UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y DE RECURSOS NATURALES

CRECIMIENTO MICROBIANO,
MEDIDAS DE CRECIMIENTO
 INTEGRANTES:

 Aparicio García Nathaly

 Ramos Ortega Manuel

 CURSO: MICROBIOLOGÍA GENERAL

 PROFESORA: SUYO LOAYZA, BEATRIZ

 CICLO: 2017 A
 CRECIMIENTO MICROBIANO
• Entendemos por crecimiento
microbiano el aumento del
número de microorganismos a
lo largo del tiempo.

Por tanto, no nos referimos al

crecimiento de un único
microorganismo (ciclo celular), sino
al demográfico.

Denominamos ciclo celular al proceso de desarrollo de una bacteria aislada. A lo

largo del ciclo celular tiene lugar la replicación del material genético, la síntesis de
componentes celulares, la elongación de la bacteria para alcanzar un tamaño doble
del inicial y su división por bipartición para dar lugar a dos células hijas.
 CRECIMIENTO EXPONENCIAL
Durante la división celular una célula
da origen a dos, en este tiempo que
se llama tiempo de generación tanto
la masa como el número de células
se duplica.

El aumento de número de células es

una progresión geométrica de base
dos.

La población bacteriana se duplica en

un periodo fijo (Tg)
 TIEMPO DE GENERACIÓN
• El intervalo que transcurre en la
formación de dos células a
partir de una célula se llama
generación y el tiempo
requerido para esto es el
tiempo de generación.
Cada vez que transcurre
un tiempo de generación,
el número de células se
duplica, siguiendo, por
tanto, un incremento
exponencial.
 VELOCIDAD DE CRECIMIENTO

• Cambio del numero de

células o de masa en una
unidad de tiempo.
• Es proporcional al numero
o mas de células que hay
en un momento dado.

Donde:
N: Numero final de
microorganismos.
NO : Numero inicial de
microorganismos.
µ: velocidad de crecimiento
especifico.

El incremento del número de células (dN) por

unidad de tiempo (dt) es proporcional al número
de células presentes en el cultivo (N).
Para que las bacterias crezcan
adecuadamente en un medio
de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como
son: temperatura, grado de
humedad y presión de oxígeno
adecuadas, así como un grado
correcto de acidez o
alcalinidad
Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y
factores de crecimiento
necesarios y debe estar
exento de todo
microorganismo
contaminante.
FASES DE CRECIMIENTO
MEDICIÓN DE CRECIMIENTO MICROBIANO

El crecimiento de las poblaciones microbianas puede medirse de diferentes maneras.

Algunos métodos determinan el número de células y otros la masa total de la población,
que a menudo es directamente proporcional al número de células. La magnitud de la
población normalmente se registra como el número de células que hay un mililitro de
líquido o en un gramo de material sólido.

Supongamos, por ejemplo, que una millonésima parte de un

mililitro (10-6 mL) de leche agria contiene 70 células bacterianas.
Entonces debe haber 70 veces 1 millón de células, o sea 70
millones de células por mililitro.

Sin embargo, este método resulta poco práctico para medir una millonésima parte de un
mililitro de líquido o de un gramo de alimento. Por consiguiente, el procedimiento se
efectúa indirectamente en una serie de diluciones.
 RECUENTO EN PLACA
El método utilizado con más frecuencia para la medición de poblaciones bacterianas es el recuentro en
placa. Una ventaja importante de esta técnica es que mida el número de células viables. Una desventaja es
que se requiere bastante tiempo, por lo general 24 horas o más, para que se formen las colonias visibles.

El recuento en placa se basa en la suposición de que cada bacteria crece y se divide para producir una sola
colonia. Esto no siempre es cierto porque las bacterias con frecuencia crecen unidas en cadenas o grumos.
Por consiguiente, a menudo una colonia no se produce como resultado de una única bacteria sino de
segmentos cortos de una cadena o de un agregado bacteriano.

Cuando se realiza el recuento en placa es importante que crezca sólo un número limitado de colonias en la
placa. Cuando hay demasiadas colonias algunas células se encuentran apiñadas y no pueden desarrollarse;
esta situación es causa de inexactitudes en el recuento. Para asegurar algunos recuentos estén dentro de
estos límites el inóculo original se diluye varias veces en un proceso denominando dilución seriada.
La convención de la Food and DRUG Administration de los Estados Unidos que se cuenten sólo las placas con
25ª 250 colonias, si bien muchos microbiólogos prefieren placas con 30 a 300 colonias.
 DISOLUCIÓN SERIADA
Consideremos, por ejemplo, que una muestra de
leche contiene 10000 bacterias por mililitro. Si se
sembrara 1mL de esta muestra se formarían en teoría
10000 colonias sobre el medio de la placa de Petri.
Obviamente, sería imposible contarlas en la placa. Si
se transfiriera 1ml de la muestra a un tubo que
contuviera 9ml de agua estéril cada mililitro del
líquido resultante contendría 1000 bacterias. Si se
inoculara de nuevo 1ml de este líquido en una placa
de Petri el número de colonias potenciales todavía
sería excesivo para el recuento. Por lo tanto, podría
hacerse otra dilución seriada. Se transferiría 1mL del
líquido que contuviera 1000 bacterias a un segundo
tubo con 9mL de agua. Cada mililitro de este tubo
contendría ahora sólo 100 bacterias y si se sembrara
1mL de este contenido en una placa se formaría en
teoría 100 colonias, un número fácil de contar.
 PLACA VERTIDA
El recuentro en placa se efectúa con el método de la placa vertida o
con el método de la diseminación en placa. Se inocula 1.0 mL o 0.1
mL de diluciones de la suspensión bacteriana en una placa de Petri.
El medio nutritivo, en el que el agar se mantiene líquido en un
baño de agua a cerca de 50ªC, se vierte sobre la muestra, que
luego se mezcla con el medio con una agitación suave de la placa.
Cuando el agar se solidifica la placa se incuba. Con esta técnica las
colonias crecerán dentro del agar nutritivo así como en la
superficie del agar.

Esta técnica tiene algunos inconvenientes porque ciertos

microrganismos relativamente sensibles al calor pueden
resultar dañados por el agar fundido y por consiguiente ser
incapaces de formar colonias. Las colonias que aparecen
debajo de la superficie no son adecuadas para estas pruebas
DISEMINACIÓN EN PLACA

Para ello sobre la superficie del

medio previamente vertido y
solidificado se coloca 0.1mL del
inóculo, el que se extiende
uniformemente sobre la
superficie la superficie del medio
utilizando una varilla de vidrio
esterilizada de forma especial.
Esta técnica permite el
crecimiento de todas las
colonias sobre la superficie del
medio y evita el contacto de las
células con el agar fundido.
FILTRACIÓN

Cuando la cantidad de bacterias es muy baja, como en lagos o en ríos con corrientes
relativamente limpias, las bacterias se pueden contar con métodos de filtración. En esta técnica
se hacen pasar al menos 100mml de agua a través de un filtro consistente en una membrana
delgada cuyos poros son demasiado pequeños como para permitir el paso de las bacterias, que
entonces son tamizadas y retenidas en la superficie del filtro. Este filtro se transfiere después a una
placa de Petri que contiene una almohadilla embebida en un medio nutritivo líquido, donde las
colonias surgen de las bacterias presentes en la superficie del filtro. Este método se aplica con
frecuencia para la detección y cuantificación de bacterias coliformes, que son indicadoras de la
contaminación fecal de los alimentos o el agua
MÉTODO DEL NÚMERO MÁS PROBABLE

Estimación estadística se basa en el hecho de que cuanto mayor sea el número de bacterias en
una muestra mayor será la disolución necesaria para reducir la densidad hasta el punto en el que
no se desarrollan ninguna bacteria en los tubos de una serie de disolución
La tabla del NMP permite calcular
el número de microorganismos
por cálculos estadísticos es
probable que conduzca a ese
resultado.
La combinación 5,3,1 desde un punto de
vista estadístico el 95% de las muestras
de agua que den este resultado contiene
de 40 a 300 bacterias y el NMP es de
110bacterias
RECUENTO MICROSCOPIO DIRECTO

Se extiende una muestra de 0.01mL sobre un recuadro de un centímetro cuadrado marcado sobre
el portaobjetos, se agrega un colorante para que puedan verse las bacterias y la muestra se
observa con la lente del objetivo de inmersión. Es posible determinar el campo de visión de este
objetivo. Una vez contado el número de bacterias en varios campos se calcula el número promedio
de bacterias por campo. Con estos datos también puede calcularse el número de bacterias por
centímetro cuadrado a partir del cual la muestra se propagó.
METODOS INDIRECTOS PARA DETERMINAR
EL CRECIMIENTO BACTERIANO

MÉTODO TURBIDIMÉTRICO
• Mayor turbidez es debido a una mayor cantidad de
microorganismos.
MÉTODO TURBIDIMÉTRICO

Aplicaciones
Espectrofotómetro
• Tratamiento de agua
potable.
• Fuentes de plantas de
tratamiento.
MEDIDA DE ACTIVIDAD METABÓLICA

• Consumo de oxígeno.
• Consumo de carbónico.
Las bacterias como que respiran producen una
disminución del potencial redox del medio en que se
encuentran como consecuencia del consumo de
oxígeno (utilización de colorantes sensibles a
oxidación-reducción tales como el azul de metileno)
MEDIDA DE ACTIVIDAD METABÓLICA

Respirómetro de Warburg
• Muestra biológica
unida al
manómetro.
• Se registra el
cambio de
presiones en el
manómetro