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Princpios da Gentica Microbiana

Definio

Gentica (do grego genno; fazer nascer);


a cincia da hereditariedade e da variabilidade dos organismos;
Material gentico cromossomo nico
circular consistindo de uma nica molcula
circular de DNA sem protenas associadas.
Cromossomo circular
procarionte
Bacteria
Ribossomo
procarionte
70 S (Svedberg)
Ribossomos so
compostos por
duas subunidades
associadas com 50 S
uma protena de
um tipo de RNA
(RNA ribossmico); 30 S
Sntese de
protenas
Em Archaea tanto histonas
quanto DNA girase
Ncleo Eucariontes
O Ncleo atua na reproduo celular. Tambm portador das
caractersticas hereditrias e coordena as atividades celulares.
Eucariotos: superenovelamento estabilizado pelas
histonas
Ribossomos Ribossomo eucarionte

eucariontes
80S
Partculas ricas
em rRNA
(ribossmicos) +
protenas; 60S

Tem a funo de
sntese protica
40S
Conceitos bsicos
Nucleotdeos

- Genoma: toda a informao


gentica contida em uma clula; A=T
- Cromossomos: so estruturas CG
(partes) do genoma que
transportam fisicamente a
informao gentica;
- Genes: so segmentos de DNA
que codificam produtos finais;
- Gentipo: composio gentica,
a informao que codifica todas
as caractersticas do organismo;
- Fentipo: propriedades
expressas de um organismo,
manifestao do gentipo;
Estrutura do DNA
Procariotos: duplicao do material gentico

Os microrganismos apresentam
elevadas velocidades metablicas.

Em algumas horas vrias geraes


podem surgir

Ex: E. coli: 3 geraes em 1 hora.

clones
Replicao do DNA em Procariotos

Nogueira & Silva Filho, 2010


Esquema de duplicao (replicao) do DNA
Eucariontes: replicao do material gentico

Os cromossomos existem em diferentes


estados durante a vida celular;
DNA: deve replicar e expressar (funcionar)
independente do DNA-me;
Replicao do DNA em Eucariotos
Transcrio, Traduo e Sntese de Protenas

Transcrio (DNA RNA)

Uma fita do DNA serve de molde (sense strand);


Tem Uracil (U) no lugar de Timina (T);
RNA fita simples;
Trs tipos de RNA com diferentes funes:
mRNA (RNA mensageiro): especifica a sequncia de
aminocidos (aa);
tRNA (RNA de transferncia): usa a informao contida no
mRNA e traduz essa informao em uma sequncia de aa;
rRNA (RNA ribossmico): forma os ribossomos responsveis
pela traduo do RNA em protenas;
Transcrio do DNA

Pelczar et al., 2009


RNA E SNTESE PROTICA
(Transcrio)
2a base
U C A G

UUU (Phe/F) Fenilalanina UCU (Ser/S) Serina UAU (Tyr/Y) Tirosina UGU (Cys/C) Cistena
UUC (Phe/F) Fenilalanina UCC (Ser/S) Serina UAC (Tyr/Y) Tirosina UGC (Cys/C) Cistena
U UUA (Leu/L) Leucina UCA (Ser/S) Serina UAA "Ocre" (Stop) UGA "Opala" (Stop)
UUG (Leu/L) Leucina UCG (Ser/S) Serina UAG "mbar" (Stop) UGG (Trp/W) Triptofano

CUU (Leu/L) Leucina CCU (Pro/P) Prolina CAU (His/H) Histidina CGU (Arg/R) Arginina
CUC (Leu/L) Leucina CCC (Pro/P) Prolina CAC (His/H) Histidina CGC (Arg/R) Arginina
C CUA (Leu/L) Leucina CCA (Pro/P) Prolina CAA (Gln/Q) Glutamina CGA (Arg/R) Arginina
CUG (Leu/L) Leucina CCG (Pro/P) Prolina CAG (Gln/Q) Glutamina CGG (Arg/R) Arginina

1a
base AUU (Ile/I) Isoleucina ACU (Thr/T)Treonina AAU (Asn/N) Asparagina AGU (Ser/S) Serina
AUC (Ile/I) Isoleucina ACC (Thr/T)Treonina AAC (Asn/N) Asparagina AGC (Ser/S) Serina
A AUA (Ile/I) Isoleucina ACA (Thr/T)Treonina AAA (Lys/K) Lisina AGA (Arg/R) Arginina
AUG (Met/M) Metionina, Start ACG (Thr/T)Treonina AAG (Lys/K) Lisina AGG (Arg/R) Arginina

GUU (Val/V) Valina GCU (Ala/A) Alanina GAU (Asp/D) cido asprtico
GGU (Gly/G) Glicina
GUC (Val/V) Valina GCC (Ala/A) Alanina GAC (Asp/D) cido asprtico
GGC (Gly/G) Glicina
G GUA (Val/V) Valina GCA (Ala/A) Alanina GAA (Glu/E) cido glutmico
GGA (Gly/G) Glicina
GUG (Val/V) Valina GCG (Ala/A) Alanina GAG (Glu/E) cido glutmico
GGG (Gly/G) Glicina
Transcrio, Traduo e Sntese de Protenas

Traduo (DNA Protenas)

Participao do: mRNA e tRNA

cdon anticdon

Aminocidos
Protenas
Variabilidade em Microrganismos

A variabilidade est associada a duas propriedades:

Gentipo: potencial gentico total herdado;


Procariotos: cromossomo + qualquer DNA presente (p. ex.
Plasmdeos)
Eucariotos: cromossomo + DNA organelas (mitocndrias e
cloroplastos)

Fentipo: expresso de uma poro do gentipo;


Condies ambientais tambm podem influenciar o
fentipo
Ex. Azomonas spp.
- meio com sacarose: colnias mucosas e grandes

- meio sem sacarose: colnias secas e pequenas


VARIAES GENOTPICAS
Ocorre graas a dois mecanismos:
1) Mutaes
Alteraes (hereditrias) na sequncia de

nucleotdeos de um gene.
- Geralmente resultam em pequenas alteraes
genticas (uma em vrios milhes de clulas)

2) Recombinao gentica
Elementos genticos contidos em dois genomas

diferentes so reunidos numa unidade nova combinao de


genes.
- Provoca alteraes mais significativas.
VARIAES GENOTPICAS
Mutaes
Mudanas hereditrias na sequncia de
nucleotdeos de um gene
Diferentes tipos
Substituiode bases (troca de bases)
Mutaes de remoo (remoo de bases)

Adio ou perda de bases (protenas no funcionais)

Mutaes sem sentido (trmino da cadeia de aa)

Mutaes silenciosas (no acarreta efeito no fentipo)


AGENTES MUTAGNICOS

Agentes qumicos: anlogos de base

Radiaes: raios-X, luz ultra-violeta

Transposons
AGENTES MUTAGNICOS

Agentes qumicos: anlogos de base

Radiaes: raios-X, luz ultra-violeta

Transposons
Agentes mutagnicos e seu modo de ao
Agente Ao Resultado
Anlogos de base
5-bromouracil Substitui T, mas pareia Troca de AT por GC
com G
2-aminopurina Substitui A, mas pareia Troca de AT por GC
com C

Qumicos que reagem com o DNA


cido nitroso (HNO2) Desamina A e C Troca de AT por GC
Troca de GC por AT
Hidroxilamina (NH2OH) Reage com C Troca de GC por AT

Agentes alquilantes
Monofuncional (ex. sulfonato de Metilao de G, que passa Troca de GC por AT
etil metano) a parear com T
Bifuncionais (ex. gs mostarda, Ligao cruzada das fitas de Mutao pontual e
nitrosoguanidina) DNA, a regio cortada deleo
pela DNA polimerase
Corantes intercaladores
Acridinas, brometo de etdio Inserem-se entre nucleotdeos Microinseres e
microdelees
Radiao
Ultravioleta Formao de dmeros de Reparos podem levar
pirimidina erros ou delees
Radiao ionizante (ex. raios X) Formao de radicais livres que
quebram o DNA
AGENTES MUTAGNICOS

Agentes qumicos: anlogos de bases

Radiaes: raios-X, luz ultra-violeta

Transposons
Mutagnese por elementos
transponveis
* transposase
* repeties invertidas
* baixa frequncia: 10-5 a 10-7 por gerao (1/10,000,000)
RECOMBINAO GENTICA

Formao de um novo gentipo

Trocas de material gentico entre dois


cromossomos homlogos (crossing over)
eucariotos: MEIOSE
procariotos:RECOMBINAO
RECOMBINAO GENTICA

Transformao
Avery, MacLeod & McCarthy (1944)

Conjugao
Ledeberg & Tatum (1946)

Transduo
Zinder & Ledeberg (1952)
Recombinao Gentica
Transformao
Recombinao Gentica
Conjugao
Natureza:
- Contato entre clulas
- Plasmdeo ou cromossomo

Nogueira & Silva Filho, 2010


Recombinao Gentica
Transduo
Natureza:
- Vrus como vetor (bacterifagos ou fagos)
- Generalizada e Especializada