CICLO DE KREBS

Oxidacin del Acetil CoA

~
Objetivos del Ciclo de Krebs
Los objetivos del Ciclo de
Krebs son:
Oxidar acetil~CoA a CO2
Generar equivalentes de
reduccin (NADH y FADH2).
Suministrar intermediarios
para la sntesis de otros
compuestos (Aminocidos,
cidos grasos, Colesterol,
Gluconeognesis, Porfirinas).
Vincular derivados de
aminocidos al proceso
terminal de oxidacin.
 Coenzima A (CoA)
La coenzima A, cuya funcin es activar cidos grasos y transportar grupos acilo esta compuesta por:
Adenosina
Acido pantotnico
Cistena

NH2

N C
C N
HC
C C
N H
N
O O H2 O
CH3 C
H3C CH
O H2C NH C O P O P O
C CH CH
C CH2 C CH H2 OH OH
O OH
HN O OH
H2 HO P O
CH C SH
OH
O C

OH
 Origen del Acetil~CoA
Por
descarboxilacin
del piruvato.
Por oxidacin de
los cidos grasos.
A partir de
O
aminocidos
H3C C
cetognicos (L, K,
CoA
F, Y, I, W, T)
 Fases del Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs, como todo proceso cclico, se inicia

con la condensacin de un aceptor y el abastecedor del
ciclo, seguida por una serie de reacciones para
eliminar el abastecedor y otras que regeneran el
Reacciones generales del Ciclo de
Krebs
6
2
C C

Condensaci
6
C

4
C

ci
n iza
er
om
Oxidacin No Oxidacin

Is
Descarboxila Descarboxila
nte nte I

5
C
C
4

D Ox
n

es id
ci

c a
nt arb ci
ta

nt oxi o
ra

N
la

Li e e e ox n
id

II il
s c i n

be n
d
H

a
ra erg
b
De id a c

e
ar

ci a
n
Ox

C
C

4
4

C
4
 CONDENSACIN
La reaccin inicial del Ciclo
O
de Krebs es la condensacin
del oxalactico (aceptor de H3C C
4 carbonos) con el Acetil-
-
S-CoA Coenzima
abastecedor, Acetil CoA A
Coenzima A (2 carbonos)
para formar un cido O O OH
tricarboxlico de 6 carbonos, H2 C
C C OH
cido ctrico. HO C C HO C CH2
La enzima que cataliza la
O O HO CH2 C OH
reaccin es la acetil-CoA : C
O
oxaloacetatoC-
Oxalactico
acetiltransferasa, O

usualmente conocida como Ctrico

citrato sintasa o enzima
condensadora del citrato.
 Preparacin para la primera
descarboxilacin
La posicin del grupo OH en O OH
el cido ctrico no permite la C

oxidacin sin riesgo de HO C CH2

romper el enlace formado HO CH2 C OH
en la condensacin, por tal C
O
razn mes necesario O
cambiar la posicin del OH
Ctrico
y transformar el ctrico en
isoctrico. OH

La enzima encargada de O C
esta reaccin es la citrato O CH CH2
(isocitrato) hidro-liasa EC C CH C O
4.2.1.3, comnmente HO OH HO
conocida como aconitasa Isoctrico
 Primera descarboxilacin
OH
El cido isoctrico es O C
oxidado por NAD+, con O CH CH2
eliminacin de un tomo C CH C O NAD
de carbono en forma de HO OH HO
+

CO2.
Isoctrico
La reaccin es catalizada NADH +
H+
por la enzima isocitrato : O CO2
H2
NAD+ oxidoreductasa HO C C OH
C C C
(decarboxilanate), H2

comnmente conocida O O

como isoctrico -
cetoglutrico
ceshidrogenasa
 Segunda descarboxilacin
El - cetoglutrico es oxidado por
O
NAD+, con eliminacin de un tomo
H2
de carbono en forma de CO2. La HO C C OH CoA
oxidacin genera suficiente energa C C C
SH NAD
H2
para la formacin de un tioster +
O O
entre el producto de oxidacin y la
coenzima A . -
La reaccin es catalizada por el cetoglutrico
O
complejo enzimtico 2-oxoglutarato
H2
deshidrogenasa (transferente de HO C C NADH +
succinato). Consiste de tres C C
H2
S -CoA H+
enzimas: E1 (alfa-cetoglutarato O
CO2
deshidrogenasa, EC 1.2.4.2), E2 Succinil-CoA
(dihidrolipoil transsuccinilasa, EC
2.3.1.61) y E3 (dihidrolipoil
deshidrogenasa, EC 1.8.1.4)
 Formacin de GTP
La nica fosforilacin a
O
nivel de sustrato en el H2
HO C C
Ciclo de Krebs, ocurre a C C S -CoA GDP +
H2
expensas de la hidrlisis O
P

del tioster de el succinil Succinil-CoA

CoA. El nucletido tri O

fosfato formado es GTP H2 CoA
HO C C GTPSH
La reaccin es C C
H2
OH

catalizada por la enzima O

succinato -CoA ligasa (EC Succinico

6.2.1.4), conocida
tambin como succinato
quinasa
 Recuperacin del aceptor 1
La recuperacin del aceptor se
realiza de acuerdo con el
O
modelo general de oxidacin, H2
por lo tanto el primer paso es la HO C C Ubiquino
C C OH na FAD
formacin de un doble enlace H2
en una oxidacin dependiente O
del FAD. El producto formado es
Succinico
el cido fumrico
O
La reaccin es catalizada por la H Ubiquin
succinato : ubiquinona HO C C ol FADH2
C C OH
oxidoreductasa (EC 1.3.5.1) H
una flavoproteina (FAD), que O

contiene centros de azufre y Fumrico

hierro. Se conoce tambien con
el nombre de scuccinico
deshidrogenasa.
 Recuperacin del aceptor 2
En el segundo paso
se hidrata el fumrico O

para dar cido mlico. HO

H
C C H2O
C C OH
La reaccin es O
H

catalizada por la
malato hidroliasa O
(formadora de C
H2
C OH
fumarato) HO CH C

EC4.2.1.2, tambin OH O

conocida como Mlico

fumarato hidratasa
 Recuperacin del aceptor 3
La recuperacin del
O
aceptor termina H2
C C OH
mediante la oxidacin del HO CH C
NAD+
cido mlico a OH O
oxalactico, en una Mlico
reaccin dependiente de O
H2
NAD+. C C OH
HO C C
La reaccin es catalizada NADH +
O O H+
por la malato : NAD+
oxidorreductasa(EC Oxalactico
1.1.1.37), tambin
conocida comomalato
deshidrogenasa.
Resumen del Ciclo de Krebs
Acetil CoA
2C CoA-SH

Oxalactico
4C
NAD+
Ctrico 6C
NADH + H +

Mlico 4C

H2O
Isoctrico
Fumrico 4C 6C
NAD+
NADH + H+ CO2
Ubiquinol FADH2
-cetoglutrico
Ubiquinona FAD 5C
NAD+
Succnico 4C CoA-SH
NADH + H+
CO2
Succinil CoA
4C
GTP
GDP + P
 Integracin con otros
procesos
Gliclisis
Cuerpos
Acetil CoA
2C cetnicos
CoA-SH

Oxidacin y oxidaci
sntesis de n Oxalactico Colesterol
aminocidos 4C
cidos grasos
Gluconeogne Ctrico 6C
si s
Mlico 4C Fosforilacin
NAD oxidativa
H
FADH
Isoctrico
Fumrico 4C 2
6C
Oxidacin y
Oxidacin sntesis de
de aminocidos
-cetoglutrico
aminocid
5C
os
Succnico 4C
Porfirinas
Succinil CoA
4C cidos grasos de cadena
impar
Oxidacin
de
aminocid
os
Localizacin del Ciclo de Krebs y la
Fosforilacin Oxidativa
H+ H+ H+
Espacio intermembranal
c
I Q III IV
Membrana interna
ATP sintasa
NAD+ + H+ NADH H2O
O2
ATP Citocromo c
ADP + P H+
Ciclo
MATRIZ de Ubiquinona
MITOCONDRIAL Krebs Complejo I
O2 Succinato
H2O Fumarato Complejo II
Membrana interna
Complejo III
II
IV III Q I Complejo IV

H+ H+ Espacio intermembranal
 Complejo I
EsconocidocomoNADH:Ubiquinona
reductasa.
Esta compuesto por 16 o mscadenas
polipeptdicas.
Tiene FMNcomogrupoprosttico.
Presenta de5 a8 centrosferrosulfurados (Fe S).
Eselcomplejomsgrandedelacadenarespirato
ria.-Puedeserinhibidopor:-Amital (barbitrico),
Rotenona (productovegetaltxico.)
LaUbiquinonapuedeestarinsertadaenelcomple
jo,oestarlibre
 Complejo II
RecibeelnombredeSuccinato:UQreductasa.
Esla nicaenzimadel ciclo deKrebs unida ala
membranamitocondrial interna.
Constade
4cadenaspolipeptdicas.
1citocromo.-
UnamolculadeFADcomogrupoprosttico.
2 a3 centrosFe S
Hem Q
o
F- QH2
os
ntr
S
Ce 2H+

FADFADH2

Succinato Fumarato +
2H+
 Complejo III
SeconocecomoUbiquinona:citocromocreductasa.
Contiene2tiposdistintosdecitocromob.
Su funcinestransferir losequivalentesde reduccin
desdela Ubiquinoina hasta el citocromo c.
Elcomplejoes inhibidoporlaantimicina

cox cox
2H +
cred
2H +
cred

e-

e-
1

1
QH2 Q QH2 Q
Q QH2
Q 1 e- Q- 1 e-

2H+
 Complejo IV

Seconocecomocitocromocoxidasa. 4 cred
4 H+
Recibeloselectronesdelcitocromoc. 4 cox
Elcitocromocoxidasaalmacenaloselect
ronesparacederlos despusaloxigeno. 4 e-
ElcomplejoIVpuedeserinhibidopor: Cu
Cianuro(CN-) Fe
SH2 Cu Fe
4 H+ + O2
CO
Azida(N3-) 2 H 2O
4 H+
 Ubiquinona
Sufuncin es recogerelectronesdeloscomplejos I y
II
Es liposoluble, porlo quepuede desplazarse porel
interiorde las dobles membranas lipdicas, para
llegar al complejo
III.-Puedeserreversiblementereducidaopasarpores
tadosdesemi reduccin:
UQ(Ubiquinona)
UQH (Semiquinona)
UQH2 (Ubiquinol).
Sepuedeencontrarlibreoasociadaaprotenas.-
O CH3 H2 C H
Tieneunacadenalateralisoprenoide: C C HC C
n=6-8 enmicrorganismos. O C C CH2 CH3
n=10 (Q10) enmamferosH3 C C C 6 - 10

H3C O O
 Citocromos
Soncomponentesdelacadenarespiratoria.-
b
c
C1 presenta movilidad a travs de la membrana llevando
electrones del complejo III al complejo IV
a
a3
Son protenastransportadoras deelectrones
Contienenungrupo hemoque puede estaroxidadooreducido.
No puedenseroxidadasporeloxigenomolecular, exceptoel
citocromo a3. Es el nico que puede ceder electrones al
oxigeno.
Los citocromos actan en forma secuencial
Flujo de electrones en la Cadena
Respiratoria

H+ H+ H+

Fe C C
S b 1 a3
FM N

CoQCoQH
Fe
S b Fe a
S

NAD+
NADH H+

O2+ 2 H+ H2O
 Integracin en el Ciclo de
Krebs
Monosacri Aminocido cidos
dos s grasos
Glicerol

Aminocido
s
Potenciales redox
Potenciales de reduccin en la
adena respiratoria
 Enzimas respiratorias y pares redox en
.
eucariontes
Enzima respiratoria Par redox E (Voltios)
NADH deshidrogenasa NAD+ / NADH 0,32
Succinato
FMN o FAD/ FMNH2o FADH2 0,20
deshidrogenasa
Complejo del citocromo Coenzima Q10 ox / Coenzima Q10
+0,06
bc1 red
Complejo del citocromo
Citocromo b ox/ Citocromo b red +0,12
bc1

Complejo IV Citocromo c ox/ Citocromo c red +0,22

Complejo IV Citocromo a red/ Citocromo a red +0,29

Complejo IV O2/ HO- +0,82

Condiciones: pH = 7
 Formacin de ATP
El proceso de fosforilacin del
ADP para formar ATP se realiza
a expensas de la llamada fuerza
protomotriz que es generado
por un gradiente de protones a
travs de la membrana interna
de la mitocondria.
Los complejos de la cadena
respiratoria bombean protones
de la matriz mitocondrial al
espacio inter membrana.
Los protones regresan a la
matriz gracias a la ATP sintasa,
enzima que aprovecha la fuerza
protomotriz para formar el ATP.
 Esquema
generaldelmetaboloismo