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CUANTIFICACIÓN BACTERIANA INDIRECTA:

que nos
Los métodos permite
indirectos se deducir
basan en la información
medida de sobre la
algún evolución del
parámetro del número de
cultivo microorganis
mos

miden el número de
bacterias viables (que
no equivale al de
totales)
RECUENTO DEL NMP: NÚMERO
MÁS PROBABLE
•Determinar la presencia o ausencia en réplicas de
Se basa en diluciones consecutivas, de atributos particulares de
microorganismos

•Una única célula viva puede desarrollarse y producir un


Principio: cultivo turbio.

•Diluciones en serie de la muestra de cultivo en un medio


Requiere líquido adecuado para el crecimiento en un volumen 10
veces mayor.

Luego: •Se incuban las muestras en esos tubos, pasado un


tiempo se examinan los tubos.

Resultados: •Los tubos que recibieron una o más células


microbianas procedente de la muestra , se
pondrán turbios y las que no recibieron ninguna
permanecerán transparentes.
Evaluación del
Utilizando un
Inoculación: Permita que el crecimiento: para
marcador, dividir la
transfiera 5µl de la inoculo seque sobre cada dilución es
caja Petri en cinco
dilución apropiada al el medio de ascendencia evalué
zonas de igual
área crecimiento. Selle la el crecimiento o No
tamaño. Use una
correspondiente. placa con una crecimiento sobre
caja por cada
Repita esta trilladle de parafina, cada replica
muestra. Rotule cada
operación cinco invierta la placa e inoculada. Reporte
zona con el factor de
veces por cada inocule a 25ºC por 7 los resultados como
dilución a ser
dilución. días. se indica a
inoculado.
continuación:
RECUENTO DE CÉLULAS VIABLES EN
PLACA

La célula viable es aquella capaz de dividirse y formar una colonia en el
medio de cultivo.

Se basa en que cada colonia surge de una simple célula.


Cada colonia contiene una sola especie bacteriana

Cada colonia contiene una sola especie bacteriana


Representa cada
El número de bacterias
colonia contada y su
viables por muestra se
número total
expresa en UNIDADES
representa el número
FORMADORAS DE
total de bacterias
COLONIAS (UFC)
viables en la muestra.

Técnica de
extensión en
1.Determinación placa
de número de
UFC Técnica de
vertido en
placa
RECUENTO CON CUENTACOLONIAS
 Puede ser contada toda la placa o por cuadrantes.
 Cuando la carga bacteriana es alta, se toma en cuenta un
cuadrante con carga alta, un cuadrante con carga media y un
cuadrante con carga baja.
 Se realiza la sumatoria de los tres cuadrantes y se saca el
promedio.
 Finalmente el promedio se multiplica por 65
 No. Colonias = (CA + CM + CB /3) * 65

CA = 32
CM = 19
CB = 10
Sumatoria: Σ = 61
Promedio:61/3 = 20.33
Factor= 20.33*65 = 1322
OBTENCIÓN DE RESULTADOS
 Terminado el conteo por cualquier método, se debe aplicar la siguiente
fórmula para obtener el No. de UFC/ ml o UFC/g.
UFC/ml ó UFC/g = No. de colonias por placa X el factor de dilución
ml de la muestra sembrada

*Factor de dilución: inversa de la dilución.


RECUENTO SOBRE FILTROS DE MEMBRANA

El método de Se puede utilizar en pruebas


Consiste en hacer El filtro que retiene filtración por de campo, el análisis se
pasar un volumen los membrana es un dificulta en muestras de
de una muestra microorganismos método ágil y aguas con abundante carga
muy diluida se coloca sobre poco dispendioso. bacteriana. Este
A través de un filtro una placa con La lectura de inconveniente es posible
de nylon o medio de cultivo, resultados se da remediarlo, haciendo
nitrocelulosa, con tras inocular en un mejor diluciones de la muestra o
un tamaño de poro aparecen colonias tiempo (24 horas) haciendo inóculos muy
adecuado sobre el filtro a comparación pequeños de acuerdo con el
del método NMP tipo de muestra a analizar