UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA.

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.

MICROBIOLOGA DE ALIMENTOS.

TCNICAS DE ANLISIS MICROBIOLGICO

EN FRUTAS Y HORTALIZAS FRESCAS

Dr. Ivn Salmern.

Nolbertha Corral Soriano
 Erwinia carotovora.

Pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae.

Siendo estas del grupo de los coliformes.
NOM-112-SSA1-1994 Bienes y Servicios. Determinacin de
bacterias coliformes. Tcnica del numero mas probable (NMP)

Densidad esperada es 1
bacteria X 10ml de
liquido o X g de alimento
solido

Proporciona una estimacin

estadstica de la densidad microbiana
presente en los tubos con crecimiento
positivo
FUNDAMENTO.

Bacterias coliformes Fermentan la lactosa

Incubadas a 35 1C durante 24 a 48 horas.

Resultando una produccin de cidos y gas el cual es

manifestado en forma de turbidez.

Bacilos Gram negativos, no

esporulados, aerobios o anaerobios
facultativos.
 REACTIVOS.

Solucin reguladora de fosfatos. Preparacin de muestra

Caldo lactosado Medio selectivo de mayor concentracin.

Caldo lauril sulfato triptosa Medio selectivo de enriquecimiento.

Caldo lactosa bilis verde brillante Medio confirmativo.

 PROCEDIMIENTO.

PRUEBA PRESUNTIVA.

1ml de la dilucin primaria inicial NOM -110

10 ml de la dilucin primaria inicial (NOM- 110)

10 ml de Caldo lauril sulfato triptosa.

10 ml de Caldo lactosado.

Incubar a 35 0,5 C
Realizar diluciones segn se necesite. por 24 2 horas
 PROCEDIMIENTO.

PRUEBA CONFIRMATIVA. Despus del tiempo de incubacin de la prueba presuntiva

10 ml de caldo lactosa bilis verde brillante.

Incubar a 35 0,5 C por 24

Tubos con presencia de gas 2 horas
Diluci Diluci Diluci ndice del
n 10-1 n 10-2 n 10-3 NMP/100
ml

0 0 1 3

0 1 0 3

1 0 0 4

1 0 1 7 Los resultados se expresan como

numero de bacterias /g o ml
1 1 0 7

1 1 1 11

1 2 0 11

2 0 0 9

2 0 1 14

2 1 0 15
 De los tubos positivos, se puede sembrar en el
agar selectivo MacConkey e incubar a 37 C
por 24 h.

Este medio se utiliza para el aislamiento de

bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios
facultativos.

Todas las especies de la familia

Enterobacteriaceae en este agar.
FUNDAMENTO DEL AGAR.

Peptona Desarrollo de los microorganismos.

Lactosa Hidrato fermentable

Sales biliares y cristal violeta Inhibidores de Gram positivos

 Agar MacConkey

Pequeas colonias
de color rojo o rosa
profundo Agar MacConkey
con Erwinia carotovora