Tcnicas histolgicas

1- Escolha do tipo de corte

2- Fixao
3- Incluso
4- Corte em micrtomo
5- Colorao
6- Microscopia
 Principais coloraes
Existem diversos tipos de colorao entre eles:
Hematoxilina frrica
Impregnao com prata
cido peridico de schiff
Giemsa
Hematoxilina
Eosina
 A colorao HE muita utilizada pela praticidade e
ao conjunta

Hematoxilina cora o ncleo e outras estruturas

cidas (principalmente regies citoplasmticas ricas
em RNA)

Eosina cora o citoplasma

Corte de lngua corado com HE
Corte de tecido conjuntivo (tendo) corado com HE
 GIEMSA

Sistema para colorao de

clulas em esfregaos de
sangue perifrico, medula
ssea ou para estudo
citolgico de elementos
celulares colhidos por
puno, raspagem ou
concentrados de
elementos celulares de
derrames cavitrios

Eosinfilo em esfregao de sangue perifrico

(colorao Giemsa)
 HEMATOXILA FRRICA

Mtodo muito utilizado em

diagnstico Parasitolgico
de protozorios.

Trofozoto e cisto de E. Coli (colorao Hematoxilina frrica)

 PAS

uma colorao muito

utilizada quando se
deseja evidenciar
estruturas ricas em
carboidratos, como
depsitos de glicognio
e membrana basal

Membrana Basal de clulas renais (colorao PAS)

 IMPREGNAO COM PRATA

Tcnicas que utilizam sais de

prata para demonstrar fibras
reticulares do tecido conjuntivo
e Cromossomos.

Corte de linfonodo demostrando as fibras reticulares

(colorao de Del Rio Hortega (DRH)
Histoqumica e Citoqumica

So mtodos utilizados na identificao e localizao de substncias

tanto em cortes histolgicos como em clulas cultivadas. Podem
identificar ons, cidos nuclicos, protenas, polissacardeos, entre
outros.
Esquema demonstrando o princpio terico da histoqumia
e citoqumica
Depsitos de Glicognio (rosa) revelados por tcnica
de histoqumica
Imunofluorescncia
 Hibridizao In situ

Consiste na utilizao de sondas para reconhecer

determinadas seqncias de DNA e RNA.
Tipos de Microscopia

Microscopia de Luz
Microscopia por contraste de fase
Microscopia polarizada
Microscopia por Fluorescncia
Microscopia Confocal
Microscopia Eletrnica de Transmisso
Microscopia Eletrnica de Varredura
 Resoluo da Imagem
A resoluo uma forma de quantificar o
quanto prximos dois pontos podem ficar e
ainda assim serem visivelmente
determinados.
Tipos de Microscopia

Microscopia de luz
Permite a visualizao de
espcimes atravs de
feixes de luz. Seu poder
de resoluo mximo
de cerca de 0,2m
Microscopia de
contraste de fase
Permite a
observao de
estruturas sem
colorao

Esfregao de crebro com cistos de Toxoplasma

(A) viso fresco; (B) contraste de fase
Microscopia de
polarizao
Alguns equipamentos
contam com um
equipamento chamado
polarizador. Isto permite
a visualizao de
estruturas com alto grau
de orientao (celulose,
colgeno, cristais,
microfilamentos entre
Fibras de colgeno em luz
outros. polarizada.
 (A)

Microscopia de
fluorescncia
Esta tcnica baseia-
se na ligao de
substncias (B)
fluorescentes com
determinadas
molculas presentes
na clula e na matriz.

(A) Ncleo e fibras de microtubos; (B) Melancito

Microscopia Confocal
Um feixe de laser varre todos os
pontos do plano focal do material
biolgico. A luz emitida pela
preparao atravessa um
pequeno orifcio e forma uma
imagem bidimensional. A srie de
imagens de diferentes planos
focais utilizada para reconstruir
uma imagem tridimensional do
objeto em um computador
Microscopia eletrnica
Baseia-se na interao
entre os componentes do
tecido e um feixe de
eltrons. Existem
basicamente 2 tipos
- M.E. de transmisso
- M.E. de varredura Microscpio eletrnico Carl Zeiss
M.E. de transmisso
Permite um aumento
de at 400 mil
vezes.

Esquema de funcionamento
de um M.E. de transmisso
M.E. de transmisso de neurnio
M.E. de transmisso de neurnio
Vrus observados pela M.E. de transmisso
M.E. de varredura
Fornece imagens
pseudotridimensionais
Detalhe de formiga ampliada por M.E. de varredura
Leuccito atravessando o endotlio de vnula
Detalhe da traquia ampliada por M.E. de
varredura
Regras bsicas de apresentao

Sempre que for inserida uma fotografia com corte histolgico deve-
se indicar:
1- O tipo de tecido
2- O ideal a utilizao de uma escala
3- Caso esta no possa ser utilizada, indica-se o aumento (por exemplo
X100)
4- Caso o corte seja corado, deve-se indicar a colorao utilizada
Corte de Traquia aumento de 400 vezes (HE).
ou
Corte de Traquia corado com HE (X 400)
Alguns problemas comuns

rgos mal fixados

Corte com ngulo errado
Bateria de colorao ineficiente ou
desregulada
Microscpio com pouca resoluo
Lentes sujas (por exemplo com leo)
Artefatos