Universidad

de Nariño
Laboratorio de Bioquímica
 DETERMINACION DE
VITAMINAS EN
MUESTRAS BIOLOGICAS
Alejandra Canchala
Amanda Rosas
Camila Vélez
Fernanda Rosero
FRUTA CITRICA FRUTA NO CITRICA

VERDURAS
PREPARACION DE LA MUESTRA BIOLOGIA
• FRUTAS CITRICAS • FRUTAS NO CITRICAS Y
VERDURAS
1ml de jugo
1g de la
muestra
4ml acido
oxálico al 0.15
%

Acido
oxálico al
0.15%
D2
Fruta no
cítrica
1ml de
cada
V-final 5 extracto
D3
ml Verdura
 Esperar
D1= FRUTAS CITRICAS B= blanco decoloración
D2=FRUTAS NO CITRICA
D3= VERDURAS
Reactivo Tubo Tub Tubo Tub Tub Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo
s(ml) B o1 2 o3 o4 5 6 D1 D2 D3
O- 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
nitroanili
na
Nitrito de 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
sodio

Etanol 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8
al 96%
Vitamin 0,1 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
ac
Ac. 1,0 0,9 0,8 0,6 0,4 0,2
oxálico
extract 1,0 1,0 1,0
o
NaOH 1, 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2
10% 2
3,8 3,8 3,8
Agua 3, 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8
destilad 8
a

Mezclar el contenido
de cada uno y
pasarlo a una celda
del
espectrofotómetro
Cómo hacer una
espectrofotometría
PARTE 1
 Encender el espectrofotómetro

Limpiar las
cubetas

Colocar la cantidad adecuada de

la muestra en la cubeta.
 Preparar la solución de control.

Limpiar la parte exterior de la cubeta.

PARTE 2
Elegir y determina la longitud
de onda de luz con la que
analizar la muestra.

Calibrar el aparato utilizando

la solución de muestra.

Retirar la solución de control

y comprueba la calibración.
Medir la absorbancia de la
muestra

Repetir la muestra con las

diversas longitudes de onda
lumínica.
PARTE 3
 Calcular la transmitancia y la
absorbancia de la muestra.

Representa los valores de

absorbancia frente a los de
longitud de onda en una gráfica
GRACIAS POR
SU ATENCION