PRINCIPIOS DE FITOMEJORAMIENTO

CITOGENETICA

Ing. M.Sc. Jos Neciosup Gallardo

1
 MUTACIN

La definicin que dio De Vries (1901) de la mutacin era la de

cualquier cambio heredable en el material hereditario que no se puede
explicar mediante segregacin o recombinacin.

La definicin de mutacin a partir del conocimiento de que el material

hereditario es el ADN y de la propuesta de la Doble Hlice para
explicar la estructura del material hereditario (Watson y Crick,1953),
sera que una mutacin es cualquier cambio en la secuencia de
nucletidos del ADN

La mutacin es la fuente primaria de variabilidad gentica en las

poblaciones, mientras que la recombinacin al crear nuevas
combinaciones a partir de las generadas por la mutacin, es la fuente
secundaria de variabilidad gentica.

2
 nm CH3
0 .28 Timina
O
H H C
C H
N C
nm
0 .30 N
Adenina N C H N
C N C
H C C-1'
N C C O
N H
C-1'
1.8 n m

H H Citocina
nm
0 .29 N
H C
C H
O C
nm
Guanina 0 .30 N
N C N
H
C N H C
C-1'
C
N C C O
N N H
C-1' 0 .29
nm
H
1.8 n m

4
 MUTACIN SOMTICA Y MUTACIN EN LA LNEA GERMINAL

Mutacin somtica : afecta a las clulas somticas del individuo. Como

consecuencia aparecen individuos mosaico que poseen dos lneas
celulares diferentes con distinto genotipo. Una vez que una clula sufre
una mutacin, todas las clulas que derivan de ella por divisiones
mitticas heredarn la mutacin (herencia celular). Un individuo mosaico
originado por una mutacin somtica posee un grupo de clulas con un
genotipo diferente al resto, cuanto antes se haya dado la mutacin en el
desarrollo del individuo mayor ser la proporcin de clulas con distinto
genotipo. En el supuesto de que la mutacin se hubiera dado despus de la
primera divisin del cigoto (en estado de dos clulas), la mitad de las
clulas del individuo adulto tendran un genotipo y la otra mitad otro
distinto. Las mutaciones que afectan solamente a las clulas de la lnea
somtica no se transmiten a la siguiente generacin

Mutaciones en la lnea germinal: afectan a las clulas productoras de

gametos apareciendo gametos con mutaciones. Estas mutaciones se
transmiten a la siguiente generacin y tienen un mayor importancia desde
el punto de vista evolutivo.

5
NIVELES MUTACIONALES

Es una clasificacin de las mutaciones basada en la cantidad de

material hereditario afectado por la mutacin :

Mutacin gnica : mutacin que afecta a un solo gen

Mutacin cromosmica : mutacin que afecta a un segmento

cromosmico que incluye varios genes. Puede dar origen a cambios
cromosmicos estructurales

Mutacin genmica : mutacin que afecta a cromosomas completos

(por exceso o por defecto) o a juegos cromosmicos completos. Puede
dar origen a cambios cromosmicos numricos

MUTACIN ESPONTNEA E INDUCIDA

Mutacin espontnea : se produce de forma natural o normal en los

individuos

Mutacin inducida : se produce como consecuencia de la exposicin a

agentes mutagnicos qumicos o fsicos.

6
MUTACIONES GNICAS

Sustituciones de bases . cambio o sustitucin de una base por

otra en el ADN

- Transiciones : cambio de una purina (Pu) por otra purina, o bien

cambio de una pirimidina (Pi) por otra pirimida

- Transversiones : cambio de una purina (Pu) por una pirimidina

(Pi) o cambio de una pirimidina (Pi) por una purina (Pu)

7
Inserciones o adiciones y deleciones de nucletidos. se trata de
ganancias de uno o ms nucletidos (inserciones o adiciones) y
de prdidas de uno o ms nucletidos (deleciones). Tienen como
consecuencia cambios en el cuadro o pauta de lectura cuando el
nmero de nucletidos ganado o perdido no es mltiplos de tres:

- Duplicaciones: consiste en la repeticin de un segmento

de ADN del interior de un gen

- Inversiones : un segmento de ADN del interior de un gen se

invierte, para ello es necesario que se produzcan dos giros
de 180 , uno para invertir la secuencia y otro para
mantener la polaridad del ADN

- Transposiciones : un segmento de un gen cambia de

posicin para estar en otro lugar distinto del mismo gen o
en otro lugar del genoma.
TIPOS DE MUTACIONES GNICAS

En la siguiente tabla se resumen algunos tipos de mutaciones gnicas

en el ADN y en sus consecuencias en las protenas.

9
Es importante aclarar el concepto de mutacin silenciosa, una mutacin
silenciosa es cualquier alteracin en la secuencia de nucletidos del
ADN que no produce cambio en el fenotipo estudiado. Imaginemos que la
caracterstica externa o fenotipo analizado es simplemente la funcin de
un enzima, es evidente que existen mutaciones en la secuencia de
nucletidos del ADN que no producen cambios en la secuencia de
aminocidos, pero tambin hay mutaciones en el ADN que producen
cambios en la secuencia de aminocidos que no alteran la funcin del
enzima analizado. Ambas tipos de mutaciones son silenciosas, ya que
ninguna altera la funcin del enzima.

10
MUTACIONES ESPONTNEAS

Las principales causas de las mutaciones que se producen de forma

natural o normal en las poblaciones son tres:

Errores durante la replicacin

Lesiones o daos fortuitos en el ADN
Los elementos genticos transponibles

MUTAGNESIS INDUCIDA

Existen diferentes agentes fsicos y qumicos que producen mutaciones

en el ADN. Durante los primeros tiempos de la Gentica (1900 a 1930) los
investigadores trataron de producir artificialmente mutaciones sin
conseguirlo, hasta que Muller en 1927 y Stadler en 1928 demostraron los
efectos mutagnicos de los rayos X en Drosophila, maz y cebada

H. J. Muller recibi el Premio Nobel en 1946 por su descubrimiento de la

induccin de mutaciones mediante radiacin con rayos X.

11
Entre los agentes fsicos que producen mutaciones, estn las
radiaciones ionizantes (por ejemplo los Rayos X) y las
radiaciones no ionizantes (la luz ultravioleta)

Las radiaciones ionizantes producen los siguientes efectos a

nivel celular

Efectos genticos : alteraciones en los genes

Efectos citogenticos : alteraciones en los cromosomas: roturas

cromosmicas y translocaciones

Efectos fisiolgicos : alteraciones en las enzimas y hormonas.

Posteriormente, se demostr que otros agentes fsicos y

qumicos producan mutaciones.

12
ESPECIFICIDAD MUTACIONAL

La especificidad mutacional significa que muchos agentes

mutgenos tienden a producir un determinado tipo de mutacin,
por ejemplo:

Etilmetanosulfonato (EMS): produce fundamentalmente

transiciones GC?AT

Nitrosoguanidina (NG): produce esencialmente transversiones

GC?TA

Luz ultravioleta (UV): produce transiciones y transversiones.

13
 POLIPLOIDIA
Un individuo se dice diploide cuando en sus clulas somticas estn
presentes 2 juegos de x cromosomas cada juego, de forma que cada
uno de dichos x cromosomas son todos diferentes entre s. Al conjunto
de los x cromosomas, se les denomina genomio y nmero bsico al de
cromosomas que lo forman o sea x. Por tanto, una clula, tejido u
rgano es diploide cuando sus ncleos poseen los 2x cromosomas
(autosomas) tpicos del individuo a que pertenecen.

Un individuo que contiene en sus clulas somticas la mitad de los

cromosomas pertenecientes a su especie se llama monoploide o
haploide

Cuando la dotacin cromosmica normal de un individuo est

compuesta por varios genomios o juegos completos de cromosomas se
dice que es un poliploide. Si los genomios son iguales, el poliploide es
un autopoliploide y se lo denomina autotriploide, autotetraploide,
autopentaploide, n-ploide segn que sus clulas somticas tengan 3, 4,
5 n juegos idnticos de cromosomas. Sus nmeros cromosmicos
sern, por tanto 3x, 4x, 5x, nx, siendo x el nmero bsico antes definido.

14
En Gentica, la poliploida se define como el fenmeno por el cual se
originan clulas, tejidos u organismos con tres o ms juegos completos de
cromosomas de la misma o distintas especies o con dos o ms genomas de
especies distintas. Tales clulas, tejidos u organismos se denominan
poliploides.

Paleopoliploida en eucariotas.
Si los genomas de una especie poliploide provienen de la misma especie
ancentral, se dice que es autopoliploide o autoploide; si provienen de dos
especies ancestrales diferentes se dice que es alopoliploide o aloploide.
Dependiendo del nmero de juegos cromosmicos completos que posee la
especie se denomina como triploide (3X), tetraploide (4X), pentaploide (5X)
hexaploide (6X) y as sucesivamente, siendo X el nmero monoploide, no
debiendo confundirlo con el nmero haploide (ver terminologa).

15
La poliploida es un suceso bastante frecuente en la naturaleza,
si bien es ms frecuente en plantas y algas que en animales y
hongos. En plantas, la poliploida se encuentra muy extendida
dentro de las angiospermas (aproximadamente un 30% de las
especies son alopoliploides) y parece estar relacionada con la
latitud geogrfica. Generalmente, en plantas poliploides se da el
fenotipo gigas: se produce un aumento de tamao en los
individuos poliploides ya que poseen mayor nmero de clulas
que los individuos los diploides. En animales, el fenotipo gigas
no se da como tal, ya que el aumento de tamao que se da en
algunos grupos de insectos, crustceos y algunos anfibios y
peces poliploides es debido al aumento del volumen celular pero
no del nmero de clulas, siendo este ltimo el mismo en
individuos diploides y poliploides.

16
Si los genomios que componen la dotacin cromosmica del poliploide
no son iguales, entonces se llama aloploide. El aloploide rene en su
complemento cromosmico los de dos o ms especies diploides. Si una
especie aloploide est formada por dos genomios distintos, se llama
alotetraploide(G1 G1 G2 G2 ), si son tres lo genomios, se trata de un
alohexaploide (G1 G1 G2 G2 G3 G3 ), etc

La poliploida es muy comn en plantas, especialmente en

angiospermas, Actualmente, se piensa que entre el 30 y el 70% de las
Angiospermas son poliploides. Se sabe que las herbceas perennes
muestran mayor porcentaje de formas poliploides que las anuales y
stas menos que las leosas aunque las herbceas perennes y las
leosas se comportan de diferente manera en las regiones tropicales.

Planta N cromosmico Nmero Nivel de ploida.

bsico cromosmico
avena 7 42 6x
cacahuete 10 40 4x
caa de azcar 10 80 8x
Banana 11 22,33 2x,3x
Patata 12 48 4x
Tabaco 12 48 4x
Algodn 13 52 4x
Manzana 17 34,51 2x,3x
17
 Complementos cromosmicos en los Euploides que se indican; los
cuales pueden constituirse de una especie (autopoliploides) o de
especies diferentes
EUPLOIDE FORMULA CROMOSOMAS

Monoploide n (ABCD)
Diploide 2n (ABCD) (ABCD)
Triploide 3n (ABCD) (ABCD) (ABCD)
Tetraploide 4n (ABCD) (ABCD) (ABCD) (ABCD)
Autotetraploide 4n (ABCD) (ABCD) (ABCD) (ABCD)
Alotetraploide 4n (ABCD) (ABCD) (ABCD) (ABCD)

18
Cmo se pueden obtener formas poliploides en plantas?

1.- Regeneracin de tejidos: Cuando se producen tejidos u rganos a partir de un

callo de cicatrizacin producido por una herida puede ocurrir que sean poliploides.
La herida en s no es la causa de la poliploidizacin sino que la regeneracin se
hace a partir de clulas que ya son poliploides como consecuencia de fenmenos
de endopoliploida (endomitosis o endorreduplicacin). Las Solanceas responden
bien a este tratamiento experimental

2.- Choques trmicos: La aplicacin de un choque trmico que afecte a las

primeras divisiones del embrin puede producir poliploida total o parcial

3.- Sustancias qumicas: La sustancia por excelencia utilizada para inducir la

poliploida es la colchicina. Es un alcaloide que se encuentra en las semillas y en
los bulbos de Colchicum autummnale L . La colchicina afecta a las clulas en
divisin de tal forma que a la separacin de las cromtidas de cada cromosoma no
sigue la migracin de las mismas hacia los polos opuestos porque el efecto de la
misma es inhibir la formacin del huso acromtico. Al no haber movimiento de las
cromtidas a los polos no se establecen las corrientes citoplsmicas que
determina la formacin de la membrana celular que se formar entre las dos
clulas hijas; por tanto la mitosis que se produce bajo la influencia de la
colchicina se denomina c-mitosis dando lugar a la duplicacin del complemento
cromosmico completo. La colchicina se puede aplicar a semillas en germinacin,
plntulas o plantas adultas.

19
La figura que aparece a continuacin muestra la aplicacin de colchicina en las
yemas caulinares con el objeto de poliploidizar el meristemo.

20
En la siguiente figura se observa cmo se pueden producir dos clulas tetraploides
a partir de una diploide por accin de la colchicina.

21
Identificacin de los poliploides

La identificacin inequvoca de los poliploides debe realizarse mediante el

anlisis cromosmico de los mismos aunque, existen caractersticas
morfolgicas, citolgicas y fisiolgicas que concurren en la identificacin de los
mismos

Entre las caractersticas morfolgicas ms sobresaliente cabe citar las formas

gigas (gigantismo) llamadas as porque todos los rganos de la planta aumentan
de tamao as como el color de las hojas que aparece ms oscuro. Una
caracterstica importante de las formas gigas, si se las compara con las
diploides de las que derivan es que el tamao de sus estomas es mayor pero el
nmero de ellos es menor. Desde el punto de vista fisiolgico, se ha observado
que la velocidad de desarrollo de las formas gigas es menor que la de los
diploides.

22
Origen y meiosis de los autopoliploides

La poliploida puede aparecer espontneamente como consecuencia de

fallos en la meiosis que conducen a la formacin de gametos no
reducidos, por la fecundacin de un vulo por dos gametos masculinos,
por la formacin de quimeras o mosaicos poliploides que, afectando a la
lnea germinal, dan origen a gametos poliploides, por duplicacin
cromosmica de un diploide o por hibridacin esto es el cruzamiento
entre dos especies de plantas seguida de un proceso de diplodizacin y
evolucin del hbrido que conduce a la formacin de una nueva especie.
Ambos mecanismos, fallos en la meiosis e hibridacin son comunes en
plantas pero no en animales debido a que las plantas (en su mayora)
carecen de cromosomas sexuales, toleran mejor que los animales los
desbalances genticos y se pueden propagar vegetativamente

Un autotriploide puede surgir de la fusin de una gameta haploide (n)

con una gameta no reducida y por tanto 2n, el cigoto ser 3n. Los
triploides puede tambin originarse a partir de un cruzamiento en el que
uno de los padres es diploide (y por ende produce gametos, n) y el otro
es tetraploide (produce gametas 2n). La meiosis de los autotriploides
origina gametas desbalanceadas debido a la presencia de un set
cromosmico adicional razn por la cual estos autopoliploides son
estriles y se propagan vegetativamente. Ejemplos de autotriplodes lo
constituye la banana (Musa), la sanda sin semilla, etc.
23
La sanda sin semilla resulta del cruzamiento entre un parental
femenino tetraploide (4n) productor de la semilla y de vulos 2n con
una planta masculina (diploide 2n) productora de polen. Las plantas
tetraploides se obtienen mediante tratamiento de yemas terminales de
plantas diploides con colchicina producindose la duplicacin de los
cromosomas. El polen haploide (n) procedente de las flores masculinas
de la planta diploide (2n) fertiliza a la ovoclula diploide (2n) dentro del
ovario de la flor femenina del parental tetraploide (4n) dando origen a
un cigoto (3n) que se desarrollar en un embrin dentro de la semilla.
La siembra de esta semilla dar origen a plantas que producirn
sandas triploide (3n). En el siguiente grfico se muestra el
cruzamiento que da origen a la planta de sanda triploide.

24
La semilla triploide germinar y dar origen a una planta que formar
flores masculinas y femeninas triploides que no producirn granos de
polen y voclula viables debido a que poseen tres juegos
cromosmicos y uno de los juegos no podr aparear durante la meiosis.
Por tanto no se producir fertilizacin. Cuando el agricultor compra
semilla de sanda, compra dos clases semillas; una procedente de la
planta diploide frtil y otra procedente de la planta triploide estril.
Estas ltimas son ms largas y, ambos tipos de semilla se plantan en la
vecindad. Las flores masculinas de la planta diploide proporcionarn
polen haploide el cual polinizar (pero no fertilizar) la planta triploide.
La polinizacin en s, induce el desarrollo del fruto sin que exista
fertilizacin, por tanto la sanda sin semilla es un fruto sin semilla.

25
Los autotetraploides se originan como consecuencia de la duplicacin
cromosmica de un diploide. Esto puede ocurrir de forma natural durante
el ciclo de vida de la planta o bien mediante la aplicacin de calor, fro
de alguna sustancia que actan sobre el huso acromtico como es la
colchicina. En la figura que aparece a continuacin puede observarse la
formacin de un autotetraploide a partir de una planta diploide que ha
formado gametas sin reducir. El cigoto tetraploide es producto de la
autofecundacin de las gametas no reducidas formadas por el parental
diploide. Los autotetraploides son frtiles porque salvo raras
excepciones - sto es cuando no estn completamente diploidizados- las
meiosis son regulares y producen gametos balanceados. Ejemplos de
autotetraploide son entre otros la alfalfa, la patata, el algodn, el caf, el
cacahuate, etc.

26
 ALOPOLIPLOIDES

Como se dijo anteriormente, la hibridacin (cruzamiento entre dos especies)

seguida de duplicacin del hbrido estril es una forma de especiacin. Los
aloploliploides renen en sus genoma los genomios de al menos dos especies
diferentes (G1G1 G2G2 )

Uno de los objetivos de la mejora ha sido el desarrollo de alopoliploides que

poseyeran caracteres nuevos que no estuvieran presentes en otras especies. Entre
los alopoliploides que ms xito ha tenido se halla el Triticale que result de la
polinizacin del trigo (Triticum aestivum, 2n = 6x = 42 cromosomas) con centeno (
Secale cereale, 2n = 2x = 14 cromosomas). Trigo y centeno son dos especies
relacionadas (pertenecen a la misma tribu, Triticinae). El objetivo del experimento
era sintetizar un hbrido que poseyera las buenas cualidades productivas del trigo
con la rusticidad del centeno obtenindose un cereal, el Triticale con un nmero
cromosmico de 2n = 6x = 42 2n= 8x = 56 cromosomas. Volveremos luego para
comprobar cmo se obtuvo el Triticale

Especiacin del trigo (Triticum aestivum):

El trigo ha jugado un papel importante en el desarrollo de la civilizacin mundial.

La domesticacin del trigo ha sido uno de los hechos ms importantes que ha
ocurrido ya que permiti que el hombre del Neoltico dejara de ser nmade
(cazador-recolector) para asentarse en un sitio determinado. Ahora veremos cmo
se sintetiz el trigo, alopoliploide que ha llegado hasta nuestros das.

27
28
 ORIGEN CITOGENETICO DEL TRIGO PARA PASTAS Y PANIFICACION

Triticum monococum Triticum (aegilops) speltoides

BB
AA
X 2n = 14
2n = 14

AB
Estril, por no haber
2n = 14 homologa cromosmica

Colchicina en dosis y tiempo

AABB

Triticum durum (Trigo para pastas) 4n = 28 Frtil por haber homologa cromsomica

29
 Triticum durum Triticum squarrosa

AA BB DD
4n = 28 2n = 14
X

ABD

3n = 21
Estril, por no haber
homologa cromosmica

Colchicina en dosis y tiempo

AABBDD

Triticum aestivum (Trigo para panificacin) 6n = 42 Frtil por haber homologa cromsomica

30
 ORIGEN CITOGENETICO DE LOS TRITICALE PARA PASTAS Y PANIFICACION

Triticum durum Secale cereale

RR
AABB
X 2n = 14
4n = 28

ABR
Estril, por no haber
3n = 21 homologa cromosmica

Colchicina en dosis y tiempo

AABBRR
Triticale exaploide (para pastas) 6n = 42 Frtil por haber homologa cromsomica

31
 Triticum aestivum Secale cereale

X RR
AABBDD
6n = 42 2n = 14

ABDR
Estril, por no haber
4n = 28 homologa cromosmica

Colchicina en dosis y tiempo

AABBDDRR

Triticale octaploide (para panificacin) 8n = 56 Frtil por haber homologa cromsomica

32
A. Espiga de trigo panadero (Triticum aestivum);.
B. Espiga de centeno (Secale cereale);
C. Triticale (Triticale).
33
El trigo duro T. turgidum var durum deriva del trigo salvaje emmer de
Siria. Este trigo tambin era tetraploide y provena del diploide einkorn
T.monococcum (2n = 2x = 14 cromosomas, AA) y de A. speltoides (2n =
2x = 14 cromosomas, BB). El hbrido estril a travs de una duplicacin
natural de sus cromosomas se transform en tetraploide. Una mutacin
en este material produjo que las glumas se separaran con facilidad del
grano. As T. turgidum var durum (se trata del trigo con el que hacen los
diferentes tipos de pasta) es un derivado del emmer en que se aprecia
la fcil separacin del grano de la paja

El trigo tetraploide contiene dos protenas que combinan bien para

formar un complejo que se conoce como glten. Es debido al gluten que
la harina de trigo cuando se mezcla con agua y se amasa y luego se
agrega la levadura se levanta y forma barras de bollos de pan firme.
Las levaduras en la masa fermentan liberando CO2 que queda atrapado
en la masa glutinosa y proteica. El horneado de la masa seca el almidn
y desnaturaliza el gluten. Cuando la masa se cocina, el CO2 se expande
en grandes burbujas y, sta es la razn por la que el pan es poroso y su
textura esponjosa. El maz no puede producir una buena masa para pan
porque carece de gliadinas una de las dos protenas del glten. Por esta
razn el pan hecho con harina de maz se rompe con facilidad.

34
Dos lonchas de pan hechas con maz (izquierda) y con trigo (derecha).El
pan de maz no forma una masa firme porque carece de gliadinas

35
Otro ejemplo de aloploide lo constituyen las diferentes variedades de Brassica

Brassica oleracea presenta una amplia gama de variedades y puede formar hbridos
interespecficos

Las variedades de Brassica oleracea (2n = 2x =18) son muy diferentes. Entre ellas
destacan: el repollo, la coliflor, el brcoli, las coles de Bruselas, etc. Un hbrido
entre dos de ellas se puede apreciar en la siguiente figura:

A. Broccoli, B. Brocoflor and C. Coliflor. Broccoflower (B) es un hbrido entre brcoli (A) y
coliflor.(C). En los tres casos se come la inflorescencia inmadura y, en el caso del brcoli tambin
se come el pednculo central de la inflorescencia.

36
Raphanus sativus
37
 HAPLOIDIA
Los haploides poseen slo un juego de cromosomas (n = 1) y es el
mismo que el de las gametas (ovoclula polen). Los haploides
pueden diferenciarse de los diploides usando marcadores
moleculares que estn ligados a un carcter de inters o bien pueden
diferenciarse por sus caractersticas fsicas. Se utilizan en mejora
para obtener lneas puras que sean homocigticas. La obtencin de
lneas puras pasa por tratar las regiones meristemticas del haploide
con colchicina con el objeto de duplicar el nmero cromosmico

Los dobles haploides tienen dos juegos de cromosomas idnticos a

los del haploide y pueden formar ovoclulas y granos de polen viables

La cebada, el centeno, el sorgo, el arroz, el maz, el algodn, la

alfalfa, la festuca, el tabaco, el girasol, etc. El xito en la obtencin
de haploides depende de muchos factores. Los tres factores ms
importantes son: el genotipo de la planta que se utilizar como
donante y a partir de la cual se desea obtener haploides, las
condiciones de cultivo de la planta (fotoperodo, intensidad de luz,
temperatura), as como el medio de cultivo utilizado. Para tener
posibilidades de obtener haploides la planta debe ser sana y vigorosa.

38
Ventajas de la Haploida

La utilizacin de haploides en programas de mejora acelera la

obtencin de la nueva variedad porque se llega ms rpidamente a la
homocigosis ya que se obtienen doble haploide en pocos aos luego de
multiplicar los genotipos diploides homocigticos derivados del
tratamiento con colchicina de haploides seleccionados. Por regla
general se necesitan ms de cinco generaciones de autofecundacin
para llegar a la homocigosis (el numero de aos depende del tipo de
cultivo de que se trate, del nmero de caracteres que se quieren
mejorar, etc) En cebada, los mejoradotes utilizan el mtodo del
pedigree y suelen tardar alrededor de siete aos para tener listo una
determinada variedad para el mercado. Si se emplean haploides este
tiempo puede reducirse a dos aos

En los haploides es ms fcil distinguir los genotipos recesivos. La

haploida tambin puede utilizarse para obtener plantas masculinas o
femeninas a partir de una planta dioica como el esprrago.

39
Desventajas de la Haploida :

Una de las desventajas de la haploida es que las variedades responden

diferentemente al medio de cultivo. As, el medio que es adecuada para muchas
de ellas puede matar a otras. La respuesta a la colchicina tambin vara dentro
de una misma variedad

Se observa tambin que, algunos caracteres como albinismo suelen fijarse

utilizando el mtodo de los dobles haploides. Aparte, el empleo de doble
haploides en programas de mejora es muy caro. Sin embargo los beneficios
exceden los costes de produccin. En la figura pueden verse una planta albina
entre dos normales.

40
Produccin de haploides :

Los haploides pueden apareces de forma natural como son

aquellos que surgen de procesos de partenognesis o bien
mediante cualesquiera de los procesos que se citan a
continuacin:

1. Eliminacin cromosmica

2. Cultivo de Antera

3. Cultivo de Microsporas

41
1. Eliminacin cromosmica

La eliminacin cromosmica se ha utilizado en cebada. Para ello se cruza

Hordeum vulgare como parental femenino con Hordeum bulbosum como parental
masculino. Como se trata de un cruce interespecfico la formacin de semilla es
escasa. No obstante algunas se obtienen. En los das subsiguientes se aplican
hormonas para facilitar que los embriones formados se divida pero debido a la
falta de apareamiento entre los cromosomas de las dos especies los cromosomas
de bulbosum son eliminados quedando slo en los embriones haploides los
cromosomas de vulgare. Transcurrido unos das los embriones haploides se pasan
a medio conteniendo gar y nutrientes y posteriormente a tierra para que
afiancen. El tratamiento con colchicina para diploidizarlos se hace
posteriormente.

Plntulas de cebada
Semillas haploides de
Recoleccin del polen de cebada. tratadas con colchicina
cebada iniciando su
desarrollo.
42
2.- Cultivo de Anteras

Esta tcnica consiste en el cultivo de anteras sobre un medio especial

con la finalidad de obtener plntulas haploides

43
Esta tcnica fue descubierta en 1964 por Guha and Maheshwari. Se
puede emplear en aproximadamente unas 200 especies entre las que
se citan: tomate, arroz, tabaco, cebada y geranio Las ventajas que
presenta la utilizacin de esta tcnica son entre otras las siguientes:

- Tcnica relativamente simple

- Fcil de inducir divisiones celulares en las clulas inmaduras
que darn lugar al polen. Una proporcin importante de
anteras usadas en cultivo de tejido responden a esta
metodologa
- Se puede obtener un nmero grande de haploides de forma
rpida

Entre las desventajas que suelen citarse se cuentan las siguientes

- En algunas especies la mayora de las plantas obtenidas no son

haploides.
En cereales se obtienen muy pocas plantas normales (con
clorofila). La mayora de ellas son albinas o quimeras
(albina- normnal)
-- Es tediosos remover las anteras sin daarlas.

44
3.- Cultivo de Microsporas

Las microsporas son granos de polen inmaduros. Para obtenerlas se procede a

la esterilizacin superficial de botones florales cerrados. Posteriormente se los
homogeniza con un buffer especial para que liberen las microsporas, se filtra y
se centrifuga para obtener un pellet que contiene las microsporas las que se
resuspenden en medio de cultivo. Las microsporas e cuentan al microscopio
utilizando un citmetro para saber cuntas microsporas se hallan por campo. Se
plaquea a una densidad de 100.000 clulas/ ml. El cultivo de microsporas se
incuba durante un mes en oscuridad para inducir mitosis. Muchos mtodos de
cultivo de microsporas utilizan un tratamiento con calor para sincronizar las
mitosis. Por tanto, estas clulas se comportan como si fueran ovoclulas y
desarrollan embriones. La tcnica de cultivo de microsporas es muy eficiente, a
punto tal que se producen miles de plantas al mismo tiempo hacindose casi
imposible para los mejoradotes manejarlas.

Las flechas muestran los botones Las flechas muestran microsporas en

florales que se esterilizan para obtener cultivo de un da
microsporas.
45
Microsporas dividindose Embrin de once das.

46
 Aneuploides en donde, pueden faltar o haber cromosomas de mas, de
cualquiera de los normales de un diploide

ANEUPLOIDE FORMULA CROMOSOMAS

Monosmico 2n 1 (ABCD) (ABC)

Trismico 2n + 1 (ABCD) (ABCD) (D)

Tetrasmico 2n + 2 (ABCD) (ABCD) (D) (D)

Doble trismico 2n + 1 + 1 (ABCD) (ABCD) (A) (D)

Nulismico 2n 2 (ABC) (ABC)

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 CELULA EN DIVISION POR MEIOSIS QUE PRODUCE UN GAMETO MONOSOMICO Y EL OTRO
TRISMICO, DEBIDO A LA NO DISYUNCION DEL CROMOSOMA D

A B C
Monosmico ( n -1)

A B C D

A B C D
A B C D
D
Trismico (n + 1)

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