HEMOGRAMA

MANUAL
Bqco. Gonzalo A Ojeda
Ctedra Hematologa Clnica
Fa.C.E.N.A-U.N.N.E
2013
Definicin
ES EL ESTUDIO CUALI Y
CUANTITATIVO DE LOS ELEMENTOS
CORPUSCULARES DE LA SANGRE
CUANTITATIVO : Recuento de GR, GB
Dosaje de Hb
ndices Hematimtricos ( VCM, HCM, CHCM )
Frmula Leucocitaria

CUALITATIVO
Estudio Morfolgico de la Serie Roja, Serie Blanca y Pq
Determinaciones Adicionales

RECUENTO DE Pq

Reticulocitos

VSG
ETAPA Pre-ANALTICA
Condiciones del Paciente

Tipo y Toma de Muestra

Condiciones del Paciente
NO NECESITA ESTAR
ESTRICTAMENTE EN AYUNAS (se
sugiere al menos 2 h).
NO HABER REALIZADO ACTIVIDAD
FSICA INTENSA
PERMANECER PREFERENTEMENTE
SENTADO DURANTE LA EXTRACCION
DATOS A TENER EN CUENTA

EDAD
DX. PRESUNTIVO
SEXO
REFERENTE A LA MUESTRA
TIPO DE MUESTRA
-VENOSA

-CAPILAR

-ARTERIAL??
PUNCION VENOSA
VENTAJAS
-Tcnica rpida y segura
-Permite obtener volmenes
adecuados para las dems
determinaciones.
-Permite repetir el anlisis en
caso de dudas.
-Reduce los posibles errores
de la puncin capilar.
DESVENTAJAS
-Resultados errneos por hemo-
concentracin (torniquete pro-
longado)
-Hematomas y dolor (extraccin
dificultosa)
-No se recomienda en neonatos
o pacientes quemados.
-Paciente Oncolgicos
PUNCION CAPILAR
VENTAJAS
-Resulta sencillo para neonatos y
nios
-Se puede realizar ms de una
vez en pacientes especiales (que-
mados, oncolgicos, etc)
-til en pacientes con patologas
Hemorrgicas.
DESVENTAJAS
-Recuentos errneos por hemo-
concentracin o hemodilucin
-Dificultad para obtener flujo
continuo.
-Recuentos de Pq disminuidos,
coagulacin.
-Errores por contaminacin
-Paciente Oncolgicos
ANTICOAGULANTES
SALES DE EDTA :(Na2 o K3) Forman complejos con el Ca++,
efectivo en pequeas cc, no necesita ser evaporado (Posible
error por dilucin a tener en cuenta) 0.01mL (10 L) sirven para
anticoagular hasta 2,5 mL de sangre LA RELACION
NORMALMENTE USADA ES 10 L ms 1 mL (990 L) de sangre
(1/100)
PERMITE CONSERVAR EN HELADERA LAS MUESTRAS
HASTA 48h SIN ALTERAR LOS VALORES

MEZCLAS DE OXALATOS DE AMONIO Y POTASIO

( MEZCLA DE WINTROBE) Acta precipitando el Ca+
Proporcin 1/10 (0.5 mL ACG EVAPORADO a 37 + 5 mL sangre)

HEPARINA: Acta neutralizando la trombina. Proporcin 10-50

UI/mL sangre. (COLORACIN)
ACTIVIDAD
TENIENDO EN CUENTA
PROPORCIONES CALCULE:
- volumen de EDTA-Na2 para anticoagular
3 mL de sangre
-volumen de EDTANa2 para anticoagular
2 mL de sangre
Obtenida la muestra
HOMOGENEIZAR !!!!! LENTA Y
REPETIDAS VECES

ANTES DE PROCESAR :
HOMOGENEIZAR LENTA Y
REPETIDAS VECES!!!
ETAPA ANALTICA
RECUENTOS DE GB , GR y Plq
Hematocrito
Dosaje de Hb
Frmula Leucocitaria
RECUENTO DE GB
DILUYENTE: LIQUIDO DE TURK
-Acido actico glacial (20 mL)
-Cristal Violeta 1% (10 mL)
-Levar a 1000 mL con agua destilada
Dilucin : 1/20
380 L + 20 L muestra
 Muestra

Secar con papel Homogeneizar

el dispositivo de Por agitacin
cargado
RECUENTO DE GB
CAMARA DE
NEUBAUER

PIPETAS
CAMARA DE NEUBAUER
Se trata de un portaobjetos con una
depresin en el centro, en el fondo
de la cual se ha marcado con la ayuda
de un diamante una cuadrcula.
Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una
separacin entre dos lneas
consecutivas de 0.25 mm. As pues el
rea sombreada y marcada L
corresponde a 1 mm. La depresin
central del cubreobjetos est
hundida 0.1 mm respecto a la
superficie, de forma que cuando se
cubre con un cubreobjetos ste dista
de la superficie marcada 0.1 mm, y el
volumen comprendido entre la
superficie L y el cubreobjetos es de
0.1 mm.
Aumento 10X
Aumento 10x
Consideraciones prcticas
PARA CARGAR LA CAMARA : SE COLOCA EL CUBRE
OBJETO Y ACERCANDO LA PUNTA DE LA PIPETA O
EL CAPILAR SE LLENA POR CAPILARIDAD
EL LLENADO DEBE HACERCE DE UNA SOLA VEZ SIN
QUE QUEDEN BURBUJAS, NI LQUIDOS
EXEDENTES ALREDEDOR DEL CAMPO
NO BALANCEARLA AL ACERCAR AL MO
PARA DISTINGUIR DE BASURAS MOVER EL
TORNILLO MICROMETRICO.
NO DEMORARSE
 Elementos contados 4 mm
X 1mm
X N/4
Dado que el espesor de la cmara es 0.1 mm, para expresar el
nmero de elementos por mm deberemos multiplicar el valor X por
10.
X= (N/4) X 10
Como se ha efectuado una dilucin de 1/20, debemos multiplicar por
la dilucin, es decir:
X= Nx10x20= N x 50= N de GB/mm
4

Segn el ICSH, debe expresarse este resultado en N de GB. 10x9/l

Clculos
Valores de Referencia
ADULTOS : 5000 a 10.000 GB / mm
NIOS
- RN : 12.000 a 25.000 GB / mm
- Hasta 1 ao : 6000 a 18.000 GB / mm
- 3 a 6 aos : 5000 a 15.000 GB / mm
- 6 a 12 aos: 4500 a 13.500 GB / mm
ACTIVIDAD
EXPRESAR 6500 GB/mm3

En: cel / dL
cel / L (notacin cientfica)
cel / L (notacin cientfica)
CAUSAS DE ERROR
DEL MATERIAL
CUBREOBJETOS MAL COLOCADO
SUCIEDAD ,LEVADURAS EN EL LIQUDO DE DILUCION
RESTOS DE G.R.
APELOTAMIENTO DE LEUCOCITOS
DESGASTE

DE TECNICA
EXTRACCION DE SANGRE
DILUCION (PIPETA MAL ENRASADA)
LLENADO DE CAMARA EN FORMA DESIGUAL
AUTOAGLUTINACION

DEL OPERADOR
DIFERENCIAS DE UN INDIVIDUO A OTRO
FATIGA OCULAR
LEUCOCITOSIS
FISIOLGICAS
- Embarazo, Lactancia, Puerperio, Perodo
menstrual
- Ejercicio violento, Stress.
 LEUCOCITOSIS PATOLOGICAS
CAUSAS INFECCIOSAS
-Bacterias pigenas : Strepto,
Staphylo , Meningo y gonococo.
-Tos convulsa (Bordetella)
Leucocitosis con Linfocitosis
-Sarampin (Inc)
-Cuadros septicos : Peritonitis,
Neumona
CAUSAS NO INFECCIOSAS
-Cuadros inflamatorios
-Post hemorragias
-Vmitos, convulsiones, crisis eclmp-
sicas, epilepsia, taquicardias
-Hipertemias no infecciosas
-Quemaduras extensas
-Sock traumtico
-IMC, necrosis de tejido tumoral, pan-
creatitis.
-Leucemias
-Enfermedades metablicas : DBT,
Coma diabtico, Acidosis
-IRC
-Endcrinopatias : Cushing
- Corticoterapia
 Leucopenias
-Constitucional (Rara) tener presente resultados previos
-Digestiva (post prandial)
-Infecciosa: fiebre tifoidea y paratifoidea
-Sepsis de mala evolucin
-Casi todas las virosis (Sarampin, Varicela, Gripe, Neumona )
-Intoxicacin por benzoles o sulfas
-Hemopatas: Leucemias leucopnicas, aplasia medular, etc
-Afecciones hepatoesplnicas
-Cirrosis heptica, trombosis de la vena porta o esplnica
-Leucopenias alrgicas, shock anafilctico
-Afecciones reumticas
-Quimioterapia
-Leucopenias carenciales
-Colagenopatas: LES, Esclerodermia
-AINES
DOSAJE DE Hb
Mtodo de la Cianmetahemoglobina
Fue recomendado por el Comit
Internacional para la Estandarizacin de
Hematologa (ICSH) en 1966,
modificado en 1977 y sigue siendo hasta
hoy el ms recomendado.
REACTIVO DE DRABKIN
Fe(CN)6K3---------------200 mg
KCN---------------------------- 50 mg
K3HPO3--------------------140 mg
Sterox Se o Triton X-100-------1 mL
Llevar a 1L con agua destilada y ajustar el pH
a 7,2 con H3PO4 0.1 N o con KOH 0.1N.
Guardar en frasco color caramelo, a T amb,
estable 6 meses.
Fundamento del Mtodo
Hb ( Fe II )

Fe(CN)6K3

Meta Hb ( Fe III)

KCN

CIANMETAHEMOGLOBINA
MAXIMO DE ABS
A 540 nm
Tcnica
5 mL Rvo Drabkin + 20 L sangre entera anticoagulada

5 minutos

Leer a 540 nm en espectrofotmetro o en fotocolormetro con

filtro verde
Curva de calibracin
Se realiza cada vez que se prepara o
adquiere reactivo.
Kits comerciales : 3 niveles ( bajo,
normal, alto )
Muestra testigo de cc conocida
(trabajo con dilucin al y con el doble )
Curva de Calibracin

Abs
A=.b.C
y=ax+b

g/dL
ACTIVIDAD
A= b C despejar C y especificar
Unidades (g/dL)

Idem desde la pendiente del grfico

VENTAJAS DE LOS METODOS

MUESTRA TESTIGO
KIT COMERCIAL -Controla la linealidad del equipo
-Controla la -Controla la manipulacin del
linealidad del equipo material de medicin volumtrico
-Estado del rvo (en forma indirecta) pues el
patrn se procesa
como si fuese una muestra
-Posible deterioro del reactivo
-Variaciones de tensin, Int de la
-Lampara,etc.
Para tener en cuenta
La determinacin de un patrn diario nos
permite:
-Controlar que el reactivo no ha sufrido
deterioro
-Controlar el factor humano
-Cambios en la tensin elctrica o
funcionamiento del equipo de lectura.
VALORES DE REFERENCIA
Bibliografa Laboratorio

Mujeres 11,5 - 14 g% 12 15 g%

Varones 13,5 17 g% 13 17 g%
 HEMATOCRITO O
VOLUMEN GLOBULAR
Definicin

ES
EL VOLUMEN DE MASA
GLOBULAR EXPRESADO COMO
UN % EN EL VOLUMEN DE
SANGRE TOTAL
Tcnica
1-SE CARGAN TUBOS CAPILARES:
Sangre venosa : Sin heparina
Puncin digital: Con heparina
2-LLENAR HASTA 2/3 EL CAPILAR Y CERRAR
EN UN EXTREMO CON PLASTILINA
3-CENTRIFUGAR EN CENTRIFUGA ESPECIAL:
15000 rpm 5 a 6 min
4-LEER EN ABACO ESPECIAL
MICROCENTRFUGA
VENTAJAS
RPIDO
< VOLMEN DE SANGRE
TUBOS CAPILARES DESCARTABLES
MAS EXACTO YA QUE AL CENTRIFUGAR
LA SANGRE A MAYOR VELOCIDAD EL
VOLUMEN DE PLASMA ATRAPADO POR LOS
G.R. EN DICHA CAPA ES <
Valores de referencia
Recin Nacido 52 65 %
Varones 40 48 %
Mujeres 37 47 %
 VALORES ALTOS

POLIGLOBULIA REAL
VALORES BAJOS
HEMOCONCENTRACION :
-ANEMIAS QUEMADURAS , ECLAMPSIAS,
SHOCK QUIRURGICO
-FASE DE O TRAUMATICO
RECUPERACIN ESTADOS DE
DE PERDIDA DE DESHHIDRATACION (VOM.
DIARREAS, DIABETICOS)
SANGRE HIPOXIA DE LAS ALTURAS
-EMBARAZADAS FUMADORES
RECUENTO DE GLBULOS
ROJOS
EL CONTAJE HA ADQUIRIDO MUCHA
PRESICION CON LOS METODOS
AUTOMATIZADOS
EL RECUENTO EN CAMARA ES OBSOLETO
Y SUJETO AGRAVES ERRORES TANTO QUE
CUANDO NO SE DISPONE DE VALORES
POR AUTOMATIZACION ES MEJOR
PRESCINDIR DE ESTE DATO Y GUIARSE
POR LOS VALORES DE HTO Y HB.
VALORES DE REFERENCIA
Mujeres 4 4.8 millones/mm
Varones : 4.5 -5.5 millones / mm
RN : 5.6 millones / mm
4 semanas: 4 millones/ mm
6 semanas: 3.6 millones/ mm
12 semanas : 3.8 millones/mm
6 a 12 aos : 4.5 millones / mm
INDICES HEMATIMTRICOS

VCM HCM CHCM

Expresa el Cantidad de Hb % de Hb
volumen medio contenida en contenida en la
del GR un hematie masa globular
total

90 5 fL 29 3 pg 30 34 %
Hto x 10 Hb x 10 Hb x 100
GR GR Hto
ACTIVIDAD
EXPRESAR CON UNIDADES
VCM (fL)
HCM (pg)
ANLISIS DE FROTIS
SANGUNEOS
Coloracin May Grwald - Giemsa

May Grwald
-Eosinato Azul de Metileno
-Metanol
Giemsa
-Eosinato de Azur II
-Azur II
-Glicerina y Metanol
TCNICA
1-Realizar el extendido Dejar secar- Rotular
2- Cubrir 3 minutos con MG (FIJACIN)
3-Agregar en igual proporcin al colorante
buffer o agua comn : agua destilada (1:1) con
movimientos sin eliminar todo el colorante
anterior (ACTIVACION)
4-Volcar la mezcla anterior y (enjuagar) cubrir
con Giemsa al 10% durante 15 minutos.
PREPARAR EN EL MOMENTO
5-Dejar secar Observar con Aceite de
Inmersin
MG
Metanol : Agente Fijador
Eosinato : colorea partes bsicas del
citoplasma (rosado) : hemates, grnulos de
Eos, citoplasma de granulocitos.
Azul de Metileno: granulaciones especficas de
granulocitos, nucleolos, citoplasmas basfilos,
hemates policromatfilos, colorea levemente
el ncleo.
Giemsa
Colorea fuertemente las granulaciones
inespecficas (azurfilas), colorea
adems fuertemente los ncleos
diferenciando la cromatina.
Tie tambin cuerpos de Howell Jolly,
anillos de Cabot y Bastones de Auer
RESUMIENDO
NCLEOS: En violeta rojizo
CITOPLASMA DE LAS CELULAS
LINFOIDEAS :en azul -celeste luminoso. Los
grnulos linfoideos en rojo purpreo
LOS GRANULOS NEUTRFILOS .en rosado
pardusco
LOS GRANULOS EOSINFILOS: en naranja
pardo o rojo ladrillo
LOS GRANULOS BASFILOS: En azul marino
con tonalidad violcea
ERITROCITOS en rosado rojizo
 BASOFILO

NEUTROFILO
LINFOCITO

EOSINOFILO MONOCITO
Frmula Leucocitaria
Cayados0 - 2%
Neutrfilos.50 - 70%
Eosinfilos.0 8 %
Basfilos0 1%
Linfocitos20- 40 %
Monocitos.. 4 6 %
 OCULARES

OBJETIVOS

PLATINA
MACRO

CONDENSADOR
MICRO
PARA LOS TRABAJOS
PRCTICOS
GUARDAPOLVO O CHAQUETILLA
2 PARES* DE GUANTES POR
PERSONA
MATERIAL DE EXTRACION (AGUJAS,
JERINGAS, LAZO, ALGODN
ALCOHOL, CINTA DE PAPEL)
MARCADOR PARA ROTULAR
POR GRUPO DE LABORATORIO

1 ROLLO DE COCINA X 3

1 LITRO DE LAVANDINA (MARCA)

1 BOTELLA DE ALCOHOL 250 CC

PAUTAS DE TRABAJO
ORDEN Y ORGANIZACIN

CONCEPTOS TERICOS LLEVADOS A

LA PRCTICA (COLOQUIO)

LIMPIEZA (ROTULADO)
INFORME INDIVIDUAL
G1-20

HOJA A4
FOLIO A4

DA MIRCOLES AL INICIO DE CLASES

GRUPO 1 (15:00 17:00) GRUPO 2 (17:00 19:00)
AGERO CORONA ROMINA ARRA JOS
ALARCN PATRICIA BARONI PIETTO MARIA
ALVAREZ JUAN MARCELO BERTONA VANNINA
ARANDA MARIA BELEN CERULLO FABIAN
BREGANT MATIAS COMPARIN LAURA
CASTILLO RVEDA EDUARDO DEZOTTI EDGARDO
DORNELES GABRIEL FERNANDEZ SOSA ELIANA
ESCALANTE ROSAURA GONZALEZ VIANO VALERIA
GARCIA PABLO
GOMEZ HERNAN LEDESMA RUBEN
MONJE ANALIA MARTINEZ VALERIA
MONTAEZ LUCAS MENDOZA MAYRA
PENTENERO MARIANA MIJALEC TATIANA
PINTO MARA TOMASZUK ANA
FIN