TESTES DE COOMBS

INDIRETO
Profª. Karla Melo
 TAI OU COOMBS INDIRETO
PRINCÍPIO

•Hm não estão sensibilizadas no organismo

•Junção Ag/Ac ocorre in vitro: INCUBAÇÃO (etapa a mais do CD)
•AGH reage com globulinas ligadas às hemácais ou livres no soro
•As hemácias são lavadas e os Ac livres são eliminados
•As hemácias cobertas são aglutinadas

LAVAGEM ANTES DO SORO DE COOMBS:

EVITA FALSO NEGATIVO INCUBAÇÃO 3
TAI OU COOMBS INDIRETO
TAI OU COOMBS INDIRETO
• REAGENTES INTENSIFICADORES
• Adicionados à mistura soro-células.
• Objetivos
• 1. Reduzir o potencial zeta
• 2. Promover uma melhor ligação Ag-Ac
• 3. Detectar níveis mais baixos de anticorpos

• Não são obrigatórios, mas reduzem o tempo de incubação

• 1. Salina de baixa potência iônica (LISS)
• 2. Polietilenoglicol (PEG)
• 3. Albumina bovina
• 4. Enzimas (bromelina, papaína)
TAI OU COOMBS INDIRETO -
ETAPAS
TAREFA RAZÃO
1. Incubar a mistura de hemácias e 1. Tempo para ligalação do Ac ao Ag
anticorpos

2. Lavagem 2. Remover globulinas livres

3. Antiglobulina
4. Centrifugação
5. Observaçaõ de aglutinação
6. Graduar a aglutinação
7. Adicionar Hm cobertas com Ac aos
testes negativos
3. Aglutinar hemácias ligadas a Ac
4. Acelerar a aglutinação (aproxima as
células)
5. Interpretar: positivo ou negativo
6. Determinar a força da reação
7. Checar neutralização de Ac por globulinas
livres
CONTROLE DE COOMBS
• Se o CI for negativo

• Como certificar que o soro de Coombs está disponível e funciona?

• Controle de Coombs
• Hemácias comerciais já sensibilizadas

• Então... Deve positivar

TAI OU COOMBS INDIRETO
 APLICAÇÃO

• 1. Pesquisa de anticorpos irregulares (PAI)

• Kit de hemácias conhecidas (2 ou 3)

• 2. Identificação de anticorpo irregular

• Painel de hemácias conhecidas;

• 3. Teste de compatibilidade (prova cruzada)

• 4. Fenotipagem eritrocitária usando anti-soros conhecidos

• Detecçaõ de Ag eritrocitários (Teste D fraco);
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES

CUIDADO
Não são
sinônimos!
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
• PRINCIPAIS SOLICITAÇÕES DE PAI

• Obrigatório antes da transfusão

• Acompanhamento de gestantes
• Possibilidade de DHPN
• Muito solicitado como “Coombs indireto”
 PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
• Que amostra padronizar, soro ou plasma?
• Que soro de Coombs utilizar, mono ou poli específico?

A importância do anti-complemento no reagente AGH é discutível uma vez que os anticorpos

detectáveis ​apenas pela sua capacidade de se ligar ao complemento são bastante raros
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
• IRREGULARES = INESPERADOS

• Testa soro/plasma do paciente contra 2 ou 3 amostras de hemácias (células de

triagem).

• Doadores do grupo O, fenotipadas para os Ag mais comuns e clinicamente

importantes.

• D, C, E, c, e, K, k, Fy(a), Fy(b), Jk(a), Jk(b), M, N, S, s, P1, Le(a), Le(b)

• Se o paciente possuir anticorpos antieritrocitários irregulares, irão aglutinar as

hemácias = teste positivo.
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES

CUIDADO: Há possibilidade de a PAI ser negativa e o

paciente possuir anticorpo irregular!! Como assim??
IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

• Quando a pesquisa de anticorpos antieritrocitários irregulares (PAI) mostrar

resultados positivos, recomenda-se a identificação da especificidade do(s)
anticorpo(s) detectado(s) para seleção segura de concentrados de hemácias
fenotipados a serem transfundidos.
IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

3+
3+

VAMOS AO PAINEL!
IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

3+
3+
3+

3+

3+
UFA!!! TRANQUILIDADE!
IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

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1+ 0
0

EFEITO DE DOSE?
INATIVO EM ENZIMA?
IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES
• ANTICORPO IDENTIFICADO

• FORNECIMENTO DE HEMÁCIAS APROPRIADAS PARA A TRANSFUSÃO - FENOTIPADAS

• Se clinicamente significante, o sangue doado não pode conter os Ag relacionados

• PROVA DE COMPATIBILIDADE (PROVA CRUZADA)

 PROVA CRUZADA
MAIOR

• Mistura:
• Hm do doador e soro do receptor

• Positivo: não pode ocorrer transfusão - INCOMPATÍVEL

• Negativo: bolsa liberada para transfusão - COMPATÍVEL

Karla Melo 20
 PROVA CRUZADA
Pode ser compatível e o paciente ter anticorpo irregular?

Há casos de PC compatível e o paciente apresentar reação

transfusional hemolítica?

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• § 5º Quando os resultados dos testes pré-transfusionais demonstrarem que não
há concentrado de hemácias compatível para o receptor, o serviço de
hemoterapia comunicará este fato ao médico solicitante e, em conjunto com
este, realizará a avaliação clínica do paciente.