Cocos Gram Negativo

Neisseria spp & Moraxella sp

M. Paz
Microbiología UMG-2011
 Género Neisseria
 Únicoreservorio: ser humano
 Dos especies patógenas
 N. gonorrhoeae
• Gonorrea
 N. meningitidis
• Meningitis epidémica/meningitis meningocóccica
 Muchas especies no patógenas habitantes
del tracto respiratorio.
 Género Neisseria
 Neisser (1879)
 Describió al agente causal de la gonorrea
 Leistikow & Loeffler (1882)
 Cultivo por primera vez
 Weichselbaum (1887)
 aisló a N. meningitidis de LCR de un paciente
con meningitis purulenta
 endémica, epidémica y meningococcemia
 estado de portador
 Género Neisseria: Morfología
 Aerobios
 Cocos Gram Negativo
 No móviles
 Crecen en parejas
 Ocasionalmente en tétradas o racimos
 No formadores de esporas
 Los cocos individuales son pequeños (0.8 x 0.6
µm)
 Algunas veces: formas bizarras (autólisis)
 Citoplasma y pared celular son similares entre las
dos especies.
 Género Neisseria: Morfología
 Pared celular: tiene una capa densa y una
membrana externa
 Meningococos: tienen cápsula de polisacáridos
 Gonococos: no cápsula
 Formas coloniales: (gonococos)
 T1 y T2: colonias pequeñas y virulentas
• pili
 T3 y T4: colonias más grandes: avirulentas
• No pili
 Género Neisseria: Metabolismo

Organismo Crece en agar Crece a Oxida Oxida Oxida

sin sangre 22°C Glucosa Maltosa Sacarosa
N. - - + + -
meningitidis
N. - - + - -
gonorrhoeae
 Características de cultivo
 Difíciles de cultivar
 Son susceptibles a ácidos grasos tóxicos y a
metales traza que están contenidos en la
peptona y en el agar (se contrarresta con
sangre, suero, almidón o carbón)
 El agar “chocolate” es más adecuado
 Ambas especies patógenas sufren rápida
autólisis.
 Enzimas autolíticas se inactivan a 65°C por 30 min o
agregando cianuro de potasio o formalina.
 Características de cultivo
 Resistencia a condiciones físicas y químicas es
extremadamente baja
 Susceptibles a desecación
 Mueren a 55°C por 30 min
 Atmósfera de crecimiento
 5-10% de CO2 (jarra con candela)
 Oxidasa (+)
 Oxidan rápidamente DPD o TPD (dimetil o tetrametil
para fenilendiamina)
• Produce un color de rosado a negro en las colonias
Neisseria meningitidis
 Neisseria meningitidis
 Usualmente habita en la nasofaringe sin
causar síntomas
 Segunda causa de meningitis epidémica
(adquirida en la comunidad) en adultos
previamente sanos.
 Cambio muy rápido de estado de sano a
enfermo de gravedad
 Causa también meningococcemia
Características generales de N. meningitidis

 Patogenicidad y virulencia
• Mediada por los pili
• Colonización específica de receptor de las células
no ciliadas de la nasofaringe
• Cápsula antifagocítica de polisacárido que le
permite diseminarse en ausencia de inmunidad
específica.
• Efectos tóxicos mediados por hiperproducción
de lipooligosacárido
 Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de
todas las infecciones
Epidemiología:
• Hospedero natural: humano
• Diseminación persona-persona vía aerosolización de
secreciones respiratorias
• Más alta incidencia en niños menores de 5 años, personas
institucionalizadas y pacientes inmunodeficientes
• Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C
• Neumonía: serogrupos Y y W135
• Infecciones en países subdesarrollados: serogrupo A
• Mayor incidencia en las épocas frías y secas del año en
todo el mundo
 Diagnóstico y Tratamiento
• Tinción de gram de LCR (difícil cuando hay pocos organismos)
• Dx definitivo: cultivo
• m.o. fastidioso y muere rápidamente en condiciones de frío y
sequedad.
• Tx, prevención y Control:
• Inmunidad pasiva por lactancia
• Droga de elección: penicilina y alternativamente:
cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima.
• Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o sulfadiazina
• Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el serogrupo B)
• Vacunas de polisacárido conjugado con proteínas
transportadoras para niños menores de 2 años.
 Cultivo
 Se usa un medio selectivo para recuperar al
meningococo y al gonococo. Cuando está en un
ambiente contaminado con otras bacterias de la
microbiota normal.
 Medio selectivo de Thayer Martin
• Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +), Colistina
(inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos) y Trimetoprim
(inhibe a Proteus spp que ocasiona swarming)
• Ocasionalmente hay cepas de GC sensibles a la
vancomicina, por lo que siempre debe usarse el agar
chocolate también.
 Las colonias requieren 48-72 horas para crecer.
 Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar (similar al
TM, pero usa anisomicina en lugar de nistatina, para
inhibir mejor a Candida albicans).
Cultivo en jarra con candela
Cultivo de N. meningitidis
 Enfermedades asociadas con
Neisseria meningitidis
Después de la diseminación de
organismos virulentos de la nasofaringe:
 Meningitis
 Septicemia (meningococcemia) con o sin
meningitis
 Meningoencefalitis
 Neumonia
 Artritis
 Uretritis
 Infecciones por MGC
• Meningococcemia:
 Síntomas: fiebre alta, escalofríos, dolor
muscular y rash petequial (típico de infecciones
por MGC)
 Enfermedad puede ser crónica, moderada o
fulminante.
 Tipo fulminante: Síndrome de Waterhouse-
Friderichsen caracterizado por CID, hemorragia
dentro de la piel, glándulas adrenales y otros
órganos.
 Muerte rápida por la toxemia generalizada y el
shock.
• La mayoría de los síntomas son debidos a
la actividad de endotoxina.
Rash Petequial
Síndrome de Waterhouse-
Friderichsen
 Curso de la enfermedad
meningocóccica
Receptores para las fimbrias bacterianas (gangliósido GD1)
sobre las células columnares epiteliales no-ciliadas en la
nasofaringe del hospedero.
Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocíticas,
evitando la muerte intracelular.
Replicación intracelular y migración al espacio subepitelial
donde libera fragmentos de membrana.
Hiperproducción de endotoxina (lípido A ) y se disemina
al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente
sanguíneo): causa la mayoría de manifestaciones clínicas
de daño vascular: daño endotelial, vasculitis, trombosis,
CID.
Neisseria gonorrhoeae
 Neisseria gonorrhoeae
 Único hospedero natural: humano
 Portador asintomático es el mayor
reservorio.
 Edad más afectada: 15-24 años
 Patogenia: gonorrea
 Uretritis
 Cervicitis
 Generalidades de Neisseria
gonorrhoeae
 Fácilmente transmitido por contacto sexual
 Diplococos Gram-negativo achatados por el lado de unión.
 Fastidiosos, capnofílicos y susceptibles a temperaturas
frías, a la desecación y a ácidos grasos.
• Requiere medios pre-calentados complejos
• El medio debe llevar almidón soluble para neutralizar la toxicidad de
los ácidos grasos
• Crece mejor en atmósfera húmeda suplementada con CO2
 Produce ácido de la oxicación de glucosa, pero no de
otros azúcares.
 Diagnóstico, tratamiento y
prevención
 Tinción de Gram es precisa en muestras masculinas.
 Cultivo: diagnóstico definitivo
 Biología molecular
 Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y
ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe
evitarse porque ya se presenta mucha resistencia.
 Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con
Chlamydia sp.
 Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1%
 Prevención: educación (ETS)
 NO HAY VACUNA
Crecimiento de GC enMTM
Oxidasa positivo
Prueba de Oxidasa en placa
Prueba de Oxidasa en papel
 Identificación Bioquímica
 Para diferenciar entre las especies de
Neisseria y B. catarrhalis.
• Pruebas de utilización de carbohidratos.
• Oxidación de Carbohidratos
 Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con
azúcares. Requiere una inoculación grande e
incubación sin CO2 y observación por 24-72
horas.
• Resultados: GC: + para glucosa solamente
Azúcares en CTA
 Epidemiología de la Gonorrea
 Serio subregistro
 Diferencia epidemiológica entre hombres y
mujeres
 Mayor reservorio: portador sintomático
 Transmisión sexual
 No hay inmunidad protectora para la reinfección
(en parte por la diversidad antigénica de las
cepas)
 Mayor riesgo de enfermedad diseminada en
pacientes inmunocomprometidos.
 Mujeres
Riesgo post-exposición (1 contacto) es
de 50%
Frecuentemente asintomática y sin dx
Principal reservorio es la portadora
asintomática
Infección genital primariamente en el
cervix, pero también son colonizados la
vagina, la uretra y el recto.
Infecciones ascendentes en 10-20%:
salpingitis, abscesos tubo-ováricos,
enfermedad inflamatoria pélvica,
infertilidad por infección crónica.
Infecciones diseminadas más comunes:
septicemia, infección de la piel y
articulaciones (1-3%)
Puede infectar al infante durante el
parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum
Hombres
Riesgo post-exposición (1 contacto) es
de 20%
Mayoría: sintomático (95%)
Principal reservorio es la portadora
asintomática
Infección genital restringida a la uretra
con descarga purulenta y disuria
Complicaciones raras: epididimitis,
prostatitis y abscesos periuretrales.
Infecciones diseminadas muy raras
Más común en hombres
homosexuales/bisexuales que en la
población heterosexual
 Patogenia de Neisseria gonorrhoeae
 Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la
membrana mucosa intacta
 N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir
membranas intactas o piel con abrasiones.
 Adherencia al epitelio mucoso
 Penetración y multiplicación antes de pasar a través de
las células epiteliales de la mucosa
 Establecimiento de la infección en la capa subepitelial
 Sitios más comunes de inoculación:
• Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer
• Uretra (uretritis) o pene en el hombre
Factores de virulencia asociados a
Neisseria gonorrhoeae
Gonorrea
Ophthalmia neonatorum
Significancia clínica del GC
• Infecciones complicadas
 Ocurren más frecuentemente en mujeres
 Diseminación del cérvix a las trompas de
falopio
• Endometritis
• Salpingitis
• Peritonitis (EIP)
• Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas
• Síntomas: dolor abdominal bajo, flujo
cervical y vaginal anormal, útero blando.
• Puede resultar en infertilidad o en
embarazo ectópico.
Salpingitis
Moraxella catarrhalis
 Moraxella catarrhalis
 Diplococo gram-negativo
 Aerobio y oxidasa positivo
 Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y
clasificación taxonómica como de su consideración de
comensal o patógeno.
 Actualmente, es aceptado como el tercer patógeno más
importante en el tracto respiratorio humano después de
Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae.
 En los últimos 20 años, esta bacteria ha emergido como
un importante patógeno causante de infecciones en el
tracto respiratorio superior de niños y ancianos, e
infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con
enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC).
 Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras
de ß-lactamasas.
 Moraxella catarrhalis
 Micrococcus catarrhalis
 Neisseria catarrhalis
 En 1970, basándose en la diferencia en el
contenido de ácidos grasos y mediante estudios
de hibridación de ADN se demostró la escasa
homología que existía entre N. catarrhalis y las
llamadas "verdaderas" especies de Neisseria,
estando, más cercana al género Acinetobacter.
Así pues, fue reclasificada y transferida al
género Moraxella
 Moraxella catarrhalis
 Actualmente, el género Moraxella engloba cocos
y bacilos cortos relacionados genéticamente
 Bovre propone su división en dos subgéneros:
Branhamella, que englobaría los cocos y
Moraxella para los bacilos cortos.
 Algunos autores prefieren el nombre de
Branhamella catarrhalis
 Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos,
mientras que M. catarrhalis son diplococos
 M. catarrhalis es un importante patógeno del tracto
respiratorio humano, mientras que las especies de
Moraxella rara vez causan infección en humanos.
Patogenia de Moraxella catarrhalis
 En niños:
 Otitis media
 Sinusitis
 Bacteremia
 Meningitis
 En adultos:
 exacerbaciones en pacientes con EPOC
 neumonía en ancianos
 infecciones nosocomiales.
Factores de virulencia de Moraxella
catarrhalis
 LOS (Lípido A)
 Peptidoglucano
 Proteínas de la membrana externa
 Fimbrias
 Cápsula
 Proteínas reguladores del hierro
 Resistencia al complemento
 Diagnóstico de Moraxella
catarrhalis
 Muestras clínicas: Gram, Cultivo y pruebas bioquímicas
 Crece en medios comunes, como agar sangre y agar
chocolate,
 Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris.
 Los criterios más usados para su identificación son los
siguientes:
 Ausencia de pigmentación en agar sangre (no hemolítica).
 Producción de oxidasa y catalasa.
 Producción de DNAasa.
 Hidrólisis de la tributirina.
 Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa, maltosa,
sacarosa y fructosa.
 Reducción de nitratos y nitritos.
 Tratamiento de Moraxella
catarrhalis
 Las cepas de M. catarrhalis son
uniformemente sensibles a las quinolonas,
amoxicilina-clavulánico, cefalosporinas,
ticarcilina, piperacilina, macrólidos,
cloranfenicol y aminoglucósidos.
 Se han comunicado casos aislados de
cepas resistentes a las tetraciclinas,
eritromicina, fluoroquinolonas, macrólidos,
piperacilina y a algunas cefalosporinas