UNIDAD 2.

MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Prof. Lenin Gonzlez-Paz, Lcdo-Tec.Farm

Laboratorio de Gentica y Biologa Molecular, FEC-LUZ.
Unidad Acadmica de Biologa Celular y Molecular,
Departamento de Biologa, FEC-LUZ-
Coordinador de la U.C. Biotecnologa
Investigador PEII-Nivel B / MPPEUCT
Miembro de la SVM, SAM y REDIELUZ
Asesor Cientfico de Biosyntech pharma
y Laboratorios Medical Orbe
 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Los virus poseen una clasificacin que los agrupa en los niveles
taxonmicos segn lo establece el Comit Internacional de Taxonoma de
Virus (ICTV, por el acrnimo en ingls), esta junta internacional presento
en el ao 2013, en lo que ha sido hasta ahora su ms reciente reporte,
un catlogo constituido por:

7 ordenes,

103 familias,

22 subfamilias,

455 gneros y

2827 especies

ICTV website (http://www.ictvonline.org)

King y col., 2012; Mateu, 2013
 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

El Comit Internacional de Taxonoma de Virus hasta ahora

autoriza solo dos sistemas taxonmicos de clasificacin viral:

a) La clasificacin
Baltimore, propuesta
por David Baltimore,
laureado con el premio
Nobel de Medicina en
1975, basada en el tipo
de cido nucleico de
los virus (DNA o RNA) y
su modo de expresin
gnica. (ver tabla 1 y
figura 1)

King y col., 2012; Mateu, 2013

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

b) La clasificacin propuesta por la propia ICTV, utiliza un mtodo

bastante similar a la disposicin convencional que se emplea para la clasificacin
taxonmica de los seres vivos y agrupan a los virus por orden, familia,
subfamilia, gnero y especie (ver tabla 2). Para lo cual toma en cuenta
caractersticas morfolgicas, estructurales, los genomas, multiplicacin, protenas
vricas, propiedades clnicas e inmunolgicas.

Segn los datos de la ICTV, los rdenes mas importantes descritos son:
Caudovirales,
Herpesvirales,
Mononegavirales,
Nidovirales y
Picornavirales.

El comit no distingue formalmente entre subespecies, cepas y asilamientos,

y hasta ahora existen unos 3000 tipos de virus que an no han sido clasificados.

En la clasificacin de 2011 de la ICTV hay seis rdenes - Caudovirales,

Herpoesvirales, Mononegavirales, Nidovirales, Picornavirales y Tymovirales.

Se ha propuesto el sptimo Ligamenvirales. Pero la definicin de los rdenes

es muy reciente y ha sido lento su establecimiento y aceptacin, incluso se
debate la aceptacin de solo de tres rdenes.
King y col., 2012; Mateu, 2013
 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Jorgensen y col., 2015

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Jorgensen y col., 2015

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Sin embargo la taxonoma de virus segn la ICTV es por ende similar

a la de los organismos celulares manejando:

Orden (-virales),
Familia (-viridae),
Subfamilia (-virinae),
Gnero (-virus) y
Especies (los nombres de las
especies, en general, toman la
forma de virus (enfermedad).

Por lo que normalmente para la definicin de las especies se suelen

denominar usando animales y plantas por el nombre de la enfermedad
que producen (p. ej. virus herpes humano tipo 2), y los que infectan
a bacterias con nombres alfanumricos (X174, T4, etc.).

A veces se puede referir a los grupos, de manera informal, sin

subrayar y sin poner en cursiva. Es muy frecuente referirse a las
familias terminando en -virus (p.ej. herpesvirus, poxvirus). La
desventaja es que puede llevar a equvocos por no poder diferenciar
entre familia y gnero. King y col., 2012; Mateu, 2013
 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

El cdigo de nomenclatura gestionado por el Comit Internacional de

Taxonoma de Virus difiere de otros por muchos aspectos.
Esencialmente, los nombres de los rdenes y las familias se ponen
en itlica y los de las especies no siguen la nomenclatura binomial
salvo bajo la forma de: [Virus] de la
[enfermedad].

King y col., 2012; Mateu, 2013

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Estos dos mtodos de clasificacin no son antagnicos, y

pueden integrarse totalmente entre s, pues la clasificacin del ICTV
incluye algunos criterios de la clasificacin de Baltimore.

De hecho
actualmente se utilizan
juntos la ICTV y la
clasificacin de
Baltimore, en una nica
clasificacin que parte
de los grupos propuestos
por Baltimore basados
en el tipo de cido
nucleico de los virus
(DNA o RNA) y su modo
de expresin gnica, y
que se engrana con la
clasificacin taxonmica
de la ICTV (ver figura 2 y
3).

King y col., 2012; Mateu, 2013

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Jorgensen y col., 2015

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Actualmente, el tipo ms comn de VECTORES utilizados son los virus,

que pueden ser genticamente alterados para dejar de ser
patgenos y portar genes de otros organismos. No obstante,
existen otros tipos de vectores de origen no vrico que tambin han sido
utilizados para ello. As mismo, el DNA puede ser introducido en el
paciente mediante mtodos fsicos (no biolgicos) como electroporacin,
biobalstica, entre otros.

Segundo y col., 2010

 Cont.
UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales
Cont.

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales
Cont.

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos

Al igual que los virus que infectan clulas eucariotas, los

bacterifagos estn constituidos por una cubierta proteica o
cpside en cuyo interior est contenido su material gentico,
que puede ser de 5000 a 500.000 pares de bases. El tamao de
los fagos oscila entre 20 y 200 nm aproximadamente.

Los bacterifagos, tambin denominados fagos, son virus

que infectan solamente a bacterias con una elevada
especificad de husped. Cada partcula fgica (virin)
contiene un genoma de cido nucleico (DNA o RNA) dentro de
una envoltura proteica o lipoproteca, denominada cpside. Este
conjunto es conocido como nucleocpside.

Guttman y col., 2005

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos (cont.)

La estructura de los fagos, es determinada por sus protenas de

envoltura (o protenas estructurales) cuya funcin principal es la de
proteger al material gentico fgico. Estas protenas pueden adems
proveer al fago de: cabeza, vaina, cuello, cola, fibras caudales,
laminas bsales y/o espculas. La forma en la que se arreglan las
protenas alrededor del material gentico del virus, define la
complejidad estructural y la forma del mismo, de tal modo que existen
fagos icosadricos (A), helicoidales o filamentosos (B).

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos (cont.)

Los fagos son la forma de vida ms abundante y

ubicua en la tierra, pues se calcula que debe haber cerca del
orden de 10^31 slo en el agua de mar; sin embargo, stos
han sido obtenidos tanto en aguas residuales como en muestras
de suelo, aislndose prcticamente de todos los ambientes
explorados en el planeta, jugando un rol determinante en el
balance de los ecosistemas bacterianos.

Su ubicuidad se debe a que los fagos proliferan en los

ambientes que colonizan sus huspedes bacterianos, porque
necesitan de su maquinaria celular para multiplicarse. Se han
identificado bacterifagos que infectan a ms de 144
gneros del dominio Bacteria y a unos 10 gneros del
dominio Archaea.

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Virus y fagos (cont.)

Segundo y col., 2010, Forterre, P. 2012

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Virus y fagos (cont.)

Segundo y col., 2010, Forterre, P. 2012

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos (cont.)

Los fagos fueron descubiertos de forma independiente en

1917 por dHerelle quien adems hizo grandes aportes al estudio
de estas formas de vida. dHerelle les dio el nombre de
bacterifagos por su capacidad de lisar bacterias (del griego
phagein: comer) y desde la dcada de 1930 han sido un
modelo para investigar aspectos de la Virologa, como la
estructura de los viriones, su morfognesis, gentica y
replicacin.

Adems, tambin han sido utilizados como modelo para el

estudio de la gentica bacteriana y de los mecanismos de
regulacin de la expresin gnica, debido a que sus
huspedes bacterianos son fcilmente cultivables y manejables
en el laboratorio.

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos (Taxonoma)

En el momento del
descubrimiento de los
bacterifagos, Felix dHrelle
crea que slo haba un nico
bacterifago (Bacteriophagum
instestinale) integrado por
muchas razas.

Actualmente se conocen
mas de 17 familias de
bacterifagos. Tres de ellas,
Myoviridae, Podoviridae y
Siphoviridae, conforman el
orden Caudovirales; mientras
que, las restantes no estn
asignadas a ningn Orden,
adems existen tres gneros
no clasificados en ninguna
familia. Segundo y col., 2010
 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos (Taxonoma)

En relacin a los morfotipos ms importantes las

investigaciones reflejan que mas del 96% de los fagos
estudiados hasta la actualidad presentan cola y estn
asignados al nico orden definido, el orden Caudovirales.

Los fagos de este orden se caracterizan por poseer DNA de

doble cadena, no tienen envoltura lipdica y presentan simetra
binaria, debido a la simetra cbica de sus cpsides y a la
simetra helicoidal de sus colas.

El orden Caudovirales est compuesto por:

-25% de fagos con cola larga y contrctil (familia Myoviridae),
-61% con cola larga no contrctil (familia Siphoviridae) y
-14% restante con cola corta y no contrctil (Podoviridae).

Segundo y col., 2010

 UNIDAD 2.
MODELOS CELULARES Sistemas Virales

Bacterifagos (Ciclo biolgico)

Los fagos pueden ser lticos, lo cual normalmente conlleva la

destruccin de la clula husped o atenuados. Estos ltimos,
adems de poder desarrollar un ciclo ltico, experimentan un
ciclo lisognico en el que el genoma del virus se integra en el
cromosoma bacteriano o se mantiene en el citoplasma celular en
un estado conocido como profago.

En el ciclo ltico, toda la maquinaria metablica de la bacteria

es secuestrada para replicar y transcribir el DNA fgico y formar
la nueva progenie. En trminos de terapia y desinfeccin con
fagos, es deseable que stos sean lticos para minimizar al
mximo la posible transduccin de genes..

Segundo y col., 2010

 MODELO MICROBIANO BASADO EN LISIS ESPECFICA BACTERIOFAGICA PARA LA
EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD ANTIVIRAL DE INHIBIDORES LSD1/KDM1A
Gonzlez Paz, L.1, Villasmil Monsalve, A.4, Lossada Gonzlez, C.2, Silva Alvarado, R.3
Laboratorio de Gentica y Biologa Molecular1. Laboratorio de Citogentica2. Unidad de Investigacin en
Microbiologa Ambiental (UIMA)-Seccin Virologa3. Departamento de Biologa, Facultad Experimental de Ciencias.
Universidad del Zulia. Laboratorio Biosyntech Pharma 4. Maracaibo, Venezuela. Correo: lgonzalezpaz@gmail.com

Los inhibidores de monoamino oxidasas constituyen medicamentos A B Se observ un descenso

que bloquean la enzima monoamino oxidasa, implicada en la oxidacin promedio de la infeccin ltica
de monoaminas y degradacin de neurotransmisores. Se ha 30 UFP/mL (Fig.3)
demostrado que estos psicoactivos logran alterar la expresin gnica, corroborado por la ausencia de
pudiendo controlar la infeccin por herpesvirus. Estos virus utilizan una coloracin indicativo de
protena llamada LSD1 (lysine-specific demethylase 1, tambin actividad inhibitoria positiva del
conocida como KDM1A) asociada al desempaquetamiento del material frmaco, por medio del
gentico viral. Fig indicador redox trifeniltetrazolio
.3 en las placas de microtitulacin
Los virus del Orden Herpesvirales son similares al los virus del A B
(Fig.4) , lo cual probablemente
Orden Caudovirales. Estos ltimos infectan nicamente clulas este asociado a la inhibicin de
bacterianas (fagos). Siendo empleados como modelos para la LSD1 mediada por la
evaluacin de compuestos antivirales. Fig acumulacin de la metilacin
.4
represiva en las histonas
Por lo que se evalu la actividad antiviral del cido 2-amino-3-
A, sin tratamiento; B, con asociadas con el genoma viral,
fenilpropanoico del grupo de inhibidores LSD1/KDM1A, empleando un
tratamiento resultando en un bloqueo de la
modelo microbiano de lisis especfica con fagos antipseudomonicos del
expresin gnica viral.
Orden Caudovirales.

Los resultados probablemente estn asociados a la inhibicin de LSD1

Fig. Se us la tcnica doble mediada por la acumulacin de la metilacin represiva en las histonas
1 capa de agar (Fig.1) y asociadas con el genoma, resultando en un bloqueo de la expresin
microtitulacin (Fig.2), y la gnica viral. Se requieren ms estudios para poner a punto el modelo,
estirpe P. aeruginosa usando otros fagos, variaciones de concentracin y vehculos del
ATCC27853 como compuesto as como la evaluacin de los mecanismos genticos
hospedero. Los ensayos se involucrados. El empleo de las propiedades lticas de los fagos
realizaron por triplicado con utilizados en este trabajo, representa un modelo sencillo, rpido,
un ttulo fagico econmico, sensible, especfico y comparable con modelos en virus
~108UFP/mL y 5 mM del humanos para la evaluacin preliminar de biofrmacos con aplicacin
Fig. psicoactivo. epigentica.
2
Referencias bibliogrficas: Martnez, L., Corao, G., Cova, J., Rey, Y. 2004. Actividad antiviral y estudio de citotoxicidad de vinos tintos Sauvignon. Revista de la facultad de farmacia, 46(1), 40-46. Liang Y, Quenelle D, Vogel JL, Mascaro C, Ortega A, Kristie TM. A novel selective
LSD1/KDM1A inhibitor epigenetically blocks herpes simplex virus lytic replication and reactivation from latency. MBio. 4(1) e0055812 (2013). Liang Y, Vogel JL, Narayanan A, Peng H, Kristie TM. Inhibition of the histone demethylase LSD1 blocks alpha herpesvirus lytic replication