Sistema de Identificación

Microbiana
API
 ¿Qué son las galerías API?
• API® sistema miniaturizado y estandarizado de identificación,
que asocia una galería de pruebas bioquímicas (10 – 20
sustratos) y una base de datos. (manual o digital).

• Fue creada en 1970, y con el tiempo la gama de galerías API se

ha ido ampliando rapidamente, en colaboración con los
grandes centros de referencia internacionales en USA, Japón,
Australia y Europa…
SISTEMA DE IDENTIFICACIÓN MICROBIANA
API

• Identifica más de 550 especies de

Bacterias (gram negativas y positivas)
y 15 especies de Levaduras.

• Es una galería miniaturizada y

estandarizada con una base de datos
(Apiweb).

• Es un método de referencia mundial.

 Enfoques Básicos
• MORFOLOGIA DE COLONIA (Idx.
macroscópica)
• COLORACION DE GRAM (Idx.
Microcóspica)
• PRUEBAS BIOQUIMICAS (tradicionales
o API)
• SEROLOGIA (pruebas de
complemento)
 TIPOS DE GALERIAS

• API 20E : BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES

(Enterobacteriaceae): 108 especies
 TIPOS DE GALERIAS

• API NE : BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES:

64 especies
 TIPOS DE GALERIAS

• API STAPH: ESTAFILOCOCOS Y MICROCOCO: 23 especies

 TIPOS DE GALERIAS

•API STREP: ESTREPTOCOCOS: 47 especies

 TIPOS DE GALERIAS

•API NH: NEISSERIAS Y HAEMOPHYLUS: 11 especies

TIPOS DE GALERIAS
 TIPOS DE GALERIAS

•API LISTERIA . 6 especies

 TIPOS DE GALERIAS
• API CAMPYLOBACTER: 18 especies
• API CORYNEBACTERIA: 42 especies
• API CH : 22 especies de Bacillus
• API CHE : 96 especies de Enterobacteriaceae
• API CHL : 52 especies de Lactobacillus
• API ANAEROBIOS : 67 especies
• API 20 C AUX: LEVADURAS:43 especies
 Principio
• La galería del sistema API 20 E se compone de
20 microtubos que contienen los sustratos
deshidratados. Los microtubos se inoculan
con una suspensión bacteriana que
reconstituye los tests. Las reacciones
producidas durante el período de incubación
se traducen en cambios de color espontáneos
o revelados mediante la adición de reactivos.

• La lectura de estas reacciones se lleva a cabo

utilizando la Tabla de Lectura, y la
identificación se obtiene con la ayuda del
Catalogo Analítico o del software de
identificación.
 REACCIONES BIOQUIMICAS
• OXIDACION
• FERMENTACION
• ASIMILACION
• HIDRÓLISIS
• DEGRADACION
 Metodología Analítica
Materiales:
• Cultivo bacteriano (no mayor de 24
horas) en un medio nutritivo.

• Tubo con 5 mL de NaCl 0.85%

• Galerías API 20E: galería,
y cámara de incubación.
• Reactivos API: TDA,
JAMES, VP1+2, NIT1+2
• Reactivo de Oxidasa
• Aceite de Parafina.
• Hoja de Resultados.
• Catálago Analítico o Software APIweb.
 Metodología Analítica
Muestras (Recolección y Preparación)
• La galería API 20 E no debe ser
utilizada directamente a partir
de muestras de origen clínico o
de otro tipo. Aislamiento de V.alginolyticus
en Agar TCBS

• Los microorganismos a identificar

deben aislarse en una primera fase
sobre un MEDIO de cultivo
adecuado según las técnicas
usuales de bacteriología.
Aislamiento de V.alginolyticus
en Agar NUTRITIVO
 Metodología Analítica
Selección de la Galería
 Metodología Analítica
Test de la Oxidasa
• Colocar una gota del reactivo
de la oxidasa sobre el cultivo
(no mayor de 24 horas) o
con un palillo tomar una
colonia sospechosa y colocar
sobre papel filtro humedecido
con reactivo.
• Color morado:
OXIDASA (+)
Procedimiento

1. Preparación
del inóculo
2. Llenado de la cámara de incubación con
agua estéril (5 mL)
3. Colocar la galería
API en la cámara de
incubación.
4. Llenado de la galería
API.

VP, GEL -- tubos y cúpulas

ADH, LDC, ODC, H2S, URE –
cúpula con aceite de parafina
5. Incubar la galería
API a 36°C durante
18-24 horas

6. Hacer la Lectura de la
galería remitiéndose a
la TABLA DE LECTURA
Tabla de Lectura
Galería después de 24 hrs de incubación (Sin Reactivos)

TDA: 1 gota de Reactivo de TDA

IND: 1 gota de Reactivo de James
VP: 1 gota de Rtvo. VP1 + 1 gota Rtvo. VP2

Galería después de adicionar Reactivos

Ejemplos:
 Hoja de Resultados

VA001 2007 04 30
Mx. De alimentos

+ + + + - - - - + - - + + - + ++ + - + -

7 1 4 4 5 7 2
1+2+4

7 144 572 Escherichia coli

Buscar en Catalogo Analítico

O
Api web (software)
LA VOLUNTAD ES ALGO GRANDE PUES LA ACCION Y
EL TRABAJO GENERALMENTE SIGUEN A LA
VOLUNTAD Y CASI SIEMPRE EL TRABAJO SE
ACOMPAÑA DE ÉXITO.

ESTAS TRES COSAS TRABAJO, VOLUNTAD Y ÉXITO,

LLENAN LA EXISTENCIA HUMANA.

LA VOLUNTAD ABRE LA PUERTA AL ÉXITO, AMBOS

BRILLANTES Y FELICES PASA ESTAS PUERTAS Y AL
FINAL DEL VIAJE EL ÉXITO CORONA NUESTROS
ESFUERZOS.

LOUIS PASTEUR