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BIOQUIMICA LABORATORIO
SEMANA 13
REACCIONES DE TRANSAMINACION
http://youtu.be/w6XUf7RHJKM
https://www.youtube.com/watch?v=g71IWP2O5pg
https://www.dnalc.org/resources/animation
s/gelelectrophoresis.html
Papel Recorrido del
solvente
Muestra
solvente
PROCEDIMIENTO:
OBTENCIN DE LOS EXTRACTOS DE ENZIMAS:
1- Prepare un extracto de hgado en la proporcin 1:5 en
masa volumen con buffer fosfato pH 7,4. Utilice bao de
hielo para realizar la operacin.
Incubar todos los tubos por 45 minutos a 37C. Retirar los tubos del bao de
Mara y agregar 6ml de alcohol etlico a cada tubo. Agitar y esperar por dos
minutos. Centrifugar a 2500 rpm por 3 minutos y usar los sobrenadantes
para la cromatografa.
Cromatografa
Marcar a 2 cm del borde del papel una lnea suave con un
lpiz. Marcar en esa lnea seis puntos separados por 2 cm
cada uno. Colocar en cada punto cinco gotas del respectivo
sobrenadante y en las dos ltimas 5 gotas de alanina y
cinco de glutamato respectivamente. Dejar secar Colocar el
papel en una cmara de cromatografa con una mezcla de
propanol: agua en la proporcin de 8: Dejar correr hasta que
el nivel lquido le falte 1 cm para llegar al extremo de la
placa. Marcar el nivel al que alcanz el lquido con un lpiz y
dejar secar.
Aplicar con un spray una solucin de ninhidrina al 0,1% e
butanol. Colocar a la estufa por 10 minutos. Marcar las
manchas obtenidas.
RESULTADOS
CUESTIONARIO