 El detector est alineado de manera que los iones que salen al analizador alcanzan el electrodo
colector. Este electrodo est rodeado de una jaula que evita el escape de los iones reflejados y de
los electrones secndanos expulsados El electrodo colector est inclinado respecto a la trayectoria
de los iones que entran por lo que las partculas que alcanzan o dejan el electrodo son reflejadas a
zonas alejadas de la entrada de la copa. El electrodo colector y la jaula estn conectados al
potencial base a travs de una resistencia elevada. La carga de los iones positivos que alcanzan la
placa es neutralizada por un flujo de electrones a travs de la resistencia y H potencial resultante
que cae a travs de la resistencia se amplifica con un amplificador de alta impedancia La respuesta
de este colector es independiente de la energa, de la masa y de la naturaleza qumica del ion. La
copa de Faraday es barata y simple su principal desventaja es que necesita un amplificador de alta
impedancia, el cual limita la velocidad a la dual puede ser bamdo el espectro
Parmetros que caracterizan la eficiencia
de un espectrmetro de masas
Los tres parmetros que permiten evaluar la calidad de un EM son los
siguientes:
Poder de resolucin Este parmetro expresa la capacidad del equipo para
diferenciar 2 iones de relaciones masa/carga cercanas
Para los analizadores magnticos depende esencialmente de la
monoenergeticidad del haz inico. Puede incrementarse utilizando magnetos
de mayores dimensiones.
Sensibilidad. Este parmetro nos expresa la capacidad del equipo para
detectar las seales correspondientes a un ion. Se define como la relacin en
de la corriente inica () y la presin de la muestra (p)

Esquema de un espectrmetro de sector magntico
Aplicaciones

Identificacin de compuestos puros por espectrometra de masas.

El espectro de masas de un compuesto puro proporciona diversos tipos de datos que son tiles
para su identificacin. E! primero es el peso molecular del compuesto y el segundo es su frmula.
Adems, el estudio de los modelos de fragmentacin que se pone de manifiesto en el espectro de
masas a menudo proporciona informacin sobre la presencia de varios grupos funcionales.

Determinacin del peso molecular. Para aquellos compuestos que pueden ionizarse por uno de
los mtodos descritos anteriormente, dando el ion molecular o un ion molecular protonado. El
espectrmetro de masas es una buena herramienta inseparable para la determinacin del
peso molecular. La localizacin del pico molecular en la abscisa da entonces el peso molecular
con una buena precisin que no puede alcanzarse por ningn otro mtodo.

Determinacin de frmulas moleculares. Las formulas moleculares se pueden determinar a

partir del espectro de masas de un compuesto, siempre que el pico del ion molecular pueda
ser identificado y su masa exacta determinada.
Utilizacin de los Bancos Espectros

Los bancos de datos de espectros, almacenados en le memoria externa de la

computadora (discos, cintas magnticas, etc.) son en la actualidad
ampliamente utilizados, no solo en Espectrometra de Mesas, sino tambin en
las restantes tcnicas espectroscpica, y son de gran utilidad para
caracterizar de forma rpida y eficiente, compuestos orgnicos con
estructuras muy complejas, y Su principio se basa en la comparacin (da
forma automtica y a gran velocidad) del espectro obtenido para un
Compuesto desconocido, con los espectros almacenados y la seleccin de
aquellos que mayor similitud presentan con l. Esto permite en algunos casos
determinar rpidamente la estructura del compuesto analizado, y en otras
aproximarse a su estructura por comparacin con espectros semejantes de
compuestos conocidos.
 Cuando se va a establecer la comparacin entre los espectros de masas, deben
tenerse en cuenta los factores que pueden afectar el nmero de seales en el
espectro o su intensidad. Entre ellos se encuentran los siguientes:

- Tipo de fuente de ionizacin utilizada, pues como ya se ha sealado anteriormente, al

variar la misma cambia apreciablemente la apariencia del espectro.
- Condiciones de trabajo en la fuente de ionizacin, tales como la temperatura, voltaje
de ionizacin, etc.
- Tipo de analizador con que cuenta el equipo
- Concentracin de la muestra (presin).
- Sistema de introduccin utilizado (directo o indirecto).
- Limpieza de la fuente (que afecta fundamentalmente el fondo espectral) y ajuste de
la ptica inica, etc.
Ventajas y limitaciones de la tcnica combinada
cromatografa gaseosa-espectrometra de masas

Ventajas:
- Las muestras no necesitan ser aisladas o purificadas antes del anlisis. De hecho el
tratamiento previo de las mismas es mnimo.
- Admite cualquier tipo de muestra mientras esta se pueda volatizar.
- Permite el estudio de sustancias que se descomponen fcilmente en contacto con
la atmosfera.
- Es una tcnica muy sensible y rpida en extremo. Permite trabajar con fracciones
del orden de microgramos y solo son necesarios algunos minutos para obtener la
informacin.
- Permite la determinacin de la estructura de los compuestos presentes en una
mezcla, aun cuando los mismos no hayan sido totalmente separados por la columna
cromatografa o se encuentren como trazas.
 Limitaciones:
- La seleccin del gas portador en el cromatgrafo gaseoso en la mayora da los casos se
limita al helio.
- Requiere barridos rpidos da campo magnatico para evitar que se superpongan los
eluatos lo qua impide utilizar la tcnica da alta resolucin en la obtencin de los
espectros de masas.
- No siempre es posible la identificacin da todos los compuestos y es necesario acudir a
otras tcnicas, tales como la comparacin contra patroneas, la cromatografa
preparativa, etc
- La apariencia do los espectros depende del barrido de campo y de la regin del pico
cromatogrfico en que se obtenga, pueden obtenerse espectros distorsionados.
- El empleo de poca cantidad de muestra y/o inestabilidad de los compuestos analizados
pueden producir espectros truncos.
- El costo de loa equipos y su mantenimiento son bastante elevados.