CULTIVO DE

MICROORGANISMOS.
Medios de cultivo
 Condiciones para el crecimiento microbiano

agua
Medios de cultivo
Macro nutrientes:
Micronutrientes,
Nutrientes
Factores de crecimiento
Crecimiento
Temperatura
pH
luz
Condiciones aireación

de cultivo actividad de
agua
potencial redox:
reducido, oxidado
 CULTIVO DE MICROORGANISMOS

• NUTRIENTE:
– Elemento o compuesto químico necesario para
el metabolismo de un ser vivo; fuente de energía y/o Carbono:
 COMPOSICIÓN QUÍMICA DE UNA
CÉLULA.

• TOTALIDAD DE LA MASA CELULAR:

- Cuatro elementos: C, H, O, N.
- Macromoléculas; moléculas orgánicas pequeñas.
- Otros elementos, menos abundantes, igual importancia

H2O
90%, peso Húmedo
 Nutrientes
1.- Macronutrientes:
Requeridos en grandes cantidades.

- C, H, O y N: 95%
- P, S, K, Mg, Ca, Na, Fe.

2. Micronutrientes (elementos traza):

Pequeñas cantidades: metales
Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se, W, V, Zn.
3.- Factores de crecimiento. (Auxótrofos; Protótrofos)
Compuestos orgánicos, pequeñas cantidades:
•Vitaminas
•Bases nitrogenadas (Purinas y pirimidinas)
•Aminoácidos
 Macro-Nutrientes
1.- Carbono: elemento más abundante, células.
- 50% peso seco
- Elemento mayoritario macromoléculas: Ps, Lípidos.
-Fuente Naturaleza/M cultivo Art:if: CH, Az ,
- ac grasos y comp aromáticos, aa
Glicerol; CO2 .
 Macro-Nutrientes

2.- Nitrógeno. 2do elemento más abundante.

-12% peso seco.
-Elemento principal : Pt, ac. nucleícos.

-Fuente Naturaleza/bacterias:
-Orgánica: aa, peptonas ( digeridos de pt):
-Inorgánica: Mayoría , Amonio, nitratos.
- N2, b. fijadoras de N2.
Requeridos Naturaleza; C, Naturaleza,
para: M. c. art Utilizables.

Fósforo: -Inorgánica -Fosfatos O/I

Síntesis ac -Orgánica -Esteres del ácido fosfórico
nucleicos,
fosfolípidos

Azufre: -Inorgánica -Sulfuros y sulfatos.

Aa azufrados,
(cisteína y metionina)
-Orgánica -Aminoácidos azufrados.
Vitaminas.
(tiamina, biotina,
CoA)
 Macro-Nutrientes

1.- Potasio: Todos organismos.

-Enzimas (Síntesis de proteínas.)

2.- Magnesio.
-Estabiliza: ribosomas, Memb celulares, Ac nucleícos;
- Act muchas enzimas.

3.Calcio: No requerido por todos mo.

-Estabilizar PC bacteriana.
-Termo-resistencia AN, Endospora
(ADP.Ca).

4.- Sodio: Solo por algunos mo.

-Mo marinos. Halofílicos
-Mo aguas dulces, no.
 Macro-Nutrientes
-5.- Hierro: A veces micronutrientes/requerido mayor cant otros metales traza.
-Fundamental en respiración:
-Cito cromos, Proteínas transporte e.
 Micro-Nutrientes (Elementos traza)
1.- Req muy pequeño, igual importancia
macro-nutrientes;
-No necesario adicionar a medios de cultivo.
-Solo comp muy purificados (deficiencia elementos traza).

2.- Metales, parte de Enzimas.

Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se, W, V, Zn.
Factores de crecimiento
Mayoría mo. Sintetizan (Prototrofos);
Algunos Mo , no pueden sintetizar (Auxótrofos) y deben
incorporarse en los medios de cultivo ( Sust Nutr complejas :Diger
de proteína, Extracto de levadura)
* Bases púricas y pirimídicas DNA, RNA
* Aminoácidos esenciales síntesis proteica
* Vitaminas Actúan como coenzimas
 Clasificación de los medios de cultivo:
- Composición:
- Aporte Nutricional
- Función (*)
- Naturaleza Física o consistencia
 Composición, dos grandes grupos:

•Químicamente definidos o sintéticos:

- Composición química exacta:.
- Cantidades precisas de
compuestos orgánicos o inorgánicos muy puros.

• Q. Indefinidos o complejos:
-Composición química no definida: No se conoce composición nutriente
- Lisados de proteína, carne, de levadura etc
- Enriquecidos con peptonas, extracto de carne, de levadura, sangre.
-Comercialmente disponibles en polvo.
Lisados de proteína, carne, de levadura etc
Enriquecidos con peptonas, extracto de carne, de levadura, sangre.
 Clasificación de los medios de cultivo:
- Composición:
- Aporte Nutricional
- Función (*)
- Naturaleza Física o consistencia
Medios de enriquecimiento.- Favorece crecimiento, mo baja
concentración, muestra.
 Según su uso en el laboratorio
•Selectivos o inhibitorios:
Medios que contienen, además de los nutrientes, Sustancias que inhiben el
desarrollo de algunos microorganismos, permitiendo el crecimiento de otros.
o cuya composición permite el desarrollo de un grupo determinado
-Colorantes, antibióticos
-NaCl superior a la concentración fisiológica

•Diferenciales:
•Permiten distinguir diferentes grupos mo, en base a características
metabólicas. Contienen indicadores
•Azucares: Lactosa, manitol,: Ind pH.
•Sangre : Hemolisis.
Ej. azúcar fermentable : lactosa, indicador: rojo neutro
AGAR DE SAL Y MANITOL
 Selectivo
 NaCl 7.5%
Inhibición de la mayoría de
microorganismos
Halotolerante: S aureus
Agar Baird Parker
 Selectivo
 Cloruro de litio
Inhiben a la mayoría de
microorganismos
 Piruvato

 Glicocola

Favorecen selectivamente el
crecimiento de estafilococos
SDA, Agar Sabouraud Colorante;, pH ac, Azúcar, altas
PDA, Agar Papa Dextrosa concent
Caldo tioglicolato, caldo carne, Leche fierro. TSN.
Medios de enriquecimiento.- Favorece crecimiento, mo baja
concentración, muestra.
Medio diferencial

 Permiten distinguir diferentes grupos mo, en base a

características metabólicas.

 Azucares: lactosa , manitol; I pH

 sangre, Hemolisis
 Sales de fe, H2S
AGAR DE SAL Y MANITOL

 Selectivo
 NaCl 7.5%
Inhibición de la mayoría de
microorganismos

 Diferencial
 Manitol /Rojo Fenol
 Man +
 Man -
Agar Baird Parker
 Piruvato
 Glicocola
Favorecen selectivamente el crecimiento de
estafilococos

 Diferencial
 Yema de huevo
 Fosfolipólisis. Formación de
un halo opalescente
alrededor de la colonia

 - TELURITO DE Potasio.
 Reducción , col negras
Medios de enriquecimiento.- Favorece crecimiento, mo baja
concentración, muestra.
 Medios de enriquecimiento.
Favorece crecimiento, mo baja concentración, muestra.

Enriquecimiento de Salmonella y Shigella

en muestras de heces e hisopados rectales

Caldo selenito F
Selenito de sodio. Inhibe los enterococcos y retrasa el crecimiento de
las coliformes.
Se puede añadir cisteína que favorece el crecimiento de Salmonella.

Caldo tetrationato
Sales biliares y tetrationato sódico, inhiben las bacterias gram positivas
y las coliformes.
AGAR MAC CONKEY
AGAR EMB
Lac-

 Selectivo
 Colorante: azul de
metileno
Inhibición de Gram+
 Diferencial
- Eosina Lac+
 Lactosa
 Lac +
 Lac -
Agar EMB
Agar Salmonella-Shigella (SS)
 Selectivo Lac-
 Sales biliares H2S-
 Verde brillante
Inhibición de Gram+
 Diferencial
 Tiosulfato de sodio
 Citrato férrico
 H2S+
 H2S-
 Lactosa ; Rojo neutro
 Lac+
 Lac-
Agar SS

Lac-
H2S+
Agar sangre
Clasificación de los medios de cultivo
Según su naturaleza física

* Líquidos
• Sólidos –
•* Semi-sólidos