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El documento describe los antibiogramas o pruebas de sensibilidad a antibióticos. Un antibiograma consiste en poner en contacto un germen cultivado con diferentes antibióticos para determinar cuál es el mejor tratamiento. Los antibiogramas miden la sensibilidad de una cepa bacteriana a los antibióticos y permiten seguir la evolución de las resistencias bacterianas.
Originalbeschreibung:
Forma de aprender los tipos de bacterias que se encuentran en nuestro medio
El documento describe los antibiogramas o pruebas de sensibilidad a antibióticos. Un antibiograma consiste en poner en contacto un germen cultivado con diferentes antibióticos para determinar cuál es el mejor tratamiento. Los antibiogramas miden la sensibilidad de una cepa bacteriana a los antibióticos y permiten seguir la evolución de las resistencias bacterianas.
El documento describe los antibiogramas o pruebas de sensibilidad a antibióticos. Un antibiograma consiste en poner en contacto un germen cultivado con diferentes antibióticos para determinar cuál es el mejor tratamiento. Los antibiogramas miden la sensibilidad de una cepa bacteriana a los antibióticos y permiten seguir la evolución de las resistencias bacterianas.
Jefe de la Cátedra de Bacteriología Los antibiogramas o antibioticograma, son métodos de laboratorio que estudian la sensibilidad de un microorganismo a la acción de los ANTIBIOTICOS. El término sensible es muy usado como sinónimo de susceptible. Susceptible significa que un microorganismo es inhibido o muerto en las pruebas in vitro por una concentración del antibiotico accesible en la sangre, cuando ese mismo antibiotico se utiliza in vivo. DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 2 Un "ANTIBIOGRAMA" consiste en poner en contacto al germen que hemos cultivado con distintos antibióticos para ver cual de ellos es el que mejor va como tratamiento.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 3 OBJETIVOS:
Medir la sensibilidad de una cepa
bacteriana que se sospecha que es la responsable de una infección.
Seguir la evolución de las
resistencias bacterianas.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 4 ¿CUANDO DEBEMOS SOLICITAR UN ANTIBIOGRAMA?
A) El microorganismo aislado, causante de la patología, no es uniforme
en su comportamiento frente e los antibioticos usuales; es decir, cuando la bacteria es de un tipo frecuentemente resistente a los antimicrobianos. Ejemplo: bacilos Gram (-), Mycobacterium tuberculosis.
B) En infecciones microbianas graves que comprometen seriamente la
salud del paciente; es decir, cuando es probable que el proceso infeccioso sea mortal, a menos que sea tratado en forma específica, por ejemplo: endocarditis, absceso cerebral, septicemias, osteomielitis.
C) Si se desconoce la susceptibilidad del microorganismo aislado a los
antibioticos de uso frecuente. DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 5 ¿TIPOS DE ANTIBIOGRAMA?
Según las necesidades respiratorias de los microorganismos
se pueden realizar dos tipos de estudios, como son el antibiograma para gérmenes aeróbicos y el antibiograma para gérmenes anaerobios.
El antibiograma para gérmenes aeróbicos son los únicos que
se realizan en forma sistemática en muchos laboratorios.
El antibiograma es una prueba que se utiliza para medir la
susceptibilidad de los microorganismos en presencia de sustancias antibióticas. Esta capacidad puede ser estimada ya sea, por el método de dilución o de difusión.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA REQUISITOS QUE DEBE REUNIR UN ANTIBIOGRAMA:
Debe ser de amplio espectro nutritivo, para que permita el
crecimiento de la mayoría de microorganismos.
Debe tener un pH estable (7,2 - 7,4) y no sufrir
oscilaciones por acción de los microorganismos sobre los componentes del medio; la acidez favorece la actividad de beta-lactámicos, tetraciclina, y novobiocina; y la alcalinidad la de los aminogucósidos y macrólidos.
-No debe contener inhibidores de antimicrobianos como
son peptonas, sales de Ca++ y Mg++, o cualquier otro antagonista por competencia.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA
Las pruebas de susceptibilidad pueden clasificarse en:
PRUEBAS CUANTITATIVAS (DILUCION)
PRUEBAS CUALITATIVAS (DIFUSION)
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8 JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA Es considerado el método de referencia. En este método, placas conteniendo una determinada concentración de un antibiótico son inoculadas con el microorganismo en estudio y luego incubadas por 16 a 18 horas. Después de la incubación, se examina si el organismo crece o no en cada una de las placas, con lo cual se determina la concentración inhibitoria mínima (CIM) para el antibiótico.
MIC (Concentración Mínima Inhibitoria).- Es la
concentración más baja que inhibe el desarrollo de las bacterias después de la incubación nocturna. El valor MIC es entonces comparado con las concentraciones conocidas de la droga obtenidas del suero del paciente o de los fluidos orgánicos del mismo, para en esta forma sentar la respuesta clínica probable.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA En los métodos de dilución en caldo, base de casi todos los métodos utilizados en la actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano, generalmente diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el desarrollo del microorganismo. El caldo más comúnmente usado para estas pruebas es el de Mueller-Hinton suplementado con los cationes magnesio y calcio.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 10 Sobre el agar uniformemente sembrado con el organismo de ensayo, se colocan discos de papel filtro impregnado de antibiótico.
Por difusión se forma un gradiente de
concentración del antibiótico desde el disco hacia la periferia y el desarrollo de microorganismos es inhibido a cierta distancia del disco cuyo diámetro está relacionado, entre otros factores, a la mayor susceptibilidad del microorganismo
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11 JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA •Es el método de difusión en discos, y se lo ha catalogado como un método de referencia en la susceptibilidad antimicrobiana y podrá ser utilizado como una técnica rutinaria en el laboratorio. Este método es apropiado particularmente en pruebas con bacterias de la familia Enterobacteriaceae, pero puede ser también recomendado como un método general para todos los patógenos de crecimiento fácil y rápido, exceptuando los anaerobios estrictos.
•Interpretación: En éste método la interpretación de los resultados
está basado sobre la relación entre la concentración inhibitoria mínima (MCI) y el diámetro de la zona de inhibición
El sistema más simple comprende solamente dos categorías
susceptibles y resistentes, ésta clasificación aunque ofrece muchas ventajas para los propósitos estadísticos epidemiológicos es demasiado inflexible para la utilización del clínico. En el método de Kirby Bauer modificado se reconocen tres categorías de susceptibilidad que son sensible, resistente e intermedio.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 12 Cuando se prepara él inoculo a partir de un cultivo primario, se tocan con el asa de inoculación 4 o 5 colonias bien aisladas y de apariencia morfológica idéntica. Este crecimiento se transfiere a un tubo con caldo nutritivo o caldo de Muller Hinton. Se incuba de 2 a 5 horas en general a una temperatura de 35°C, luego se hace una comparación del caldo cultivado con el nefelómetro, se ajusta la turbidez del caldo diluyéndolo con caldo estéril o solución salina estéril, este ajuste es necesario para asegurar el desarrollo resultante sea confluente. Las cajas son inoculadas mojando la torunda estéril en él inoculo (ésta torunda debe ser de madera), desechar el exceso de caldo por presión y rotación de la torunda contra las paredes del tubo. Extender entonces él inoculo sobre el agar, debe pasar la torunda 2 a 3 veces sobre la superficie del medio, girando cada vez la caja 60 grados, para asegurar una siembra uniforme. Dejar secar la caja sin sobrepasar los 15 minutos antes de aplicar los discos. La caja debe ser colocada en el incubador a 35°C, dentro de los 30 minutos posteriores a su preparación. Después de la incubación se mide el diámetro de cada zona de inhibición, anotándolo en mm.
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Existen diversos factores técnicos que influirán en el tamaño de la zona de inhibición, entre los cuales tenemos:
Densidad del inóculo.
Potencia de los discos de antibióticos
Temperatura de incubación
Tamaño de las cajas, fondo del agar y espacio entre discos
Tiempo de espera para la aplicación de disco
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14 JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA Intermedia: Intermedia:
RESISTENTE Sensible:
Resistente:
Sensible:
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA Intermedia.-
Sensible:
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 17 Zona De Inhibición.- Se considera así al círculo alrededor del disco en el que hay ausencia total de crecimiento bacteriano.
Lectura.- Hay algunas formas de interpretar las zonas de inhibición, las
más comunes son:
Usando una regla; en éste caso la zona de inhibición son medidas en
mm, y los diámetros son interpretados de acuerdo al antibiótico y su concentración en mg.
La tendencia actual; es la de que los técnicos hagan interpretaciones
binarias es decir, sensible o resistente, quedando incluida la respuesta intermedia en la resistente.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 18 Sensible.- Un microorganismo es llamado sensible a un antimicrobiano cuando la infección causada por él es probable que responda favorablemente al tratamiento con éste agente a las dosis usuales recomendadas.
Intermedia.- Cuando la infección es probable que responda
favorablemente el tratamiento a dosis inusualmente altas del antimicrobiano.
Resistente.- Es término que implica la expectativa de que el
microorganismo no responda a una droga dada, independientemente de la dosis y localización de la infección.
La última decisión para usar un antibiótico en particular y la dosis a
ser administrada dependerán no solamente del resultado de la prueba de susceptibilidad, sino también de su interpretación.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 19 MÉTODO DE EPSILON-TEST
Es uno de los métodos más El microorganismo a investigar
recientes que se han se inocula en una placa y presentado en el mercado y sobre ella se deposita la tira resulta de una curiosa del antibiótico (o antibióticos) a combinación de ensayar características de los métodos anteriores. Se trata de una técnica cuantitativa en placa que Tras la incubación de 16-24 permite obtener una lectura horas a 35ºC se observan las directa de CMI en µg/ml, ya placas y se valora la zona de que se emplean tiras inhibición, de forma elíptica, plásticas impregnadas en alrededor de cada tira. concentraciones crecientes de antibiótico indicadas en una escala graduada sobre la propia tira. DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ 20 JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA MÉTODO DE EPSILON-TEST
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 21 MÉTODOS AUTOMATIZADOS
Estos novedosos métodos
utilizan sistemas de micro dilución en medio líquido sobre microplacas con pocillos en "U“.
Interpretan el crecimiento bacteriano en los diferentes pocillos por medio de un autoanalizador.
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JEFE DE LA CATEDRA DE BACTERIOLOGIA 22 DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ 23