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MEDULA OSEA Y
MADURACIN DE LOS
LINFOCITOS B
Mdula osea
Maduran las clulas B.
En este proceso intervienen
las clulas del estroma que
producen citocinas que se
requieren para el desarrollo
de las CB.
Durante este proceso se
seleccionan las CB, en el que
se eliminan aquellas clulas
que reconocen antgenos
propios.
El ambiente permite que
vivan clulas plasmticas por
mucho tiempo y que
produzcan Ac, as como LT de
memoria.
Generacin, activacin y
diferenciacin de CB
CB1 son un subgrupo de las Cb CB-1 y CB-2
que se originan antes de las
CB2 que son el grupo principal
de CB de humanos y de ratones.
CB1 aparecen durante la vida
fetal y expresan IgM en la
superficie, y muy poca o nada
IgD, tambin tienen CD5
(aunque parece no ser vital para
el linaje de las CB1).
En animales en los que B2 es la
principal poblacin de CB , las
B1 son poco abundantes en los
rganos linfoides secundarios,
pero son muy abundantes en
el periotoneo.
Durante la etapa embrionaria,
las B1 se forman en la MO,
pero despus del nacimiento, se
generan en otras partes del
organismo, y a partir de otras
B1.
Muchos de sus miembros son
clulas portadoras de IgM que
no pasaron por la
hipermutasin somtica ni
switching. Consecuentemente,
los Ac producidos por la CB1
son de poca afinidad.
Muchas de las leucemias
linfocticas crnocas se
originan a partir de B1
Generacin, activacin y diferenciacin
de CB
Hace que
diferenciacion
se divida
El contacto fsico entre las CE y las CB es mucho, y para ello intervienen las molculas
de adhesin. Este contacto es muy importante desde el estado Pro-B, y aqu intervienen
VLA-4 (B) con su ligando VCAM-1(CE). Despus del contacto inicial se produce c-Kit
que interacta con su ligando que es una molcula de la superficie de las CE conocida
como Stem-cell factor (SCF). Esta interaccin induce a la pro-B temprana a que se
divida y a que comience a diferenciarse en una pre-B, entonces comienza a expresar el
receptor para la IL-7. La IL7 producida por las CE es la que dirige el proceso de
desarrollo y maduracin de las CB.
La expresin de las
molculas de adhesin que
expresa la pre-B se van
modificando, de manera que
las clulas que van
proliferando se pueden
despegar de las CE, ya que
en este estadio ya no
requieren de un contacto tan
cercano entre ambas pero
siguen requiriendo de la IL7
para seguir su desarrollo y
llegar a la madurez.
Rearreglo de los genes de las Ig
La maduracin de la CB VDJ y C
depende de los arreglos SEGMENTOS
que se den en el DNA DE GEN
que codifica para las Ig VJ y C
desde los primeros
estadios de las clulas
progenitoras.
Una de las caractersticas mas impactante del sistema
inmune de los vertebrados es su habilidad para responder
a un aparentemente ilimitado nmero de antgenos
extraos.
Cada molcula de anticuerpo est formada por una
secuencia nica de aa en su regin variable y solo una de
un nmero limitado de secuencias invariantes en su
regin constante.
Las bases genticas para esta combinacin de constancia
y tremenda variacin en una sola molcula proteica
subyace en la capacidad de organizacin de los genes que
codifican para estas protenas
Durante la maduracin de las clulas B en la mdula sea los segmentos de
genes se acomodan al azar y pueden generar mas de 106 combinaciones.
Subsecuentes procesos incrementan la diversidad del repertorio del sitio de
unin de los anticuerpos a ms de 108 antgenos.
Durante el desarrollo y
maduracin de las clulas B,
la clula B progenitora pasa
por una secuencia ordenada
de eventos en los que se dan
los rearreglos de los genes
que codifican para las
diferentes fracciones que
juntas darn como
consecuencia un gen que
codificara para una cadena
de una Ig. Aunado a esto se
dan modificaciones de ese
gen resultante, lo que
contribuye a la diversidad
del producto final.
Al final de este proceso,
la clula B
inmunocompetente
contendr secuencias
codificantes
funcionales para la
regin variable de la
cadena pesada y de la
ligera, de manera que la
clula B poseer una
especificidad
determinada, ya como
clula B madura.
Despus de la
estimulacin antignica
en los rganos linfoides
secundarios, la clula B
rearregla los genes de la
regin constante, de
manera que se pueden
generar cambios en el
isotipo de la
inmunoglobulina que se
expresar (switching), as
como de la regin
variable, por lo que se
mejorar la afinidad
(hipermutasin somtica)
sin que haya cambios en
su especificidad.
El rearreglo de los genes es una caracterstica esencial para la
diferenciacin de los linfocitos, y no se ha visto ninguna otra
clula de vertebrados que pase por un proceso parecido.
Organizacin multignica de los genes de las
Ig`s
Las cadenas ligeras k y l, as como las cadenas pesadas
estn codificadas por familias multignicas situadas en
diferentes cromosomas.
Organizacin multignica de los genes de las
Ig`s
En el DNA de la lnea
germinal, cada una de
estas familias
multignicas contienen
diferentes secuencias
codificantes, llamadas
segmentos de genes,
separados por
secuencias que no
codifican para nada o
secuencias no
codificantes.
Cada familia multignica tiene
caractersticas propias
Las familias de cadenas ligeras k y l contienen los segmentos de
genes V, J y C. El rearreglo de los segmentos VJ codificarn para el
dominio variable de la cadena ligera y C para los constantes
especificidad
de la cadena pesada y
despus los de la ligera, de
manera que al final de este
proceso, cada cel B tenga
una sola secuencia de
DNA funcional que
codifica para cada una de
estas regiones, lo que trae
por consecuencia que la
clula B ya madura tenga
una especificidad
determinada y nica
El rearreglo del DNA de la cadena ligera
(genes-segmentos V-J)
Este proceso se da en ambas
cadenas ligeras, k o l.
En humanos, cualquiera de los
especificidad
genes funcionales Vl puede
combinarse con las 4
combinaciones funcionales Jl-
Cl.
En ratones, el Vl1 se puede unir al
Jl1 o con el Jl3 o Vl2 puede unirse
al Jl2.
La cadena k de humanos o
ratones, cualquiera de los
segmentos Vk se puede unir con
cualquiera de los segmentos Jk
funcionales
El rearreglo del DNA de la cadena ligera
involucra los genes-segmentos V-J
En el orden 5a 3 los genes
rearreglados de k o l tienen las
siguientes regiones:
Un exon que codifica para la secuencia
lider
.
Un intrn
Un segmento VJ
Un intrn
La regin constante
La secuencia arreglada de la cadena
ligera es transcrita por la RNA
polimerasa, de la regin L a la regin
C, hasta que llegan al codn de
trmino, por lo que se genera el
transcrito primario del RNA de la
cadena ligera
El rearreglo del DNA de la cadena ligera
involucra los genes-segmentos V-J
especificidad
las cadenas
pesadas
funcionales se
requiere de dos
eventos de arreglo
de genes-
segmentos en la
regin variable:
especificidad
Un gen-segmento DH
se une primero a un
segmento JH
originando un
segmento DHJH que
se une ahora a VH
para generar una
unidad VHDHJH que
codificar para la
regin variable
entera.
Lo que originar un DNA con los
segmentos de 5a 3:
Una secuencia Lider
Un intrn
Un segmento VDJ unido
Genes-segmentos C
Una vez acomodados los genes se
transcribe incluyendo los
intrones
Al RNAm se le realiza
splicing alternativo, por lo que
se pueden dar RNAm maduros
que porten Cm como Cd con la
misma secuencia de la regin
variable, ambos se traducirn y
al final se tendrn cadenas M y
D, por lo que la CB madura
puede tener en su superficie
IgM o IgD como BCR con
exactamente la misma
especificidad antignica.
Expresin simultanea de IgD e IgM
En la lnea germinal
se encuentran
numerosas copias
de los diferentes
genessegmentos
V, D y J que al
unirse pueden dar
106 posibles
combinaciones, de
las cuales, cualquier
individuo es
portador de una
parte.
3. Flexibilidad en las uniones genera diversidad
Este proceso aumenta la diversidad ya generada por las posibles combinaciones
de V, D y J, y se refiere a:
La variacin de
la posicin del
corte del hairpin
es la base de la
variacin de esta
secuencia
La variacin de
la posicin del
corte del hairpin
es la base de la
variacin de
esta secuencia
+
Se pueden agregar hasta
15 nucletidos tanto a la
unin de V-DJ o D-J de
la cadena H, por lo que
Se generan secuencias quedara una unidad
Secuencia
palindrmicas que son los P- VHNDHNJH
al zar
nucletidos
Se ha visto que la variacin relacionada con estos
tres puntos quedan en la secuencia que codifica para el
CDR3, tanto en la cadena pesada como en la ligera
4. La fuente final de diversidad es la asociacin de
la cadena pesada y la ligera.
En humanos existe el potencial de
generar como resultado de los rearreglos
de los genes de la regin variable 6624
genes que codifiquen para la cadena
pesada y 375 genes para la ligera. Si se
asume que la expresin de cualquiera de
los posibles genes de la cadena pesada y
ligera puede ocurrir al azar en la misma
clula, el nmero potencial de
combinaciones entre las dos cadenas es de
2,484,000 . Este nmero es
probablemente mas alto que la diversidad
generada en un individuo, por que no es
probable que todos los VH y VL se
apareen unas con otras, es ms, los
procesos de recombinacin no son
completamente al azar, no todos los genes
Vh, D, o Vl son usados con la misma
frecuencia. Algunos son usados a
menudo, otros solo ocasionalmente. Y
otros nunca.
4. La fuente final de diversidad es la asociacin de
la cadena pesada y la ligera.
Pro-B: Se forman
las cadenas Ig-a y b
Pre-B:
La cadena pesada m se asocia con un complejo de membrana conocido como
cadena ligera surrogada, la cual est conformada por dos protenas, una Vpre-B
y una C-like llamada l5 las cuales se asocian no coovalentemente para formar
una estructura semejante a una cadena ligera.
El receptor entonces estar formado por las cadenas pesadas m y el complejo de
la cadena ligera surrogada. Solo si forman este receptor pordrn continuar su
proceso de maduracin.
Como clula pre-B sufren mltiples divisiones produciendo
de 32 a 64 descendientes cada una, y cada una de stas
nuevas clulas puede dar lugar a diferentes rearreglos en
la cadena ligera, por lo que se incrementa la variabilidad
y la diversidad del repertorio de Ag que pueden
reconocer.
B inmadura: Solo expresan IgM en toda la superficie de la
membrana.
No prolifera ni responde a antgenos extraos
En este momento da la seleccin clonal y las que reconocen antgenos
propios tienen una segunda oportunidad de rearreglar sus genes de
la regin variable, a esto se le llama edicin del receptor.
Este proceso se da principalmente en la cadena ligera, si aun as sigue
reconociendo Ag propios se apoptotiza (seleccin negativa).
Solo del 2-5% de las clulas producidas diariamente son seleccionadas
positivamente.
Se queda en la MO aun por 1-3 das, en lo que produce nuevas
molculas de adhesin y receptores de homing para llegar por la
sangre a los rganos linfiodes secundarios
Seleccin de CB inmaduras autoreactivas