EXPRESION DEL

GEN
TRANSCRIPCION, PROCESAMIENTO Y
TRADUCCION
E.P FARMACIA Y BIOQUIMICA – UCSM
CATEDRA EN BIOLOGIA MOLECULAR

2018
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Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
 EL ACIDO RIBONUCLEICO (RNA)
• El ARN es un ácido nucleico que se compone de una sola cadena de
nucleótidos.

• Los nucleótidos de ARN están formados por ribosa en lugar de la

desoxirribosa del ADN, y tienen la base nitrogenada uracilo (U) en lugar de
timina (T).

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Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
 Cada nucleótido está formado por una molécula de monosacárido
de cinco carbonos (pentosa) llamada ribosa

un grupo fosfato, y uno de cuatro posibles compuestos

nitrogenados llamados bases: adenina, guanina, uracilo y citosina

Adenina y guanina son purinas, citosina y el uracilo son

pirimidinicas.

Los carbonos de la ribosa se numeran de 1' a 5' en sentido

horario. La base nitrogenada se une al carbono 1'; el grupo
fosfato se une al carbono 5' y al carbono 3' de la ribosa del
siguiente nucleótido.

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Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
ADN ARN
•El ADN lleva a cabo la parte más • ARN va a ser el encargado de transmitir
importante, que es la de seleccionar el dicho código.
código genético que se va a transmitir a la
siguiente generación.
•ADN lo escribe •ARN lo transporta

•El ADN funciona en dos fases. •El ARN en una sola fase

•El ADN agrupa sus proteínas en forma de •El ARN, forma una hélice simple.
hélices pero a pares, siendo una doble cadena.

•El ADN se encuentra siempre en el núcleo. •El ARN puede encontrarse tanto en el núcleo
como en el citoplasma.

•El ADN es estable en condiciones alcalinas. •El ARN no lo es.

•La misión final del ADN es la de llevar a cabo • El ARN, por otra parte, realiza la función de
el almacenamiento a largo plazo y la trasferencia mensajero entre el ADN y los ribosomas.
al futuro de la información genética.
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-Por lo general, está constituido por una doble hélice ADN

- Contiene Uracilo ARN

- Es el portador de los factores hereditarios ADN

- Presenta estructura primaria, secundaria y terciaria ADN

- Se localiza, principalmente, en el núcleo de las células eucariotas ADN

- Forma parte del nucléolo, asociado a proteínas ARN

-Contiene desoxirribosa ADN

- Forma los ribosomas ARN

- Contiene ribosa ARN

- Es el almacén de la información genética ADN

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 TIPOS DE RNA

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 ARN RIBOSOMAL

• Se encuentra asociado a proteínas formando los ribosomas.

• Corresponde al 80% del total de ARN en la célula
• En procariotas hay 3 especies: 23S, 16S y 5S
• En eucariotas hay 4 especies: 28S, 18S, 5.8S y 5S

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 ARN DE TRANSFERENCIA
• De los 3 tipos de ARN son los más pequeños (4S).
• Hay por lo menos un tRNA para cada uno de los
20 aminoácidos presentes en las proteínas.
• Constituye el 15% del total de ARN
• Contienen bases raras como el dihidrouracilo

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 TRANSFER RNA

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 ARN MENSAJERO
• Corresponde aproximadamente al 5% del ARN total de la célula
• Es el más heterogéneo en tamaño y en secuencia de bases
• Lleva la información para una o más proteínas en procariotes y para
una sola proteína en eucariotes

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1.- TRANSCRIPCION

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 REPRESENTACION ESQUEMATICA DE LA
SINTESIS PROTEICA (EXPRESION DEL GEN)

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• En la transcripción la cadena que se forma esta constituida de
ribonucleótidos
• La RNA polimerasa no requiere de “primer”
• La cadena de ARN que se forma en la transcripción no permanece
apareada al molde.
• En la transcripción se cometen errores cada 10 000 nucleótidos
añadidos

DIFERENCIAS ENTRE LA REPLICACIÓN Y

LA TRANSCRIPCIÓN

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Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
 EXPRESION GENICA EN EUCARIOTES Y
PROCARIOTES

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PASOS DE LA TRANSCRPCION

•Iniciación
•Elongación
•Terminación
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 a) INICIACIÓN:
• La porción del ADN que contiene el código para la
proteína que se necesita, se desdobla y se separa.

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 b) ELONGACIÓN:
• Los nucleótidos de ARN libres se aparean con las
bases expuestas del ADN. Como resultado, de
los tripletes del ADN se forman tripletes
complementarios en molécula de ARNm.
Una sucesión de tres nucleótidos en una
molécula de ARNm se llama un codón.

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 b) TERMINACIÓN:
• Se forman enlaces entre los nucleótidos del ARNm, y
la molécula de ARNm se separa de la molécula de
ADN. La molécula completa de ARNm, sale del núcleo
y va a los ribosomas.

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Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
DETALLES DE LA
TRANSCRIPCIÓN

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23
24
25
 ENZIMOLOGÍA DE LA
TRANSCRIPCIÓN
REQUERIMIENTOS

• Sustratos: Se emplean 04 Ribonucleosidos - trifosfato: ATP, GTP, CTP, UTP.

• Cofactores: Ion Metálico divalente, asociado a los NTP y a la polimerasa:
Mn2+ como Mg2+
• Molde o Plantilla: Incorporación de nucleótidos esta dado por su
complementariedad.
• Cebador: La síntesis de RNA se da con solo 2 nucleótidos.
REACCIÓN DE SÍNTESIS
DEL RNA
28
ETAPAS EN EL PROCESO DE TRANSCRIPCION

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• RNA polimerasa I : Transcribe la
mayoría de genes rRNA
• RNA polimerasa II: Transcribe todos
los genes que codifican proteínas
• RNA polimerasa III: Transcribe todos
los genes tRNA y el gen del rRNA 5S

RNA POLIMERASAS 30
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RNA POLIMERASAS DE LOS EUCARIOTES

Propiedades I II III
Nucleolo Cromatina y Nucleoplasma
Localización
nucleoplasma
% de la actividad 50-70 20-40 10
celular
Productos rRNA 28 S, 18S, mRNAs tRNAs
5.8 S rRNA 5S
Relación Mn /Mg para
mayor actividad
1-1.5 2-5 2
Concentración de a-
>400 0.025 20
amanitina necesaria 31
para la inhibición(ug)
Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
 FACTORES GENERALES DE
TRANCRIPCION:
•TFIID: 2 subunidades (TBP y
1complejo de 10 TAFs)
•TFIIB: (1 proteína) media la
interacción entre TFIID y la
Polimerasa
•TFIIF: (4 proteínas) estabiliza el
complejo DNA-TBP-TFIIB.
•TFIIE: (4 proteinas) regula TFIIH y
en conjunto promueven la formación la
adición del primer nucleotido del RNA.
•TFIIH: es el complejo de mayor
tamaño (9 subunidades) actividad
helicasa y de reparación de DNA.

La RNA polimerasa (12

subunidades) requiere de estos
factores que permiten:
•Posicionar correctamente la enzima
•Regular su actividad

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Dominio CTD
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 33
El Factor Sigma en la Transcripción
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SEÑALES DE INICIO Y DE TERMINACION
DE LA TRANSCRIPCION 34
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 La transcripción en los eucariotes es mucho
más compleja que en las bacterias
Participan separadamente las 3 ARN
polimerasas y se requieren una serie de
proteínas destacando las denominadas
factores de transcripción que
interaccionan no solamente a nivel del
promotor sino a otros niveles
La cromatina a nivel de la transcripción
debe ser remodelada para permitir el
acceso de enzimas y factores al sector
del ADN que se transcribirá 35
Ing. Jose M. Carpio Carpio - Biologia Molecular - UCSM
INICIACION

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ELONGACION O ALARGAMIENTO DEL
RNA

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TERMINACION

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INHIBIDORES DE LA
TRANSCRIPCIÓN EN
BACTERIAS

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• Rifampicinas: Se une a la subunidad β de la ARN
polimerasa bacteriana e impide la iniciación de la
transcripción.
• Estreptolidigina: También fija a la subunidad β, pero
inhibe la elongacion.

ANTIBIOTICOS DE TIPO I 40
• Actinomicina D: Inactiva la Transcripción de manera
indirecta, el antibiótico se une al DNA, impidiendo la
acción de la Polimerasa.
• Intercalantes: Naranja de Acridina, Daudomicina, Et.Br

ANTIBIOTICOS DE TIPO II 41
 • Novomicina, Acido Nalixidico (Norfloxacina y
Ciprofloxacina): También son Inhibidores Indirectos,
actual sobre la DNA girasa.

ANTIBIOTICOS DE TIPO III 42

 PROCESAMIENTO DE LA
INFORMACION GENETICA

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1. CAPPING
2. ADICION DE LA COLA DE
POLI A
3. REMOCION DE INTRONES
(SPLICING)
EVENTOS EN EL PROCESAMIENTO
DEL MRNA EN EUCARIOTES
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• Es la adiciòn de la 7 metilguanosina al extremo 5’ del
mensajero
• Se forma un enlace 5’ 5’ trifosfato
• Se requiere de la enzima nuclear guaniltransferasa
• La metilaciòn de la guanina ocurre en el citosol y es
catalizada por la guanina 7 metil transferasa. Donante
el SAM (S-Adenosilmetionina)
• La adición del cap estabiliza al mensajero y permite
iniciar la traducción

CAPPING
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• Se adiciona al extremo 3’ del mensajero una cola de 40 a 200
nucleótidos de adenina
• La enzima la poliadenilato polimerasa y usa ATP como sustrato
• Del extremo 3’ del mRNA recientemente formado se retira la
secuencia AAUAAA y se añade luego la cola de poliA
• La cola de poli A estabiliza al mensajero y permite su salida al citosol

ADICION DE LA COLA DE POLI A

AL EXTREMO 3’ DEL MENSAJERO
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• El proceso de remociòn de los intrones y uniòn de los exones se
denomina empalme (splicing).
• El «spliceosoma» es la maquinaria molecular que realiza este proceso
• Se unen proteínas en las vecindades del exòn.
• El 2’ OH de la adenosina del extremo 3’ del exón ataca al fosfato 5’
del inicio del exón.

REMOCION DE INTRONES
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• Se forma un inusual enlace 2’ 5’ fosfodiéster.
• El intrón es liberado como un lazo ( lariat) y es luego degradado
• Las secuencias GU y AG al inicio y al final del intròn.
• Mutaciones a nivel de los sitios de empalme, determina que se
sintetizen proteìnas anormales.
• Se estima que 15 % de las enfermedades genèticas se originan en
mutaciones que afectan el proceso del empalme, como el caso de β
talasemia

REMOCION DE INTRONES
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 5’
Exón 2
Exón 2
Exón 1

3’

Exón 1
3’
A

5’
intrón Intrón eliminado Unión (empalme)
bajo la forma de del exón 1 y 2
Reacciones de transesterificación bastón

SPLICING . CORTE Y EMPALME DURANTE LA

REMOCION DE INTRONES 50
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 51
PROCESAMIENTO DEL RNA
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TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO
DE LA INFORMACIÓN GENICA 52
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