Fosforilación Oxidativa

Ideas previas

Planteo de preguntas

• ¿En qué consiste?

• ¿Dónde ocurre?
• ¿Cómo se regula?
• Interacción con otras vías metabólicas

1
 Hipótesis quimiosmótica (Peter Mitchell, 1961)

1) Flujo de electrones a través de una cadena de transportadores unidos a una membrana.

2) La energía libre de los procesos de transporte electrónico (exergónicos) es acoplada para el
proceso de trasporte de protones (endergónico) a través de una membrana impermeable a
ellos. Se genera así un potencial electroquímico de membrana.
3) El flujo de protones a través de canales protéicos específicos de membrana provee energía
libre, que es usada para catalizar la síntesis de ATP por una proteína de membrana (ATP
sintasa) que acopla el flujo de protones a la fosforilación del ADP.

2
En eucariotas la PO transcurre en la mitocondria

3
Los electrones pasan a través de una serie de transportadores
ubicados en la membrana interna mitocondrial

4
 Cofactores del trasporte electrónico

Transportadores solubles y grupos protéticos

5
 Transportadores solubles y grupos prostéticos

A O B +
H
H 3C N C
5 C NH e-
C 1 C
O H3C N N O
H 3C N C
5 C NH R
C 1 C Flavoquinona
O
H 3C N N O (FMN o FAD) H
H3C N C
CH 2 5 C NH
H
HC OH C 1 C
+ H3C N N O
HC OH H
HC OH NH 2 R
Flavosemiquinona
CH 2
N
N (FMN. o FAD.)
O O HC
CH O
-O P O P O CH 2 N N
O H
H 3C N C
O O C H H C 5 C NH
H H C 1 C +
H 3C N N O H
OH OH H
R
e-
FMN (en negro) o FAD (en negro y azul)
Flavohidroquinona
los átomos reactivos están en rojo (FMNH2 o FADH2)

6
Centros hierro-azufre

7
 Complejo I

NADH + Q + 5H+N => NAD+ + QH2+ 4H+P 8

 ¿Como llega la quinona al sitio redox?

• Zickermann et al., 2009

9
 ¿Por dónde pasan los protones?

Zickermann et al., 2009

• Las subunidades ND2, ND4 y ND5 contienen muchas alfa hélices.
• Un glutamato (E) y una lisina (K) muy conservados.
10
• Subunidades homólogas a antiportador Na+/H+ de bacterias.
 Efremov et al., mayo 2010

Figure 4 | Proposed model of proton translocation by complex I. NADH, via FMN (magenta), donates two
electrons to the chain of Fe-S clusters (red and yellow spheres), which are passed on (blue line), via
terminal cluster N2, to the quinone (dark blue, moved out of the membrane by about 10A ° ). Electron
transfer is coupled to conformational changes (indicated by arrows) in the hydrophilic domain,
observed13 for Nqo4 four-helix bundle (green cylinders) and Nqo6 helix H1 (red). These changes are
transmitted to the amphipathic helix HL (magenta), which tilts three discontinuous helices (red) in
antiporter-like subunits, changing the conformation of ionizable residue inside respective proton
channels, resulting in translocation of three protons. The fourth proton is translocated at the interface
of the two main domains. The hydrophilic domain surface is shown in grey, whereas the membrane11
domain surface is coloured as in Fig. 3.
Modelo de Bombeo de protones en el complejo I

Tomoko Ohnishi Nature 465, 428–429 (27 May 2010)

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0959440X11001060
12
Complejo II

13
Complejo I y complejo II

14
Complejo III

15
Complejo III, ciclo Q

16
Complejo IV

17
Fuerza protón motriz

18
 ATP sintasa

19
http://www.sigmaaldrich.com/life-science/metabolomics/learning-center/metabolic-pathways/atp-synthase/atp-animation.html
Mecanismo ATP sintasa

20
Transporte de nucleótidos y fosfatos

21
¿Cómo llegan los electrones del NADH a la matriz mitocondrial?

22
Misceláneas: ATP sintasa durante hipoxia

23
“Hot in the city tonight” Billy Idol

24
Generación de calor en mamíferos

25
FIN

26
Cadena de transporte de electrones en eubacterias (E. Coli)

27
Cadena de transporte de electrones en bacterias
quimioautotróficas

28
Demostración experimental de la Fo y gamma

Direct observation of the rotation of F1-ATPase.

Noji H, Yasuda R, Yoshida M, Kinosita K Jr.
Nature. 1997. 386, 299-302.

29
Mecanismo catalítico de la F1

30