INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE CONTROL BIOLÓGICO DE MEDICAMENTOS

Análisis microbiológico del agua de uso farmacéutico

Profesoras:
QBP Alicia Izquierdo Martínez
9FM1
QFI Guadalupe del Carmen Herrera Villegas
Dra Alicia Jiménez Alberto
Equipo 1:
Aguirre Landeros Blanca Alicia
Juárez Díaz Rosa Jacqueline
Importancia del agua en la industria
farmacéutica.
El agua es el elemento más empleado en la Industria
Farmacéutica. No sólo es una materia prima del proceso
productivo, sino que además es usada para procesos de
limpieza y enjuague, estando en contacto continuo con
una gran variedad de productos y equipos farmacéuticos.

El objetivo de un programa de seguimiento

microbiológico del sistema de agua es proporcionar
suficiente información para controlar y evaluar la calidad
microbiológica del agua producida.
Proceso de obtención de muestras para
análisis de agua.
Sistemas de tratamiento del agua
 Requerimientos de almacenamiento
• Uso de tanques cerrados
• Superficies lisas
• Con rociado en la parte superior para
evitar la corrosión y formación de
biocapas
• Sistemas de venteo  Membranas de
retención microbiana acoplada a un
venteo atmosférico.
• Discos de ruptura con alarma para
mayor protección.
Clasificación del agua en la Industria Farmacéutica
Tipo de agua Características fisicoquímicas y/o microbiológicas
Agua potable: EI Agua potable es la fuente de agua pH: 6.5-8.5
prescrita para la producción de agua para uso Cloro residual 0.2-1.5mg/L
farmacéutico. Color: 20 unidades de color verdadero en la escala de
platino-cobalto
Olor y sabor: Agradable
Nivel de acción microbiológico: 500 UFC/mL
Organismos coliformes: Ausencia o no detectables
Agua purificada nivel 1: Se usa como ingrediente en Ia Conductividad: <1.3μS/cm a 25°C
fabricación de productos farmacéuticos no Carbono Orgánico Total (TOC): <0.500mg/L
inyectables, en la limpieza de algunos equipos y en las Nivel de acción microbiológico: >100UFC/mL
fases finales de síntesis de algunos principios activos
Agua purificada nivel 2: Se usa como ingrediente en Ia Conductividad: <1.3μS/cm a 25°C
fabricación de productos farmacéuticos no inyectables Carbono Orgánico Total (TOC): <0.500mg/L
que requieren de una alta pureza química y Nivel de acción microbiológico: >100UFC/mL
microbiológica.
Clasificación del agua en la Industria Farmacéutica
Tipo de agua Características fisicoquímicas y/o microbiológicas
Agua para fabricación de inyectables: Como vehículo Conductividad: <1.3μS/cm a 25°C
o solvente en la fabricación de productos Carbono Orgánico Total (TOC): <0.500mg/L
farmacéuticos inyectables, fabricación de principios Endotoxinas: <0.25UE/mL
activos de usa parenteral, también se usa en los Nivel de acción microbiológico: >10UFC/100mL
últimos pasos de Ia limpieza de equipos, tuberías y
recipientes involucrados en estos procesos.
Agua estéril para uso inyectable: Es usada como Endotoxinas: <0.245UE/mL
diluyente de preparaciones parenterales.
Agua bacteriostática estéril para uso inyectable: Para pH: 4.5-7.0
fabricación de inyectables esterilizada, que contiene Endotoxinas: <0.5UE/mL
uno o varios agentes antimicrobianos.
Agua estéril para irrigación: Para fabricación de Endotoxinas: <0.25UE/mL
inyectables esterilizada y en envases de mas de un
litro de capacidad y con diseño especial para vaciado
rápido durante su uso.
Agua estéril para inhalación: Se usa en inhaladores o pH: 4.5-7.5
para preparar soluciones para inhalacion. Endotoxinas: 0.5UE/mL
Clasificación con base en la calidad microbiológica

• La verificación de la
calidad microbiológica del
agua potable incluye el
análisis de la presencia de
Escherichia coli, un
indicador de
contaminación fecal.
• La presencia de E. coli
constituye una prueba
concluyente de
contaminación fecal
reciente y no debe
encontrarse en el agua.
Límites permisibles de características
bacteriológicas.
El Agua potable debe cumplir con los requisitos de la versión vigente
de la Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA1-1994, Salud Ambiental.
Agua para uso y consumo humano. Limites permisibles de calidad y
tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilización.
Los Niveles de Alerta y Acción.

Nivel de Alerta Nivel de Acción

• Son niveles que, al ser • Son niveles que, al ser
excedidos, indican que el excedidos, indican que el
proceso puede haberse desviado proceso se ha desviado de sus
de sus condiciones normales de condiciones normales de
operación.
operación, son una alarma y no
necesariamente requieren de • EI rebasarlo implica tomar una
una acción correctiva. Estos acción correctiva para que el
proceso regrese a sus
deben ser establecidos por el condiciones normales de
fabricante. operación.
 NIVEL DE ALERTA NIVEL DE ACCIÓN

No necesariamente requieren una Requieren una acción correctiva para

acción correctiva. regresar a las condiciones normales.

Establecen los procedimientos a seguir o implementar cuando hay algún incumplimiento.

Estos niveles al ser excedidos, indican que el proceso puede haberse desviado de las condiciones
normales de operación

Son establecidos por el fabricante

En ellas se incluye:
- Revisión del diseño de equipos
- Periodos de colecta/análisis
- Revisión de datos del proceso
- Aseguramiento de sensibilidad a la contaminación
Pruebas fisicoquímicas de control de calidad
• Cloruros • Sulfatos
Cl- + AgNO3  NO3- + AgCl↓ SO4 -2 +BaCl2  BaSO4 + 2Cl-

• Metales pesados • Dióxido de carbono

Detecta Pb, Hg, Bi, As, Sb, Cd, Ca(OH)2 + CO2  CaCO3 + H2
Ag, Cu, Mo…
• Calcio
(NH4)2C2O4 + CaCl2  CaC2O4 + 2NH4Cl
Cloro residual
• El cloro presente en el agua se aglutina con las bacterias,
dejando solo una parte de la cantidad original (cloro libre)
para continuar su acción desinfectante.
• Si el nivel de cloro libre no es el que corresponde al pH, el
agua tendrá un olor y sabor desagradables y el potencial
desinfectante del cloro se verá disminuido.

• El conjunto de cloro combinado y cloro libre da como

resultado el cloro total.
• Mientras que el cloro libre tiene un potencial
desinfectante superior, el cloro combinado tiene una
mayor estabilidad y una menor volatilidad.
Métodos generales para el agua de uso farmacéutico
AGUA POTABLE Método de vaciado en placa o Método de filtración por
membrana
Vol. De muestra: mínimo 1.0mL
Medio de cultivo: Agar para cuenta en placa
Tiempo de incubación: mínimo 48-72h
Temperatura de incubación: 30-35°C
AGUA Método de vaciado en placa o Método de filtración por
PURIFICADA membrana
Vol. De muestra: mínimo 1.0mL
Medio de cultivo: Agar para cuenta en placa
Tiempo de incubación: mínimo 48-72h
Temperatura de incubación: 30-35°C
AGUA Método de filtración por membrana
INYECTABLE
Vol. De muestra: mínimo 100mL
Medio de cultivo: Agar para cuenta en placa
Tiempo de incubación: mínimo 48-72h
Temperatura de incubación: 30-35°C
Método de vaciado en placa
Vol. De muestra: mínimo 1.0mL
Medio de cultivo: Agar para cuenta en placa
Tiempo de incubación: mínimo 48-96h
Temperatura de incubación: 30-35°C
Método de filtración por membrana
Vol. De muestra: mínimo 100mL
Medio de cultivo: Agar para cuenta en placa
Tiempo de incubación: mínimo 48-96h
Temperatura de incubación: 30-35°C
Método de filtración por membrana
Vol. De muestra: mínimo 100mL
Medio de cultivo: Agar para cuenta en placa
Tiempo de incubación: mínimo 48-96h
Temperatura de incubación: 30-35°C
 Pruebas microbiológicas de control de calidad
• Diluciones y cuenta en placa

Requiere cierta
Sencillo
habilidad
Económico
Tardado

Uso de mucho
material
 Pruebas microbiológicas de control de calidad
• Vaciado en placa

Método
Requiere
cualitativo
poco
material

Rápido y
sencillo

Económico
 Pruebas microbiológicas de control de calidad
• Filtración por membrana (Determinación de l número de bacterias mesofílicas aerbias OMA’s)

Método Costo elevado

rápido en la
adquisición del
Sencillo equipo

Requiere
poco
material
 Pruebas microbiológicas de control de calidad
• Número Más Probable (NMP)

Requiere cierta
Sencillo
habilidad
Económico
Tardado

Uso de mucho
material
 Pruebas microbiológicas de control de calidad
• Recuento microscópico

Tardado debido
Método
al conteo de
cuantitativo
células
Sencillo
• Algunos otros ejemplos incluyen el
uso de técnicas microscópicas de
conteo directo (epifluorescencia e
inmunofluorescencia).
• Una ventaja es su precisión y
• Metodologías radiométricas, exactitud.
impedométricas y basadas en
métodos bioquímicos.

• Limitaciones en el
procesamiento de muestras o
del instrumento.
 Medios de cultivo
Caldo Lactosado
• Es un medio rico en nutrientes, y no
contiene inhibidores del crecimiento
bacteriano.
• El extracto de carne y la peptona,
son la fuente de carbono y
nitrógeno, mientras que la lactosa
es el hidrato de carbono.
• Por la fermentación de la lactosa, se
produce ácido y gas, y éste último se
demuestra al usar las campanas
Durham.
Caldo bilis verde brillante al 2%.
• Este medio está recomendado
para el recuento de coliformes
totales y fecales, por la técnica
del número más probable.
• Es una propiedad del grupo
coliforme, la fermentación de la
lactosa con producción de ácido
y gas.
Campana de Durham
• Tubos utilizados para determinar la
producción de gases por
microorganismos.

• Si hay desplazamiento del medio de

cultivo de la campana es debido a la
producción de gases.
 Agar Endo
• Es un medio ligeramente
selectivo y de diferenciación
para el aislamiento y la
diferenciación de la familia
Enterobacteriaceae y
diversos otros bacilos gram
negativos a partir de
muestras.
Agar PIA y Agar cetrimida
• (Agar de aislamiento para • BD Pseudosel Agar (agar
Pseudomonas) se utiliza para el cetrimida) se utiliza para el
aislamiento de Pseudomonas aislamiento selectivo de
aeruginosa y para la diferenciación Pseudomonas aeruginosa a partir
de P. aeruginosa de otras
pseudomonas según la formación de muestras clínicas.
de pigmentación.
Metodología

TODOS LO EQUIPOS,
RESPECTIVAS
MUESTRAS.
Para muestras de agua
purificada
Para muestras de agua
purificada
Medición de cloro libre o residual

Para muestras con agua

potable.
Agua sujetas a cloración
y que no han sido
sometidas a la acción
del carbón activado.