BIOFILM PLACA DENTAL

Dr. John García Olivera

 Anthony van Leeuwenhoek 1683
 placas blandas gelatinosas. 1898, Black
 En 1970, congreso de Edimburgo, microorganismos más polisacáridos
extracelulares; recubierta por leucocitos, células epiteliales y restos de comida.
 placa compuesta por depósitos blandos con microbios y restos de comida.
 En los años 90, modelo de la placa dental como biofilm
1965, Egelberg y cols:
-Estadío (fase I), biopelícula
-(glicoproteínas) sobre la
superficie del diente..
- Fase II: adhesión
- Fase III. Multiplicación bacteriana.
- Fase IV. Coagregación
Infección como una interación
entre organismos
Enfermedad dental (oral) como
una enfermedad infecciosa

 Patogenicidad (virulencia).
 Respuesta del huésped
 Aplicado al Dx. Tto. y prevención.
INFECCIÓN Y ENFERMEDAD
Temprana respuesta- enfermedad
Multiplicación del umbral de la enfermedad

Respuesta inmune recuperación

en bloque

Retraso respuesta- enfermedad

Multiplicación del
umbral de la enfermedad

Retraso en la
Retraso de la recuperación
Respuesta inmune
Naturaleza de la enfermedad
periodontal / peri-implantar
 Infección crónica
 Infección endógena
 Vs exógena.
 Infección
oportunista.
 Infección
polimicrobial.
 Infección localizada.
Factores de virulencia
 Productos genéticos que aumentan
el potencial de un microorganismo
para causar enfermedad

 Involucrados en todas las etapas de

patogenecidad:
– Para conectarse o entrar en los
tejidos del huésped
– Evadir respuestas del huésped
– Proliferativo
– Daño al huésped
– Transmitirse asi mismo a nuevos
huéspedes

 Codificada por factores de

virulencia
Factores de virulencia específicos

 Factores de adherencia y
colonización Factores
invasivos

 Capsulas (otros componentes

de superficies)

 Endotoxinas

 Exotoxinas

 Resistencia a antibióticos
Placa dental como un biofilm
 BIOFILM
 comunidad de bacterias adheridas a una superficie sólida e inmersa en un
medio líquido (Costerton 1987).

 «una comunidad bacteriana inmersa en un medio líquido, unidas a un

substrato o superficie, embebidas en una matriz extracelular producida
por ellas mismas, y muestran un fenotipo alterado en cuanto al grado de
multiplicación o expresión de sus genes.
Costerton (2002)
Biofilm: semejante a ciudad

Planktonico (nomade) vs biofilm(city)

Colonización inicial por disperción

lateral, dirección vertical de crecimiento
.
Recursos y activades compartidas.

Protección de otras especies,

huésped y entorno hostil.

Necesidad de comunicación-
quorum sensing, cambio de
información genética
 Naturaleza de los biofilms
 Método natural de crecimiento microbiano.

 Provee ventajas para la colonización de especies.

protección de:

factores ambientales, sustancias tóxicas,

competencia microbiana
defensa del huésped químicos letales,antibióticos

 Facilita el procesamiento y absorción de nutrientes, alimentación

transversal, remoción de productos metabólicos nocivos.

 Desarrollo de un apropiado ambiente físico-químico.

producción de grandes cantidades de
polímeros extracelulares (polisacáridos).

 Matriz – poblaciones
bacterianas adherentes a otro
y/o superficies o interfaces.
 Muchas formas de superficies
 Prevaleciendo estilos de vida
microhabituales (vs. Planktonic),
compleja, altamente
diferenciada, comunidad
multicolonia.
 De especies simple o multiples.
 Estructura del biofilm
 Microcolonias (15%-20% por volumen) distribuido en una
forma de matriz o glucoclix (75%-80%).
 Presencia de poros (vacíos) o canales de agua.
• Permiten el pasaje de nutrientes y otros agentes
actuando como un sistema “circulatorio”.
 Estructura del biofilm
 Exopolisacaridos (EPS)- (columna vertebral )
 50%-95% del volumen en peso del biofilm.
 Mantiene la integridad del biofilm.
 Actua como buffer y sustrato de resistencia bacteriana.

 Heterogenicidad fisiológica.
 pH puede variar notablemente dentro de un biofilm.
 diferentes microhábitats químicos y físicos.
Exopolisacáridos
 componente fundamental de la
matriz

 fundamental en el desarrollo del

biofilm.

 Carga neutra o polianiónica.

 Fuente de nutrientes y, atrapar

otros nutrientes.

 retiran desechos del medio.

 adhesión.

 protección (evitan su desecación).

 pueden «tamponar» la acción de distintos

antimicrobianos.

 La pérdida o alteración puede alterar el biofilm.

Resistencia frente antimicrobianos
Donlan, Costerton JW. Biofilms: Survival Mechanisms of Clinically Relevant Microorganisms. Clinical Microbiology
Reviews 2002; 167-93.
Socransky SS, Haffajee AD. Biofilms dentales: objetivos terapeúticos difíciles. Periodontol 2000 2003;3:12-55
Xu KD. Biofilm resistance to antimicrobial agents. Microbiology 2000 2004; 146:547-9.

1. Los antimicrobianos van a llegar en menores concentraciones

(concentraciones no efectivas) a las zonas profundas del biofilm.

2. Con dosis subletales desarrollan resistencia (entrenamiento).

3. Los de forma sésil, activa genes que proporcionan mayor resistencia a los
antimicrobianos en comparación con las planctónicas.

4. En zonas profundas del biofilm, (menor aporte de nutrientes), las bacterias

estarían en forma quiescente, (estado bacteriano no susceptible a los
antimicrobianos).

5. Las bacterias estarían protegidas por la matriz de exopolisacáridos frente a los

antimicrobianos.
 Desarrollo del biofilm

 A partir de una célula

planctónica

 A partir de otro biofilm

fenómeno en el que algunas bacterias dejan de expresar

unos determinados genes se le denomina variación de fase
DESARROLLO DE BIOFILM ORAL
Cavidad oral lugar ideal.
Saliva contiene 10 (7)-10(8)bacterias⁄ ml
Componentes salivares, incluyendo
lisozima, fibronectina, amilasa promueven
adherencia.
Otros componentes:histatina,cistatinas,lacto
ferrina,peroxidasa,ant.IgA rol defensivo.
 A partir de una célula planctónica
 Fimbrias y fibrillas
Actinomyces naeslundii, Streptococcus
salivarius, Streptococcus parasanguis,
Streptococcus mitis.

 Capacidad de
movimiento, Pseudomona
aeruginosa, Escherichia coli,

 expresión de ciertas
proteínas en su superficie
celular, adhesinas.

 Expresión de genes-
asociaciones específicas.
 A partir de otro biofilm
 a partir de células sueltas desprendidas de un biofilm o
de partes del propio biofilm.
 mantendrían todas las propiedades del biofilm de
donde proceden.
 fenómenos de movimiento.
Propiedades de los biofilms
 Heterogeneidad fisiológica
 Fenotipos en el biofilm
 Señales en el biofilm
 Capacidad adaptativa
Heterogeneidad fisiológica
 rango muy amplio de micronichos.
 ambientes muy diferentes en nutrientes, O2, CO2,
pH, etc.
 células de la misma especie: estados
fisiológicos muy diferentes,
 especies bacterianas con distintas necesidades
fisiológicas (anaerobias, aerobias)
 Fenotipos en el biofilm
 bacterias crecen en el biofilm,(sésil),
manifiestan un fenotipo diferente (forma
planctónica ).
 son más resistentes a diversos antimicrobianos,
incluso cuando se desprenden
Señales en el biofilm
 Comunicación bacteriana por medio
de señales químicas, o mediante
transferencia de material genético.
 Capacidad adaptativa
 fenómeno de «Quorum Sensing»,regulación de la
expresión de ciertos genes a través de la acumulación
de compuestos de señalización.
 «Quorum Sensing» influye en el desarrollo de los
mismos, como en la resistencia antimicrobiana.

 comunicación bacteriana mantener un equilibrio

 Resistencia
 factores de virulencia
 estructura
 Ventajas de los biofilms
1. Protección frente a agresiones externas y antimicrobianos.

2. Ventajas nutricionales: aporte y eliminación de desechos.

3. Proporciona un medio ambiente adecuado.

4. Capacidad de intercomunicación.
 ADHESIÓN BACTERIANA
 La adhesión bacteriana depende de unos Factores
Inespecíficos de índole físico-químicos, eléctricos, etc. Y
otros Factores Específicos de carácter adhesina-
receptor, fimbrias, etc.

 No existe ninguna interaccción entre la superficie

sólida y el microorganismo hasta una distancia de 50
nm.

 Transporte de la bacteria :
1) Difusión
2) dinámica del fluido y
3) por actividad propia de la bacteria .
 Factores que afectan la adhesión bacteriana
rugosidad
veloc. del flujo
genes
multiplicación y coagregación.
asociaciones específicas
Pili y Fimbrias

¿Cuál es la diferencia?
 BIOFILM DENTAL
Placa dental es una comunidad microbiana que se
encuentra embebida en una matriz de polímetros
producto de las bacterias y el huésped.

Douglas,C 1994 Bacterial protein interactions in the oral cavity

Adv.Dent.Res 8,254/262
Scheie A 1994 Mechanisms of dental plaque formation. Adv.Dent.Res
8,246/253
Microbiota asociada a la enfermedad periodontal
Formación de placa después del cepillado
 A)Biofilm : celulas y matriz
extracelular.

B) Presión de lengua puede

aplanar biofilm y sale liquido
de matriz.

C) Sin presión, biofilm se

vuelve a estructurar.

• Bacterias producen enzimas: lactamasa contra

antibiotics , dismutasa superoxido contra iones
oxidantes de fagocitos.
 Factores que influyen en la placa
subgingival y supragingival

3. Liquido gingival: elementos

1. Estructura anatómica nutritivos, enzimáticos, Ig,
del surco complemento, células
determinantes ecológicos.

2. pH del Surco: Mas 4. Estado de salud o

alcalino (8.2) que saliva (6.5). enfermedad periodontal:
procesos inflamatorios.
 formación de la placa:

 Fase1: absorción de macromoléculas hidrofobicas a la superficie:

biopelícula o película adquirida ( glucoproteinas,musina) y
anticuerpos).

 FaseII: adhesión de microorganismos (cocos y bacilos gran

positivos anaerobios facultativos).

 Fase III: desarrollo de la matriz extracelular y
multiplicación de las bacterias adherentes.

 Fase IV: biopelicula mas compleja- anaerobias estrictas

(Veillomellla Fusobacterias,etc.
 4 nichos ecológicos
 1.- la superficie dentaria o implantar
 2.-el medio liquido de exudado
gingival-
 3.-la superficie de las células
epiteliales
 4.-La porción superficial del epitelio
de la bolsa.
 DESINSERCION DE CELULAS
DEL BIOFILM
 Esencial para colonización .
 Puede ser cel. únicas, grandes grupos o
clusters (10 4 cel).
 Muchas bacterias poseen fimbrias y fibrillas
para inserción a diferentes superficies.
 Fimbrias : Aa, Pg, S.salivarius.
 Fibrillas : S.mutans, prevotella intermedia.
 COAGREGACION
BACTERIANA
 Asoc. especificas entre bacterias de biofilm.

 7 especies diferentes reconocen receptores sobre S. oralis.

10 diferentes especies reconocen adhesina sobre F.
nucleatum.
CÁLCULO DENTAL
 CONCEPTO

 Es la placa dental mineralizada que se

forma sobre la superficie de los dientes
y de las prótesis.
 CLASIFICACIÓN

 SUIPRAGINGIVAL  SUBGINGIVAL
– Blanco o blanco – Pardo oscuro o negro
amarillento. verdoso.
– Duro arcilloso. – Duro y denso.
– Se desprende con – No se desprende con
facilidad. facilidad.

Subgingival Supragingival
 LOCALIZACIÓN

 Zona vestibular posterosuperior.

– Glándula parótida (conducto de Stenon).
 Zona lingual anteroinferior
– Glándula submaxilar y sublingual (conducto de
Wharton, Bartholin y Rivinus.
COMPOSICIÓN
 INORGÁNICO 7O – 90%
 75,9% Fosfato de calcio (PO4)2Ca4
 3,1% Carbonato de calcio CO3Ca
 Rastros de fosfato de magnesio (PO4)2Mg3

– 39% calcio
– 19% fósforo
– 1,9% dioxido de carbono
– 0,8% magnesio
– Na, Zn, Br, Cu, Mn, Au, Al, Fe, F
 INORGÁNICO
 2/3 de estructura cristalina.
– 58% Hidroxiapatita
– 12% Fosfato octacálcico supragingival

– 21% Whitlockita de Mg (posterior)

– 9% Brushita (mandibular anterior)
 ORGÁNICO 10 – 30 %

 Complejo proteina – polisacaridos.

 Células epiteliales descamadas
 Leucocitos
 Microorganismos
 1,9 - 9,1% carbohidratos
– Galactosa, glucosa, ramnosa, manosa,
glucosamina, ac. glucorónico, arabinosa, ac.
Galacturónico.
 0,2% Grasas.
– Ac. Grasos libres.
– Colesterol.
– Ésteres de colesterol.
– Fosfolípidos
 SUPRAGINGIVAL INFRAGINGIVAL

HIDROXIAPATITA
= =
WITHLOCKITA
- +
BRUSHITA
+ -
FOSFATO
OCTACÁLCICO
+ -
PROPORCIÓN
CALCIO – FOSFATO
< >
CONTENIDO DE
SODIO
< >
PROTEINAS
SALIVALES
si no
 FIJACIÓN A LA
ESTRUCTURA DENTARIA
 Traba mecánica con irregularidades
superficiales.
 Unión mecánica mediante película orgánica.
 Adaptación estrecha de la superficie inferior del
cálculo a las salientes del cemento inalterado.
 Penetración de bacterias delcálculo al cemento.
 MINERALIZACIÓN DE LA PLACA

Suele comenzar entre el día 1 y el día 14.

Se han reportado en tan solo 4 a 8 horas.
Puede mineralizarse 50% en dos días y del 60 al 90% en 12 días
Los gérmenes no siempre son indispensables en la mineralización.
 La saliva y el fluido crevicular son las
principales fuentes de calcificación de la
placa.
 El fósforo es más importante que el calcio
en la calcificación.
 Fijación de iones de Ca con complejos
carbohidrato-proteina y precipitación de
sales cristalinas de (PO4)2Ca3
 máximo grado de calcificación a las 10
semanas o (3 a 6 meses)
 fenómeno de reversión por alimentos,
cigarrillos
 TEORIAS DE CALCIFICACIÓN
 Precipitación por saturación de iones de calcio.
– Por aumento de Ph.
– Las proteinas de la saliva fijan los iones de calcio y
fosfato.
– La fosfatasa liberada por la placa, células descamadas y
bacterias precipitan fosfato de calcio, por hidrolización
de fosfatos orgánicos en la saliva.
 Los focos de siembra originan focos de
calcificación
– Fenómeno epitáctico o nucleación heterogenea.
– Se le atribuye función activa a la matriz intercelular.
Microorganismos

¿cuál es su rol en la
mineralización?
 Bacterionema y Veillonella: forman
cristales de apatita intracelulares.
 Forman fosfatasas capaces de mineralizar.
 Cambian el Ph.

Roedores sin bacterias

penicilinas
 ROL ETIOLÓGICO

 No existe estrecha relación con la gingivitis

(retención mecánica).

 El cálculo subgingival es la consecuencia

del inicio de la enfermedad por la placa.

 Es un factor decisivo en el tratamiento de la

enfermedad periodontal.
 Antes de cambiar al mundo, da tres vueltas
por tu propia casa
 Proverbio Chino
Infección clásica & infección oportunista
 Agrigaribacter Actynomicetemcomitans

FACTORES QUE FACILITAN LA COLINIZACIÓN

Adhesión Coagregación Multiplicación

Células Hemolisinas
Bacterias Fusubacterium nucleatum Proteinasas
Natriz extracelular Porfiromona gimgivalis Proteinas reguladoras del
Saliva hierro Fur
Prot. Periplasmáticas
(transporte)
Fimbrias HgpA
pili PilA
Lipopolisacáridos
Proteínas de membrana EmaA y Aae
Polimero extracelular
Vesiculas
 AGGREGATIBACTER
ACTINOMYCETEMCOMITANS
Competición con otras Invasión del tejido
bacterias periodontal

Células epiteliales (30 min)

Bacteriocina: actinobacelina
Fofosrilcolina (invasión)
(streptococos)

Dispersina B
(stafilococos epidermis)

EVASIÓN DE LAS RESPUESTAS DEL HUÉSPED

Leucotoxina
Polisacaridos de superficie
Genotipo Cdt
(pacientes con periodont agresiva)
 PORPHYROMONA GINGIVALIS
FACTORES QUE FACILITAN LA COLINIZACIÓN

Adhesión Coagregación Multiplicación

Aa tipo C proteinasas
Bacterias F nucleatum
Células P intermedia
Componentes celulares T dentícola

Capsula
hemaglutinina
Polisacaridos
Proteinasas (gingipainas)
Fimbrias
 PORPHYROMONAS GINGIVALIS
Invasión del tejido periodontal Evasión de las
defensas del huésped
Células epiteliales (20 min)
Fimbrias
Cápsula
Proteinasas
Lipopolisacáriodos
vesículas
proteinasas

FACTORES QUE DESTRUYEN LOS TEJIDOS DEL HUESPED

Directa o indirecta
Factores de virulencia
 TANNERELLA FORSYTHIA
FACTORES QUE FACILITAN LA COLINIZACIÓN

ADHESIÓN COAGREGACIÓN MULTIPLICACIÓN

Proteinasas:
Células F. Nucleatum
Componentes sanguíneos T. dentícola
Sialidasas
Matriz extracelular
α- D-glucosidasa
N-acetil-β-glucosamidasa

Capa S
Proteína de superficie BspA
 TANNERELLA FORSYTHIA

Invasión del tejido periodontal Evasión de las

defensas del huésped

Lipopotreinas:
Capa S
Apoptosis

proteínasas

FACTORES QUE DESTRUYEN LOS TEJIDOS DEL HUÉSPED

Lipoproteina BflP
Proteína BspA
(citoquinas)
postulados de socrasky