Sie sind auf Seite 1von 71

Los iones son partículas con carga positiva

o negativa que podemos encontrar en


nuestro entorno cotidiano en compuestos
químicos denominados “sales”
átomo o molécula que ha perdido su
neutralidad por un defecto o exceso de su
carga formal. El proceso de pérdida o
ganancia de carga formal se llama
ionización.
pueden ser átomos individuales o grupo de
átomos (iones poliatómicos) que poseen
carga eléctrica neta diferente de cero
Cationes: Son
aquellos que se
encuentran cargados
positivamente.
Aniones: Son
aquellos que se
encuentran cargados
negativamente.
Los aniones y los cationes son
importantes para los seres vivos y
son proporcionados por las sales
minerales disueltas en agua,
éstas se asocian en los procesos
químicos y los iones son
utilizados por el organismo para
realizar funciones que definan su
estabilidad.
La ausencia de iones causa
desequilibrio funcional, y
produce enfermedades que de no
ser atendidas pueden producir la
muerte.
Una sustancia que contiene iones
libres se denomina “electrolito”.
El cuerpo humano contiene
electrolitos que son indispensables
para su funcionamiento. que
cumplen diversas funciones; algunos
de los más importantes son hierro,
sodio, potasio y calcio. Por ello se
recomienda el consumo de estos
elementos en nuestra dieta para
conservar una buena salud.

El sodio, el potasio y el cloro son


los electrólitos más comunes en el
organismo.
Un electrolito fuerte Un electrolito débil es
es toda sustancia que una sustancia que al
al disolverse en agua disolverse en agua lo
lo hace hace parcialmente y
completamente y produce iones
provoca parcialmente, con
exclusivamente la reacciones de tipo
formación de iones de reversible.
manera irreversible.
los electrolitos son importantes
porque son lo que tus células utilizan
para mantenerse vivas y para llevar
los impulsos nerviosos a través de
ellos.
sirven para acelerar procesos
químicos de absorción y nivelación de
sales en la sangre para evitar
deshidratación.

Estos electrolitos deben ser


reemplazados para mantener las
concentraciones de electrolitos de los
fluidos de tu cuerpo constante.
POTASIO: es un mineral muy importante
para el cuerpo humano, ayuda al
metabolismo y funciones corporales y es
esencial para el funcionamiento
apropiado de todas las células, tejidos y
órganos
Es necesario para la formación de los
músculos y el crecimiento normal del
cuerpo.

SODIO: sirve para regular la presión


arterial y el volumen sanguíneo.también
es crucial para el funcionamiento de
músculos y nervios.

Los iones de hierro Fe+2 son parte de la


hemoglobina, que es la molécula que
transporta el oxígeno en la sangre.
Ayuda a llevar oxigeno a la sangre y
despues a las celulas
Los iones de calcio Ca+2 sirven para
construir y renovar la masa de nuestros
huesosAdemás los iones de calcio también
participan en la conducción de los impulsos
nerviosos.
En los alimentos se encuentran los iones
que necesita nuestro organismo; si
consumimos una dieta balanceada
tendremos todos los iones que necesitamos.
Por supuesto, también consumimos iones
por medio del agua que ingerimos
diariamente.
En bebidas deportivas
Sueros
Bebidas rehidratantes
Bebidas energeticas
En Todos los citricos especialmente los de
mayor acidez como el limon y la naranja
BIOSENSORES

Utilizan la especificidad de los procesos biológicos:


Enzimas x Sustratos
Anticuerpos x Antígenos
Lectinas x Carbohidratos
Complementariedad de ácidos nucleicos.
Ventajas:
Reutilización
Menor manipulación
Menor tiempo de ensayo
Repetitividad
Tipos y usos mas comercializados:
1. Tiras colorimétricas
2. Electroquímicos:
Potenciométricos: Glucosa, Lactato, Glicerol,
Alcohol, Lactosa, L-aminoácidos, Colesterol
Amperométricos: Glucosa, Sacarosa, Alcohol
3. Ópticos: BIAcore: Ag proteicos.
Propiedades de un buen Biosensor
BIOSENSORES

1. Control de metabolitos críticos durante las operaciones quirúrgicas.


2. Consultas y Urgencias Hospitalarias:
– Obvia análisis caros y lentos en laboratorios centrales
– Acelera la diagnosis y el comienzo del tratamiento
– Menor riesgo de deterioro de la muestra
3. Diagnóstico Doméstico:
• Ensayos de Embarazos
• Control de Glucosa en diabéticos
4. Aplicaciones in vivo:
– Páncreas artificial
– Corrección de niveles de metabolitos
– Problemas : Miniaturización y Biocompatibilidad
5. Aplicaciones Industriales, militares y medio ambientales:
– Alimentación
– Cosmética
– Control de Fermentaciones
– Controles de Calidad
– Detección de Explosivos
– Detección de gases nerviosos y/o toxinas biológicas
– Control de polución.
TIPOS DE BIOSENSORES

1. BIOSENSORES ELECTROQUÍMICOS
Amperométricos: Determinan corrientes eléctricas asociadas con los
electrones involucrados en procesos redox
Potenciométricos: Usan electrodos selectivos para ciertos iones
Conductimétricos: Determinan cambios en la conductancia asociados con
cambios en el ambiente iónico de las soluciones
2. BIOSENSORES TERMOMÉTRICOS
3. BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS
4. BIOSENSORES ÓPTICOS
De onda envanescente
Resonancia de plasma superficial
5. BIOSENSORES CELULARES
6. INMUNOSENSORES
UNIDADES FUNCIONALES
DE UN BIOSENSOR
Material biológico + Analito Analito unido Respuesta biológica

Respuesta Electrónica

Respuesta (Máxima respuesta electrónica posible) x (Concentración del analito)


=
electrónica (Constante de semisaturación) + (Concentración del analito)
Cinéticas de reacción en biosensores
TIPOS DE BIOSENSORES

1. BIOSENSORES ELECTROQUÍMICOS
Amperométricos: Determinan corrientes eléctricas asociadas con los
electrones involucrados en procesos redox
Potenciométricos: Usan electrodos selectivos para ciertos iones
Conductimétricos: Determinan cambios en la conductancia asociados con
cambios en el ambiente iónico de las soluciones
2. BIOSENSORES TERMOMÉTRICOS
3. BIOSENSORES PIEZOELÉCTRICOS
4. BIOSENSORES ÓPTICOS
De onda envanescente
Resonancia de plasma superficial
5. BIOSENSORES CELULARES
6. INMUNOSENSORES
Biosensores
Electroquímicos
Amperométricos:
“El electrodo de Oxígeno”
Electrodo de Oxígeno
Electrodo de Oxígeno

(A) Disco de resina epoxy


(B) Cátodo de platino en el centro de un saliente.
(C) Ánodo de plata en forma circular
(D) Anillo de goma que sostiene un papel
espaciador empapado en un electrolito y una
membrana de polytetrafluoroethylene que separa
los electrodos de la mezcla de reacción.
DETERMINACION DE GLUCOSA
DETERMINACION DE GLUCOSA
DETERMINACION DE SACAROSA

Invertasa Glucosa-oxidasa
Glucosa

Sacarosa
Electrodo

flujo
O2
Fructosa
Glucosa

D-gluconolactona
respuesta H2O2

glucosa
sacarosa

tiempo
DETERMINACION DE
LA FRESCURA DEL PESCADO

Tras la muerte, los nucleótidos del pescado sufren una serie de reacciones de
degradación progresiva:

ATP > ADP > AMP > IMP > HxR > Hx > Xantina > Acido úrico
DETERMINACION DE
LA FRESCURA DEL PESCADO
BIOSENSOR:
xantina-oxidasa y nucleósdio fosforilasa inmovilizadas sobre una membrana de
triacilcelulosa de un electrodo de Oxígeno.

K < 20 El pescado puede ser comido crudo.


20 > K < 40 El pescado debe ser cocinado.
K > 40 Pescado no apto para el consumo

Los nucleótidos se podrían determinar utilizando el mismo electrodo y


muestra, pero añadiendo nucleotidasa y adenosín-deaminasa
Varios mecanismos redox
Mediadores redox en
biosensores
amperométricos
Miniaturización

Posible por la capacidad del


pirrol para polimerizar mediante
oxidaciones electroquímicas en
condiciones suficientemente
suaves como para atrapar
enzimas y mediadores sin
desnaturalizarlos
Microelectrodo glucosa/lactato
Se puede recubrir la superficie de pequeños electrodos polimerizando
pirroles junto con biocatalizadores y mediadores, utilizando métodos de
micro fabricación de microprocesadores, en incluso disponiendo varios
sensores en los mismos
Biosensores Electroquímicos Potenciométricos

Determinan cambios en la concentración de iones concretos


Biosensores potenciométricos
Biosensor potenciométrico
Biosensores Electroquímicos Conductimétricos

Detectan cambios en conductividad eléctrica


causados por alteraciones en la concentración de
iones
Sensor de Urea

NH2CONH2 +3H2O

Ureasa

2HN 4 + + HCO3- + OH-

Otros ejemplos:
amidasas,
decarboxilasas,
esterasas,
fosfatasas y
nucleasas.
Biosensores
Termométricos:
“Sensores bioquímicos y
TELISA”
Biosensor
termométrico

Precisa un aislamiento Correcto


Puede detectar diferencias de 0,0001 ºC
Reacciones usadas en biosensores termométricos
Biosensores Termométricos

1) Poco éxito comercial


2) Ventaja: se puede acoplar fácilmente varias reacciones en un
único reactor
3) Ejemplo:
1) Detector de Lactato
Lactato + O2------(lactato -oxidasa)---> piruvato + H2O
Piruvato + NADH+ H+--(lactato deshidrogenasa)--> lactato + NAD+
4) Puede utilizarse células viables
5) Puede acoplarse a un inmunoensayo enzimático: ELISA
termométrico o TELISA
Biosensores
Piezoeléctricos:
“Narices bioelectrónicas”
Aprovechan las propiedades eléctricas de los cristales:
- En transmisores y emisores de radio
- En transistores
- En chips
Efecto Piezoeléctrico

“Producción de un campo eléctrico por separación de las cargas positivas y


negativas en algunos tipos de cristales al someterlos a ciertas tensiones”

1) Si un cristal piezoeléctrico se somete a un campo


eléctrico se deformará.
2) Si un cristal piezoeléctrico se somete a un campo
eléctrico que oscila a una frecuencia determinada
vibrará con una frecuencia característica.
Efecto Piezoeléctrico

1) La frecuencia de resonancia se encuentra en el


rango de los 10 MHz (radiofrecuencia).
2) La frecuencia de resonancia depende de:
• La composición del cristal
• El Grosor
• La forma en que fue cortado
3) Un cristal piezoeléctrico varía su frecuencia de
resonancia cuando se adhieren moléculas a su
superficie.
Biosensores Piezoeléctricos

1) Se detectan variaciones muy pequeñas en la


frecuencia de resonancia: cantidades de hasta un
ngr/cm2
2) La medida se compra con un electrodo de
referencia con cristal sin material biológico.
3) Ejemplos:
1) Detectores gaseosos: SO2, CO, HCl, NH3, CO2
2) Detector de Cocaina
3) Detector de Formaldehido
4) Detector de Pesticidas (Organofosforados)
Biosensores Piezoeléctricos

1) Detector de Cocaína:
• Anticuerpos contra cocaína fijados
sobre un cristal piezoeléctrico.
• Detecta una parte por billón
• 50 MHz de cambio en la frecuencia de
resonancia.
• Se limpia en segundos por aireación.
Biosensores Piezoeléctricos

2) Detector de Formaldehido:

CH2 +H2O +NAD+ g NADH +HC02H + H2

Catalizada por la formaldehido deshidrogenasa


inmovilizada con glutation (cofactor) por
entrecruzamiento con glutaraldehido en un
cristal de cuarzo a 9 MHz
Biosensores Piezoeléctricos

3) Detector de Pesticidas Organofosforados:

• Colinesterasa inmovilizada en un cristal


de cuarzo mediante glutaraldehido.
Biosensores Piezoeléctricos

Inconvenientes:
• Muy influidos por la humedad.
Baja = poco sensibles
Alta = desaparece el efecto piezoelectrico
• Inutilizables en líquidos.
Introducir y secar
Biosensores Ópticos:

Permiten el uso de materiales detectores no eléctricos, seguros en ambientes


peligrosos o sensibles (in vivo)
No precisan sensores de referencia
Biosensor de fibra
óptica para lactato

• Detecta cambios en la en
la concentración de
oxígeno determinando la
reducción de la
fluorescencia de un
fluorocromo (quenching)
Biosensor de célula óptica para albúmina sérica

• Detecta la absorción de luz a


630 nm que pasa a través de la
célula detectora.
• Se evalúa el cambio de
amarillo a azul verdoso del verde
de bromocresol cuando se une a
la albúmina sérica a pH 3.8
• Respuesta lineal a la albúmina
en un intervalo de 5 a 35 mg/cm3
Biosensores Ópticos

1) Detección de Vapores:
• Ensayo sólido colorimétrico que detecta vapor de
alcohol utilizando alcohol-oxidasa, peroxidasa y 2,6-
diclorindofenol sólidos dispersados sobre placas de TLC
(cromatografía en capa fina) de celulosa microcristalina
transparente.
2) Tiras colorimétricas de un solo uso:
• Los más utilizados: análisis de sangre y orina.
• Control de la glucemia en diabéticos
- Glucosa oxidasa, peroxidasa de rábano y un
cromógeno que cambia el color al ser oxidado

Cromógeno (2H) + H2O2----(peroxidasa)--->colorante + 2H2O


Biosensores Ópticos

3) Reacciones luminiscentes:
• Utilización de luciferasa
• Detecta la presencia de microorganismos en orina al
liberar ATP en su destrucción

Luciferina + ATP----(luciferasa)---> oxiluciferina + CO2 + AMP + ppi + luz


Biosensores ópticos de onda
evanescente

Menor índice de refracción >

Mayor índice de refracción >

“Un haz de luz será reflejado en su totalidad cuando incida sobre una superficie
transparente presente entre dos medios, cuando proceda del medio con mayor
índice de refracción y cuando el ángulo de incidencia sea mayor que un valor
critico”
Biosensores ópticos de onda
evanescente

Menor índice de refracción >

Mayor índice de refracción >

“En el punto donde se produce la reflexión, se induce un campo electromagnético


que penetra en el medio que tiene menor índice de refracción”
“Este campo es denominado onda evanescente y decae exponencialmente con la
distancia de penetración, desapareciendo tras unos pocos nanómetros”
Biosensores ópticos de onda
evanescente

Menor índice de refracción >

Mayor índice de refracción >

“La onda evanescente decae exponencialmente con la distancia de penetración,


desapareciendo tras unos pocos nanómetros”
“La profundidad a la que penetra depende del índice de refracción, de la longitud
de onda de la luz utilizada y puede ser controlada con el ángulo de incidencia.
Biosensores ópticos de onda
evanescente

Menor índice de refracción >

Mayor índice de refracción >

“La onda evanescente puede interaccionar a su vez con el medio, provocando un


campo electromagnético que puede volver al medio con mayor índice de refracción,
dando lugar a cambios en la luz que continúa a lo largo de la guía de ondas.”
Inmunosensor de onda evanescente

Especialmente indicados para


inmunoensayos:
• No es necesario separar el resto
de los componentes de una muestra
clínica
• La onda solo penetra hasta el
complejo antígeno anticuerpo
• Se excitan fluorocromos unidos a
la superficie mediante la onda
evanescente, y la luz emitida por
ellos volverá a la fibra óptica
• La cantidad de muestra necesaria
es mínima
Resonancia de plasma superficial

“Si la superficie del cristal está recubierta por una capa metálica (oro, plata, paladio)
los electrones de su superficie pueden oscilar en resonancia con los fotones
generando un onda de plasma superficial y amplificando el campo evanescente en
la cara mas alejada del metal”
Resonancia de plasma superficial

“Si la capa de metal es lo suficientemente delgada como para permitir al campo


evanescente penetrar hasta la superficie opuesta, el efecto será muy dependiente
del medio adyacente al metal”
Resonancia de plasma superficial

“Este fenómeno sucede sólo cuando la luz incide con un ángulo específico, el cual
depende de la frecuencia, el grosor de la capa metálica y el índice de refracción del
medio que se encuentra inmediatamente sobre la superficie metálica”
Resonancia de plasma superficial

“La producción de esta resonancia de plasma superficial absorbe parte de la energía


de la luz reduciendo la intensidad de la luz reflejada internamente”
Resonancia de plasma superficial

“Los cambios que suceden en el medio provocados por interacciones biológicas


pueden ser apreciados detectando los cambios de intensidad de la luz reflejada o el
ángulo de resonancia”
Cambio en la absorción por efecto de la resonancia de
plasma superficial

“Detección de la
gonadotropina coriónica
humana (hCG) mediante
un anticuerpo unido a la
superficie del biosensor:
La unión cause un cambio
en el ángulo de
resonancia”
Resonancia de plasma superficial

• Permiten detectar partes por millón


• Un análisis típico requiere 50µl de muestra y tarda 5 a 10 minutos
• Puede utilizarse con DNA y RNA.
Biosensores celulares
Inmunosensores
Tipos de inmunosensores