MICROBIOLOGIA

TENS.
 El papel de lo
infinitamente pequeo
en la naturaleza es
infinitamente grande

Luis Pasteur
 Postulados de Koch

1 El microorganismo debe de estar presente en todos los

individuos enfermos.
2. El microorganismo debe poder aislarse del hospedador y ser
crecido en cultivo puro.
3. La inoculacin del microorganismo crecido en cultivo puro a
animales sanos debe provocar la aparicin de sntomas
especficos de la enfermedad en cuestin.
4. El microorganismo debe poder ser reaislado del hospedador
infectado de forma experimental.
Algunas consideraciones
importantes:
Las bacterias presentan una pared celular,
con excepcin de los Mycoplasmas, por
fuera de la clula que otorga rigidez y
proteccin en medios osmticamente
inadecuados.
La membrana citoplasmtica posee una
estructura trilaminar tpica y est formada
por lpidos, protenas y pequeas cantidades
de hidratos de carbono.
 Se reproducen por fisin binaria o divisin
simple.

No poseen un ncleo verdadero sino un

cromosoma de DNA que se encuentra, ms
o menos libre, en el citoplasma.

No poseen organelas rodeadas por

membranas.
Poseen grnulos citoplasmticos.

que son acumulaciones de

materiales de reserva como
polisacridos, lpidos y
polifosfatos.
 La unidad de medida de las
bacterias es el micrmetro,
tambien llamada micra o micrn, se
abrevia um y equivale a la milsima
de un milimetro (millonsima parte
de un metro).

Una bacteria tipica mide

alrededor de 1 um, es decir si
pusiramos 500 en fila serian del
tamao del punto final de esta
oracin.
 Clula humana Bacteria (clula
(eucariota) procariota)
Ncleo delimitado por una Zona nuclear no delimitado
membrana. por membrana.

DNA en varias molculas DNA en una molcula

lineales (cromosomas) circular.

Tiene mltiples organelos Muy pocos organelos

(mitocondrias, lisosomas, (ribosomas)
golgi.)

Tamao de 10 a 50 um. Tamao de 0.4 a 2 um.

Es parte de un organismo, Tiene vida propia.

no tiene vida propia
OTROS TIPOS DE OBSERVACIONES
MICROSCPICAS:

Observacin al fresco
Fondo oscuro
Contraste de fases
Microscopia electrnica
Epifluorescencia
Streptococcus mutans
MICROBIOLOGIA
 Aspecto microscpico y macroscpico
Tamao
Forma
Configuracin
Captacin de colorante
Crecimiento
Propiedades metablicas
Antigenicidad
Genotipo
 Tamao: 0.1 20 um
Promedio general: 1 um
Lo usual es de 0,5 2 um
Existen bacterias gigantes (> 0,5 mm)
Mycoplasma spp. 0.2 um
Ventaja:
Metabolismo activo
Alta tasa de replicacin
Muy activos y competitivos
 FORMA CELULAR BACTERIANA

Clulas cocceas:
Son esfricas o aproximadamente esfricas
(levemente ovoides)
Reciben el nombre de cocos y su nombre cientfico
generalmente termina en coccus.
Clulas bacilares:
Son alargadas, pudiendo presentar diferencias
entre una especie bacteriana y otra (bacilo
gruesos, delgados, filamentosos, de extremos
rectos, redondeados o aguzados. De bordes
paralelos o no, etc.).
Clulas curvas:

Son alargadas y se curvan en el espacio, siguiendo

un eje de torsin imaginario.
Pueden constituir una curva incompleta (forma de
coma) o varias curvas (formas helicoidales).
 Cuando un microorganismo presenta mas de
una forma en su ciclo biolgico.
Depende del medio ambiente
Haemophilus influenzae.
AGRUPACION
Despus de su divisin, las
bacterias suelen quedar unidas en
forma caracterstica, a lo que llamamos
agrupacin bacteriana, que tambin es
una ayuda en la identificacin de las
especies.
Principales agrupaciones de las
clulas cocaceas:

Diplococos: Pares de clulas.

Estreptococos: Cadenas de clulas
largas o cortas.
Estafilococos: Racimos de clulas.
Ttradas: Cuatro clulas que
forman cuadrado.
Paquetes (sarcina): Paquetes en forma de
cubo.
Principales agrupaciones de las
clulas bacilares:

Diplobacilos: pares.
Estreptobacilos: Cadenas de clulas.
Empalizada: Unidas por sus bordes
ms largos
Letra china: Las clulas forman
ngulos.
 ESTRUCTURA BACTERIANA

Material nuclear:
* No se encuentra rodeado de membrana
(clula procariota).
* Est formado por una doble hebra de ADN,
de gran longitud, que se considera como
un solo y largo cromosoma (aprox.1mm de
longitud).
* Se encuentra muy enrollado.
* Es circular (cerrado en sus extremos).
* A lo largo de este cromosoma se
encuentran los genes que codifican todas
las propiedades de la bacteria (genotipo)
Estructuras citoplasmticas:
*Estructuras membranosas relacionadas
con la fotosntesis o metanognesis.
*Grnulos citoplasmticos que cumplen
funciones nutricias o energticas (lpidos,
glicgeno)
*Gran cantidad de ribosomas, donde se
efecta la sntesis de protenas.
Membrana citoplasmtica (MC):
*Llamada tambin membrana interna en las
bacterias Gram negativas.
*Tiene la estructura tpica de las membranas
biolgicas, formadas por una bicapa de fosfolpidos
en la cual se insertan protenas.
*Constituye una barrera osmtica que retiene
metabolitos y iones.
Peptidoglicano:
*Compuesto hidrocarbonado con algunos
aminocidos en forma de cadenas cortas.
*Es una estructura rgida y firme que
protege a la bacteria
*Otorga la forma a la bacteria.
Membrana externa (ME):
Tambin constituida por fosfolpidos y protenas.
Pero se diferencia de la Membrana Celular porque:
*La capa externa de fosfolpidos esta reemplazada
por lipopolisacridos (LPS).
*Tiene funciones como la filtracin de substancias
de bajo peso molecular, adherencia a superficies,
resistencia a compuestos antibacterianos.
Lipopolisacarido:
Llamado tambin endotoxina
Se encuentra solamente en la envoltura de
bacterias Gram negativas.
Responsable de los efectos biolgicos en las
infecciones por Gram negativos
(pirogenicidad (aumento T), activacin de
la coagulacin, alteraciones de la presin
sangunea, leucopenia (disminucin
glbulos blancos), leucocitosis y
alteraciones de la glicemia).
Espacio periplasmtico (EP):
Espacio ubicado entre la MC y la ME.
Contiene un conjunto de enzimas
degradativas.
Cpsula y glicocalix:
Acumulacin externa de compuestos
hidrocarbonados.
Protege a la clula de la fagocitosis.
El glicocalix favorece la adherencia a tejidos.
Flagelos:
Estructuras largas de naturaleza proteica.
Responsables de la movilidad bacteriana.
Fimbrias (pili):
Estructuras extracelulares rgidas
De menor tamao que los flagelos
Participan en la adherencia bacteriana.
Transferencia de material gentico.
La adherencia es un importante factor en la
produccin de procesos infecciosos.
 ESPORA
(ENDOSPORA)
**Son formas de resistencia que
desarrollan ciertos bacilos y cocos Gram
positivos.
( Bacillus, Clostridium ).
**Se produce en determinadas
circunstancias como frente a carencia de C,
N, P.
**La esporulacin permite la supervivencia
indefinida de la bacteria en el medio
ambiente
**La forma y posicin de la espora en la
bacteria, son caracterstica de cada
especie.
 Sus caractersticas son:
Alta resistencia a agentes ambientales.
Presencia de sales de calcio.
Presencia de protenas especiales.
Ausencia de agua.
Refractariedad a la tincin.
Mantencin indefinida en forma latente

Componentes de la espora:
Membrana
Corteza (peptidoglicano)
Cubierta (capa cortical), formada por protena
estructural.
Exosporio, componente suelto, externo de
composicin lipoproteica.
 Estructura exclusiva de las bacterias
Elemento clave para la rigidez, replicacin y
supervivencia.
Componente bsico: pptidoglicano
Composicin qumica (parte glucidica parte
peptdica)
Aminoazucares: N-acetilglucosamina(NAG) y
acido N-acetilmurmico(NAM)
Cadenas tetrapeptdicas unidad a NAM
Puentes peptdicos
 Morfologa constante
Resistencia a presiones osmticas
Participa en la divisin bacteriana
Permite la difusin de metabolitos a la
membrana plasmtica
Impide el paso de macromolculas (>10nm)
Contiene un factor patgeno en Gram
Sustrato donde actan B-lactamicos
Diferenciacin entre Gram y Gram +
 1884, Christian Gram, bilogo dans. Tratando de
establecer la diferencia entre dos bacterias
causantes de neumona: Klebsiella pneumoniae y el
Neumococo; de manera accidental descubri la
tincin de Gram.

Tincin de Gram: permite observar con facilidad los

microorganismos, gracias a la tincin de su pared;
diferenciando entre aquellos que toman su colorante
principal, Cristal Violeta (Bacterias Gram +), de las
que no lo toman (Bacterias Gram Negativas

Bacterias Gram Positivas Pared Gruesa

Bacterias Gram Negativas Pared Delgada
 Debido a la dificultad para observar las
clulas bacterianas en forma directa, se
emplean procedimientos de tincin que
establecen un mayor contraste entre la
bacteria y el medio circundante.
Tincin de Gram es un procedimiento que
diferencia dos grupos de bacterias lo que
hace ms fcil su identificacin:
Gram positivas
Gram negativas
El principal peligro de las bacterias Gram negativas es que
estas infecciones no responden a los tratamientos
antibiticos estndar.

La membrana exterior de esta bacteria resiste los efectos

de muchos tipos de antibiticos porque es impermeable a
stos.
Etapas de la Tincin de Gram:

Tincin con Violeta Genciana

Fijacin del colorante con
solucin de yodo
Decoloracin con alcohol etlico
Tincin de contraste con
safranina
 Las bacterias Gram (+) se observan de
color azul violeta oscuro, ya que el
alcohol etlico no elimina el Violeta
Genciana con que ellas se han teido y,
por lo tanto, no pueden teirse
posteriormente con safranina.
 Las bacterias Gram (-) se observan de color
rozado porque el tratamiento con alcohol
las hace perder el violeta genciana y luego
pueden teirse con el colorante de
contraste (safranina)
BACTERIAS GRAM POSITIVAS:

Son bacterias con una gruesa pared celular de peptidoglicano.

Poseen una membrana citoplasmtica con fosfolpidos y protenas.
Por fuera de la membrana citoplasmtica se encuentra la pared
celular que esta compuesta por una ancha capa de peptidoglicano.
El peptidoglicano es una malla porosa que otorga forma y rigidez a la
clula.
La pared celular Gram positiva tambin contiene cidos teicoicos y
cidos lipoteicoicos con funciones estructurales.
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS:

Son bacterias con una delgada capa de peptidoglicano y una

segunda envoltura denominada membrana externa.
Las clulas se encuentran envueltas por una membrana
citoplasmtica formada por una bicapa fosfolipdica y protenas
Por encima de esta membrana se encuentra la fina capa de
peptidoglicano que se fija a una membrana externa.
La membrana externa tiene una estructura de bicapa asimtrica ya
que la capa externa esta compuesta por lipopolisacridos (LPS) y la
cara interna por fosfolpidos.
La presencia de Lipopolisacridos
le confiere a la clula:
1. Proteccin contra enzimas digestivas.
2. Poder evadir la fagocitosis.
3. Tener cierta resistencia al complemento.
4. Evitar la respuesta inmune especfica.
5. Adherirse a ciertas clulas del hospedador.
 Bacterias Sin pared:
Genero: Mycoplasma
Bacterias cido-Alcohol resistentes
No se puede teir con la tincin de Gram
Genero: Mycobacterium, Nocardia y
Actinomyces.
Propiedad de no decolorar reside en los acido
micolicos (cidos grasos no saturados)
esterificados que presenta su pared celular.
Factor de virulencia
 De todas las bacterias existentes,
solo una pequea cantidad son
capaces de interaccionar con el
husped para producir infeccin y
enfermedad.
La capacidad de las bacterias para
producir enfermedad se define
como patogenicidad.
 Dentro de una especie bacteriana existen
cepas con diferentes grados de
patogenicidad, lo que se denomina
virulencia. Por ejemplo las cepas de
Straptococcus pneumoniae que tienen
cpsula son virulentas y pueden causar
neumonas.
En algunas especies bacterianas las cepas
avirulentas mantienen su capacidad
antignica por lo que son utilizadas en la
produccin de vacunas (BCG (TBC) y polio).
Para causar la enfermedad
infecciosa la bacteria debe:

Penetrar en el husped.

Desarrollar su metabolismo y multiplicacin

en los tejidos del husped.

Resistir a las defensas del husped.

Producir dao en el husped.

Deben cumplirse todos estos procesos

para que se produzca enfermedad.
FACTORES DE VIRULENCIA
BACTERIANA:

1.-Factores de adherencia:

Si no ocurre la adherencia de la bacteria, esta

sera fcilmente eliminada por algn mecanismo
de defensa inespecfico (mucus, movimientos
peristlticos, miccin, tos).
Las bacterias presentan especificidad tisular
para la adherencia a los tejidos.
Las estructuras bacterianas responsables de la
adherencia son: Fimbrias, glicocalix, protenas
de membrana.
2.-Factores de diseminacin e invasin
celular:

Para poder diseminarse e invadir la

clula, las bacterias producen enzimas:

1)Colagenasa: Degrada el colgeno, principal

protena del tejido conectivo.

2)Coagulasa: Produce la coagulacin del plasma,

contribuyendo a la formacin de mallas de fibrina
alrededor de la lesin que ayudan a mantener las
bacterias en los tejidos.
3) Hialuronidasa: Hidroliza el cido
hialurnico, un constituyente del tejido
conectivo, favoreciendo la diseminacin a
travs de los tejidos.

4) Fibrinolisina (Streptoquinasa): Disuelve

el plasma coagulado ayudando en la
diseminacin de las bacterias en los tejidos.

5) Hemolisinas: Destruyen glbulos

rojos.

6) Leucocidinas: Destruyen leucocitos.

3.-Factores que permiten vencer las
barreras del husped:

La cpsula que poseen algunas bacterias les

permite evitar la fagocitosis.
Algunas bacterias tienen la capacidad de
cambiar frecuentemente los antgenos
(variacin antignica) lo que permite evadir
los sistemas defensivos del husped
(Neisseria gonorrhoeae)
4.-Factores de competencia por
nutrientes:

Las bacterias patgenas deben competir con las

no patgenas por los nutrientes.
Algunas bacterias tienen protenas especficas
capaces de captar hierro en bajas
concentraciones.
 TOXINAS BACTERIANAS

Algunas bacterias producen sustancias txicas

denominadas toxinas.
La capacidad de una bacteria de producir toxinas es
un factor muy importante en la produccin de la
enfermedad.
Las toxinas bacterianas pueden clasificarse en dos
grupos:

Exotoxinas:
Excretadas hacia el medio externo.

Endotoxinas:
Formada por el lipopolisacrido de las bacterias Gram
negativas.
Actualmente se conocen varias
enfermedades causadas por la
produccin de exotoxinas:
 INMUNOLOGIA

Estudia las relaciones antgeno

anticuerpo y funciones de defensa del
husped mediada por clulas, en especial a
lo que se refiere a la inmunidad a la
enfermedad, reacciones biolgicas de
hipersensibilidad, alergias y rechazo de
tejidos extraos.
La inmunidad puede ser natural (innata) o
adquirida (adaptativa)
1.- Inmunidad natural:
No se adquiere por contacto con un
antgeno. Es inespecfica e incluye barreras
a agentes infecciosos como piel y mucosas
intactas, clulas asesinas naturales (NK),
fagocitosis, inflamacin, interfern y otros.
Puede variar con la edad y con las
actividades hormonal y metablica.

2.- Inmunidad adquirida:

Se produce despus de la exposicin a un
antgeno (bacteria), es especfica y es
mediada por anticuerpos o por clulas
linfoides; puede ser pasiva o activa:
 Inmunidad pasiva: Dada por anticuerpos
preformados en otro husped. Por ejemplo la
administracin de antisueros (anticuerpos) en la
difteria, ttanos y botulismo hace que el individuo
disponga de inmediato de un exceso de antitoxinas
para neutralizar toxinas.

Inmunidad activa: Es inducida despus del

contacto con sustancias extraas. (bacterias o sus
productos) Este contacto puede consistir en:
infeccin clnica o subclnica, inmunizacin con
agentes infecciosos vivos o muertos, exposicin a
productos microbianos (toxinas) o transplante de
clulas extraas. Se produce anticuerpos de manera
activa y tiene la ventaja de dar resistencia a largo
plazo.
3.- Barreras fisiolgicas:

Piel: Aportan propiedades

antimicrobianas: El sudor, las secreciones
sebaceas y las lisozimas. La resistencia puede
variar con la edad.

Mucosas: La pelcula de moco y de cilios

permiten desplazar las bacterias, adems, existe
lisozima y IgA en su superficie que impide la
fijacin de las bacterias. Este sistema puede ser
suprimido por algunas sustancias como: alcohol,
humo del cigarrillo y drogas.
Mecanismos inmunitarios
inespecficos:

A.Fagocitosis:
Las clulas fagocticas ( polimorfonucleares,
monocitos fagocticos y macrfagos del
sistema endotelial), tienen funciones que
incluyen la migracin, quimiotaxis, ingestin
y muerte bacteriana.
La fagocitosis es menos eficiente en
ausencia de anticuerpos.
 Los grnulos de los polimorfonucleares
(granulocitos) contienen lisozima y otras
enzimas hidrolticas que son
antimicrobianas.
Los macrfagos en la sangre se activan
por: Bacterias y sus productos, complejo
antgeno-anticuerpo, inflamacin,
linfocitos T sensibilizados y lesiones.
B.-Sistema reticuloendotelial:

Este sistema incluye clulas fagocticas

mononucleares presentes en la sangre, tejido
linfoide, hgado, bazo, mdula sea, pulmn y
otros tejidos que son capaces de captar y retirar
partculas bacterianas de la linfa y corriente
circulatoria. (filtran microorganismos)

C.-Repuesta inflamatoria:
Reaccin del husped para limitar la propagacin
bacteriana.

D.-Fiebre:
Aumenta la produccin de anticuerpos y
proliferacin de clulas T.
Respuesta inmunitaria:
Los macrfagos actan como clulas
presentadoras de antgenos, los cuales son
reconocidos por linfocitos T colaboradores (
CD4) produciendo dos tipos de respuestas:
Humoral (mediada por anticuerpos) o Celular.
A.-Respuesta mediada por anticuerpos:

Se activan los linfocitos B que se diferencian a

clulas plasmticas dispersando anticuerpos que
neutralizan toxinas y virus y opsonizan (revisten)
bacterias lo cual ayuda a su fagocitosis.
La defensa mediada por anticuerpos es importante
contra patgenos que producen toxinas (
Clostridium tetani) o poseen cpsula de
Lipopolisacridos (neumococo), principalmente
para bacterias extracelulares.
B.- Respuesta mediada por clulas:

Aumenta la actividad de clulas T

colaboradoras que estimula el desarrollo
de hipersensibilidad retardada y sirve en
la defensa contra bacterias
intracelulares, hongos, protozoos y
algunos virus.
Tambin hay activacin de clulas T
citotxicas que provocan la lisis de
bacterias.
La respuesta inmunitaria que
produce un antgeno
depende de:

Carcter de extrao
Tamao de la molcula
Complejidad qumica y estructural
Constitucin gentica del husped
Dosificacin, va y tiempo de
administracin del antgeno
 ANTICUERPOS

Los anticuerpos son

inmunoglobulinas (Ig) que
reaccionan de manera especfica
con el antgeno que estimul su
produccin; forman alrededor del
20 % del total de las protenas
plasmticas.
 IgG: Es al anticuerpo predominante en
las respuestas secundarias, y constituye una
defensa importante contra bacterias y virus. Es al
nico anticuerpo que atraviesa la placenta.
IgM: Es la principal inmunoglobulina
producida con rapidez en la respuesta
inmunitaria primaria. Es la ms eficaz en la
aglutinacin, la fijacin del complemento y
tambin es importante en la defensa contra
bacterias y virus. Puede ser producida por un feto
infectado.
IgA: Es la inmunoglobulina principal
en secreciones como leche, saliva y lagrimas y en
las secreciones de las vas respiratorias,
gastrointestinal y genital. Protege a las mucosas
de ataques de bacterias y virus.
IgE: Es la que desencadena respuestas
alrgicas del tipo inmediato (anafilcticas). Se
eleva durante infestaciones con helmintos
(gusanos).
COMPLEMENTO:

Es un complejo compuesto por diferentes

protenas y glicoprotenas sintetizadas en el
hgado y en macrfagos y que se encuentran
presentes en el suero.
Su funcin es complementar la accin del
sistema de defensa, ya sea destruyendo
bacterias (proceso de lisis), promoviendo la
fagocitosis de antgenos por parte de
macrfagos (proceso de opsonizacin) o
facilitando la inflamacin celular con motivos
defensivos (quimiotaxis).