Ahmed Mansouri, Max-Plank Institute for

Biophysical Chemistry, Go¨ttingen, Germany

Diana Carolina Becerra Pita

 Tecnología de eliminación
de genes

 Los knock outs se pueden producir eliminando el gen o

induciendo una mutación que desactiva su expresión.

 La eliminación de un único producto génico del genoma

puede arrojar pistas importantes sobre la función de ese
gen a través de el análisis fenotípico del mutante
resultante.

Biotechnology 101, Science 101, ISSN 1931–3950 by Brian Robert Shmaefsky, First published in 2006 , GREENWOOD PRESS
Westport, Connecticut London, pp138
 Investigadores que desarrollaron la tecnología para la
creación de ratones knockout ganaron el Premio Nobel de
Fisiología o Medicina en el año 2007

Molecular Biology and Biotechnology 5th Edition Edited by John M Walker and Ralph Raply. ISBN: 978-0-85404-125-1,2009,
Royal Society of Chemistry 2009, CHAPTER 14 Transgenesis ELIZABETH J. CARTWRIGHT AND XIN WANG, p 390-414
 Figura 2 . Vectores de orientación. Los exones
están indicados por cajas cerradas y etiquetado
de E1 a E5.
Figura 3. Recombinación específica del sitio en
ratones. En un primer paso, un golpe de gracia el
ratón se genera donde el gen de interés es
funcional, pero flanqueado por Sitios LoxP, 'alelo
flojo' (mouse b).
Modelos animales para trastornos genéticos humanos:
• Muchos medicamentos, tratamientos y curas para enfermedades
genéticas humanas tienen desarrollado con el uso de modelos
animales (Chakraborty et al., 2009; Kari et al., 2007).
• Cuando se emplean modelos animales en el estudio de
enfermedades humanas, con frecuencia son seleccionados por
su similitud con los humanos en términos de genética, anatomía
y fisiología.
• Además, los modelos animales frecuentemente tienen ventaja
para investigación de enfermedades experimentales debido a su
suministro infinito y facilidad de manejo (Simmons, 2008)
Los roedores son el tipo más común de mamífero
empleado en Estudios experimentales.
• Entre estos roedores, la mayoría de los estudios
genéticos, especialmente aquellos que involucran
enfermedades, han empleado ratones, porque sus
genomas son muy similares a los humanos.
• El ratón como modelo animal proporciona una nueva
forma de estudiar un vía de señalización en el trastorno
genético que es crítico para desarrollo embrionario
(Barrott et al., 2011).
Otros organismos experimentales comunes incluyen
moscas de la fruta, pez cebra y polluelos.
Modelos de vertebrados Rata
• La rata, que es considerablemente más grande que
el ratón, tiene para muchos años ha sido el
mamífero de elección para fisiológica, análisis
neurológicos, farmacológicos y bioquímicos.
• El tamaño más grande de rata es más ventajoso
que el ratón para recolectar tejidos (más tejido) y
para cirugías. Los modelos de ratas también se
usan para las enfermedades de la sordera
humana.
Por ejemplo, un trastorno auditivo debido a
una mutación en Myosin XVA el gen causa el
fenotipo DFNB3 en humanos (Irshad et al.,
2012).
Los modelos de ratón y rata utilizados para
esta enfermedad son agitador 2 ratones y LEW
/ Ztm-ci2 rata respectivamente (Held et al.,
2011).
El análisis genético en ratas de laboratorio, sin
embargo, es mucho menos avanzado que en los
ratones.
En parte se debe al costo relativamente alto de
la cría de ratas programas y porque hasta hace
poco ha sido mucho más difícil para modificar la
línea germinal de la rata mediante la selección
de genes (Herrera y Ruiz, 2005).
• El ratón (Mus musculus) es particularmente adecuado para
estudios genéticos y es un modelo ampliamente utilizado
de desarrollo mamíferos.
• Su corto tiempo de generación como la rata ha permitido
una gran escala programas de mutagénesis y cruces
genéticos extensos y diversos presenta ayuda en el mapeo
de genes y fenotipos.
• El ratón es popular como modelo animal debido a su
disponibilidad, bajo costo, tamaño, velocidad de
reproducción rápida y facilidad de manejo (Simmons, 2008)
• La capacidad de construir ratones con modificaciones genéticas
predeterminadas a la línea germinal (por tecnología transgénica
y orientación genética en células madre embrionarias) ha sido
una herramienta poderosa en el estudio de genes función y en la
creación de modelos de enfermedad humana (Davidson y
Christiaen, 2006).
• Estas enfermedades incluyen varios tipos de cáncer,
enfermedades cardíacas, hipertensión, trastornos metabólicos y
hormonales, obesidad, diabetes, osteoporosis, enfermedades de
la pigmentación de la piel, sordera, ceguera, trastornos
neurodegenerativos (como Huntington o Alzheimer)
enfermedad), defectos de nacimiento (como paladar hendido y
anencefalia) y disturbios psiquiátricos (incluyendo ansiedad y
depresión) (Rosenthal y Brown, 2007).
•
Modelos de ratón para un desorden genético raro de la sangre
plaquetas, la anomalía de May-Hegglin (MHA) mostró lo mismo
síntomas como ocurren en humanos (Instituto Americano de Física,
2011). • También en la enfermedad priónica genética, examen
histopatológico de las muestras de cerebro de ratones transgénicos
sirvieron como una plataforma ideal para la investigación de esta
enfermedad de manera similar a la humana (Levi et al., 2011).
•
Los modelos de ratón para la sordera han revelado una variedad de
estructuras y funciones defectuosas encontradas en humanos. • En los
últimos años, se ha vuelto esencial usar modelos de ratón como una
herramienta para estudiar enfermedades genéticas, especialmente en
casos de trastornos monogénicos (Ganeshan et al., 2010).
• Pez cebra: Ha habido un aumento muy significativo
en el uso de pez cebra para el estudio de procesos
de enfermedad en humanos. El pez cebra se
reproduce de manera fácil y rápida y tiene un
comportamiento morfológico y similitudes
fisiológicas con los mamíferos.
• Los modelos de pez cebra se han desarrollado para
varios humanos enfermedades, incluidos
trastornos sanguíneos, diabetes, enfermedades
neurodegenerativas y distrofia muscular
(Rubinstein, 2003).
• Polluelo: región del factor de transcripción
RE1-silenciamiento (REST) ​en humanos
fenotipo DFNB55 para la discapacidad
auditiva también se expresa en los
polluelos. Se encontró que el gen REST se
expresaba en células de soporte de epitelio
auditivo del pollo (Irshad et al., 2005;
Roberson et al., 2002).
• Rana: Las ranas del género Xenopus (rana con
garras africana) han sido modelos particularmente
importantes para investigar tanto embrionarias
desarrollo y biología celular.
• También ha habido un trabajo seminal sobre la
replicación cromosómica, cromatina y ensamblaje
nuclear, componentes del ciclo celular y elementos
del citoesqueleto (Beck y Slack, 2001).
Modelos de invertebrados
• Los modelos de invertebrados son a menudo fáciles
y económicos, y pueden ofrecer un gran número de
descendientes y tiempos de generación rápidos.
• Estas características los hacen idealmente
adecuados para alto rendimiento examen genético.
• El gusano redondo Caenorhabditis elegans y la
mosca de la fruta Drosophila melanogaster son los
dos más ampliamente invertebrados estudiados
(Segalat, 2007).
• D. melanogaster se emplea en una amplia variedad de
estudios desde el mapeo temprano de genes, a través de
la vinculación y estudios de recombinación a pantallas
mutantes a gran escala para identificar genes
relacionados con funciones biológicas específicas.
• Defecto de la proteína Myo VIIa que causa el síndrome
del ujier en humanos (Irshad et al., 2005) también
conducen a la sordera en Drosophila (Todi et al., 2005).
• Caenorhabditis elegans es valioso para estudiar el
desarrollo de sistemas nerviosos simples y el proceso de
envejecimiento (Spradling et al., 2006).