“Los mejores hombres

son producto

de sus propios
 Laboratorio # 3

Bacteriología
 Objetivos del laboratorio
 Entender la clasificación de las bacterias de
acuerdo a sus características
 Describir las estructuras y morfología de las
bacterias
 Prácticar técnicas de cultivos de bacterias
 LA CÉLULA
 Unidad básica de los organismos

Unicelular
Características de los seres vivos:
•Movimiento
•Respiración
•Metabolismo
•Reproducción
•Responden a estímulos Pluricelular
 LA CÉLULA
Dos tipos de células:
Eucariótica Procariótica
CÉLULA EUCARIÓTICA

 Eu = verdadero
Karios = núcleo
 Organelos
definidos
 Grande y
compleja
CÉLULA PROCARIÓTICA
 Pro = Antes
Karios = núcleo
 Pequeña y simple
 Clasificación
 Reinos
 Categoría
taxonómica formada
por fila o divisiones
relacionados
 Considerada la
categoría más alta
hasta finales del
s. XX
 Clasificación
 Se reconocen cinco reinos en la actualidad
 Prokaryotae: organismos unicelulares, bacterias
y algas llamadas cianobacterias. Célula
procariótica
 Protista: organismos que solo tienen una célula
eucariótica
 Fungi: (hongos) descomponedores, parásitos

(patógenos)
 Plantae: organismos que usan clorofila para

captar la energía lumínica y convertirla en

alimento (fotosíntesis). Son autótrofos
 Animalia: organismos heterótrofos
 Dominio
 Nivel taxonómico más alto
Dominio Archaea
Arqueas:

•Halogeometricum
borinquensis

•Haloterrigena
thermotolerans
 Dominio Bacteria

•Células procariotas (estructura simple)

•Carecen de núcleo u organelos
limitados por una membrana
•Tienen importancia positiva y negativa
Cianobacterias
•Eran conocidas como algas azul-
verdosas
•Organismos fijadores de nitrógeno
•Abundantes en charcas y lagos
Dominio Eukarya
•Se encuentran
los diferentes
reinos
•Organismos
con núcleo
verdadero
Bacterias
 Bacterias
•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)
•Células microscópicas que se miden en micras (u)
•Mayoría presentan pared celular compuesta de
peptidoglucano (polimero de proteínas y
carbohidratos)
•Reproducción por fisión binaria (asexual)
•Material genético encontrado en plásmidos
•Algunas poseen cápsula
•Pueden formar colonias
 Bacterias Formas comunes
•Crecimiento de
las colonias
•Su morfología
y tamaño se Márgenes comunes
utilizan para
identificar las
especies de
bacterias Características de la superficie
 Tinción Bacteriana
•Utilización de tintes para identificar
bacterias
•Tinción Gram
•Células responden al tinte de acuerdo a
la complejidad y composición de su pared
celular (pared delgada o gruesa)
•Bacterias Gram +
•Gram –
•Gram variable (menos común)
 Tinción Gram
Bacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular simple Pared celular compleja

Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina

No capa externa de Capa externa de

lipopolisacáridos lipopolisacáridos

Retienen cristal violeta/iodo- Retienen safranina-color

color azul/violeta rojo/rosado
Parte experimental
 Técnicas de asepsia
 Contaminación de cultivos
 Trabajamos con posibles patógenos
 Limpiar mesas con Lysol
 Lavarse las manos
 Utilizar zafacón
 Utilizar guantes
 Utilizar bata
Ejercicio # 1: Preparación de laminilla
 Preparar laminilla con muestra de sarro
 Procedimiento:
 Gota de agua en laminilla
 Raspar sarro con palillo

 Pasar palillo en gota de agua

 Secar la laminilla utilizando lámpara de alcohol

 Derramar cristal violeta a la laminilla (2-3 gotas)

 Lavar exceso de tinte

 Secar con papel especial

 Observar preparación a través del microscopio

 Dibujar lo observado.
Ejercicio # 2: Observación de laminillas
 Observar laminillas
 Bacterias - tinción gram
 Bacilos
 Cocos
 Otras morfologías
 Dibujar lo observado
 Ejercicio # 3: Morfología bacteriana
 Observar bajo
estereoscopio las
placas Petri para
identificar la
morfología de
las colonias
Ejercicio # 4: Exposición de platos
 Tomar muestra de aire, agua, suelo, entre otros,
utilizando la técnica a explicarse en el laboratorio
 Colocarla en las placas Petri conteniendo un
medio de cultivo (TSA) utilizando las técnicas
asépticas correspondientes
 Cerrar con parafina y rotular las placas: nombre,
sección, clave, instructor.
 Incubar a 25°C por 48 hrs
 Anotar y dibujar los resultados
 Tomar en consideración a las bacterias, no a los
hongos
 Ejercicio # 5: Control de crecimiento
Bacteriano
 Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o
antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo
el crecimiento de bacterias
 Inocular de forma estriada la muestra de bacterias en el
medio de cultivo
 Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes
sustancias químicas, sobre el agar y un disco con agua
(control)
 Rotular las placas
 Incubar a 37°C, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los
resultados (medir la zona de inhibición-cm)
 Informe Escrito (40 pts)
 Será solo del ejercicio de control de
crecimiento bacteriano
 Página presentación
 Introducción (incluir objetivos)
 Materiales y métodos
 Análisis de resultados (incluir gráficas, dibujos y/o
tablas)
 Conclusión
 Bibliografía (mínimo cinco)