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manipulação de
Microorganismos
Definição
PORTARIA Nº 1.914, DE 9 DE AGOSTO DE 2011, que aprova a Classificação de Risco dos Agentes Biológicos
elaborada em 2010, pela Comissão de Biossegurança em Saúde (CBS), do Ministério da Saúde
Níveis de Biossegurança
Existem quatro níveis de biossegurança: NB-1,
NB-2, NB-3 e NB-4, crescentes no maior grau de
contenção e complexidade do nível de proteção,
que consistem de combinações de práticas e
técnicas de laboratório e barreiras primárias e
secundárias de um laboratório.
■ Não há vacina;
Biossegurança - Vírus
Agente Atividade
infectante: Hospedeiro: Atividade
Virulência Idade Desempenhada:
Carga Sexo Diagnóstico
infectante Gravidez Produção
Ciclo Uso de antibióticos Pesquisa
Toxigenicidade Nutrição
Imunidade
Biossegurança: Bactérias
Biossegurança: Bactérias
Classe de risco 2:
● Escherichia Coli Enteropatogênicas:
1) EPEC - E. coli enteropatogênica - causa
➔ A infecção: contato direto
diarréia em crianças
pessoa a pessoa e do
2) ETEC - E. coli enterotoxigênica - diarréia consumo de água e
aquosa semelhante à desencadeada pelo Vibrio alimentos contaminados.
cholerae.
3) EIEC - E. coli enteroinvasora - disenteria ➔ Transmissão: ingestão
semelhante à provocada pela Shigella sp. do micro-organismo e/ou
4) EHEC - E. coli enterohemorrágica - principal inoculação parenteral
agente da colite hemorrágica e da síndrome
hemolítica urêmica, produzem citoxinas para ➔ Procedimentos para a
células VERO. manipulação de micro-
organismos patogênicos
5) EAggEC - E. coli enteroagregativa - associada e/ou recombinantes: NB-
a casos de diarréia crônica, possui um padrão de 2.
aderência específico para as células HEp-2.
Biossegurança: Bactérias
Classe de risco 2:
➔ Foram relatados nos EUA
● Neisseria gonorrhoeae: quatro casos de infecção
laboratorial por gonococo
1. Coco Gram negativo pequeno,
não móvel, se dispõe aos pares ➔ Trasmissão: contato direto ou
(diplococos) indireto das mucosas e/ou por
inoculação parenteral
1. Cresce em meio de cultura acidental do microorganismo
específico com 10% de CO2 .
Os gonococos são lábeis nas ➔ NB- 2 é indicado para o
condições ambientais e as trabalho com material clínico
amostras devem ser semeadas e cultura,
rapidamente.
➔ NB- 3 quando o trabalho
1. Usualmente, o período de envolve produção de
incubação é de 2-7 dias. aerossóis ou culturas em
larga escala
Biossegurança: Bactérias
Classe de risco 3:
● Mycobacterium tuberculosis, M.bovis: ➔ Via de transmissão:
Respiratória, exposição a
1) Bacilo aeróbio, imóvel, álcool ácido aerossóis (em laboratórios)
resistente
2) Cresce em meios de cultura específicos, ➔ Máscaras com filtro HEPA
crescimento lento devem ser usadas durante a
3) Dose infectante: aproximadamente 10 manipulação de M.
bacilos. tuberculosis.
4) A bactéria é encontrada em escarro,
lavado gástrico, secreções do trato ➔ NB-3 é indicado:
respiratório, urina e em tecidos afetados. identificação de
5) M. bovis apresenta maior risco para micobactérias, teste de
indivíduos imunossuprimidos ou sensibilidade a
portadores de HIV. antimicrobianos e manuseio
de grandes volumes de
culturas concentradas.
Biossegurança: Bactérias
Classe de risco 3: ➔ Transmissão: Contato direto
● Yersinia pestis com material infeccioso
proveniente de humanos e
1. BGN da família Enterobacteriaceae, roedores, aerossóis
agente etiológico da peste bubônica. infecciosos gerados durante
2. Concentra na forma endêmica, a manipulação de culturas,
principalmente em alguns estados tecido .
da região nordeste (Piauí, Ceará, ➔ NB-2: manipulação de
Pernambuco, Paraíba e Bahia). culturas em pequena escala
3. Pode estar presente no sangue, ou material clínico
escarro, líquido céfalo-raquidiano, potencialmente infectado
fezes, e urina de humanos.
➔ NB- 3: grandes volumes de
4. Risco de infecção laboratorial: rara,
cultura, quando os
porém comprovada. Quatro casos
bastonetes são resistentes
foram relatados nos Estados Unidos
da América. ou em atividades com
potencial de gerar aerossóis.
Organismos geneticamente
modificados: Vantagens
Tolerância a Herbicidas – Aumento da produtividade: plantas com
resistência a produtos químicos como pesticidas e inseticidas
altamente utilizados no combate as pragas.
Produção de Medicamentos
Erradicação de doenças
Organismos geneticamente
modificados: Desvantagens
Transformação CaCl2:
→ As bactérias e o vetor são misturados com uma solução de cloreto de
cálcio e sofrem um choque térmico.
→ Os íons cálcio têm a função de neutralizar as cargas negativas do DNA
e da membrana bacteriana, facilitando a passagem do vetor pela
membrana.
Eletroporação:
→ Técnica na qual se misturam bactérias e o vetor num único tubo e
aplica-se um choque eléctrico na mistura → desestabilizar a membrana e
permitir a entrada do vetor na bactéria.
→ Ela é então rapidamente transferida para meio de cultura e incubada a
37ºC para que se possa recuperar após o choque.
Organismos Geneticamente
Modificados: Bactérias
→ Reprodução;
Saccharomyces cerevisae
amido glicose
sacarificação do amido
Linhagem industrial - 0% de etanol Aspergillus awamori → glico-amilase
Nova linhagem - 89,8% de etanol Debaromyces occidentalis → α-amilase
Organismos Geneticamente
Modificados: Vírus
→ A tecnologia do DNA a partir dos anos 70
trouxe as primeiras iniciativas na direção do
desenvolvimento de vacinas recombinantes.
Spirulina platensis