UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE RECURSOS NATURALES RENOVABLES

ESCUELA PROFESIONAL INGENIERÍA AMBIENTAL

CURSO : ANÁLISIS INSTRUMENTAL

ALUMNO : DARWIN A. REYNA SOTO

JULIO 2018
INTRODUCCIÓN
Es una de las técnicas de separación más utilizadas en el primer
mundo.

De gran importancia en el análisis y purificación de biomoléculas.

Descripción de migración debida a la aplicación de un campo

eléctrico primera vez por Reuss en 1809.

Michaelis sugiere el nombre de elctroforesis (1909).

Anie Tiselius perfecciona un instrumento para llevar a cabo la

electroforesis de zona (1937).

Empleo de tubos capilares para mejorar la disipación del calor.

Stellan Hjertén: electroforesis capilar (1967).
FUNDAMENTO
La electroforesis capilar es la modalidad más utilizada por su
simplicidad operacional y versatilidad. Requiere pequeños
volúmenes de muestra por lo que ha despertado un gran interés
en diferentes campos, tal como lo demuestra el incremento de
publicaciones realizadas en el área de la bioquímica y
biotecnología, industria farmaceútica, análisis clínicos y medio
ambiente.
 INSTRUMENTACIÓN
Los aparatos comerciales de E.C. comprenden dos compartimentos electroforéticos
unidos por un compartimento que contiene un capilar, a una fuente de alta tensión de 20
a 30 kv, el que es sometido a la luz UV con un detector unido a un registrador, que grafica
las diferencias de absorbancia; a un sistema de administración de datos.
Las terminales de salida permiten, por su conexión, el registro del voltaje, tiempo de
corrida, y registro de la temperatura del capilar, a través de un software.
Una de las principales ventajas de la E.C. es que requiere una instrumentación
relativamente simple, en pocas palabras, se necesita: una fuente de alto voltaje, un
capilar cuyos extremos se encuentran sumergidos, junto con dos electrodos, en dos
viales que contienen una disolución amortiguadora, un detector y un sistema de
adquisición de datos.
Esquema del Sistema de E.C.
Movilidad electroforética
Ventajas de la electroforesis capilar
 Alta resolución (105 a 106 platos teóricos)-HPCE
 Requiere pequeño volumen de muestra (1-10 nl) y reactivo,
prácticamente no generan residuos.
 Rápida separación (1 a 45 min.)
 Aplicable a todo tipo de sustancias
 Automatización
 Cuantificación (lineal)
 Reproducibilidad
 Puede acoplarse a espectrometría de masa
 Barata y de bajo impacto ambiental.
Tipos de moléculas que
pueden ser separadas por E.C.
• Proteínas

• Péptidos

• Amino ácidos

• Ácidos nucleicos

• Iones inorgánicos

• Bases orgánicas

• Ácidos orgánicos
Condiciones de Electroforesis
Capilar
• Se utilizan altos voltajes 10-30kV.(>500V/cm; 10-20 mA)

• Moléculas positivas, negativas o neutras puede separarse.

• La separación se realiza en un tubo capilar de sílica fundida cubierta con

poliamida para darle flexibilidad.

• El tubo capilar tiene 30-100cm. de longitud y 25-100m de diámetro interno.

• Los grupos hidroxilos de la sílica se disocian dejando el tubo con una carga
negativa.
 Modalidad Criterio de Sustancias
separación
E.C. de zona Densidad de carga Moléculas pequeñas,
(C.Z.E.) péptidos, proteínas, DNA
pequeño.

Electroenfoque Punto isoléctrico Péptidos, proteínas.

Cromatografía micelar Densidad de carga y Moléculas pequeñas,
electrocinética capilar coeficiente de reparto en péptidos, DNA.
(M.E.C.C.) las micelas, según la
hidrofobicidad

E.C. en gel Masa molecular Péptidos, proteínas, DNA

Desnaturalizante Tamaño y densidad de
No desnaturalizante carga.
 Aplicaciones
El explosivo avance de la electroforesis capilar se ha extendido al área biomédica, en el campo de
las proteínas, péptidos, ADN, análisis de líquidos de perfusión, monitoreo de drogas, marcadores
genéticos tumorales y neurobioquímicos, drogas xenobióticas, de abuso, y pericias forenses.

En el área biofarmacéutica, para el control de calidad de productos farmacéuticos y

biotecnológicos, quimioterápicos y de estructura quiral.

En el área de alimentos, se le aplica al fraccionamiento y cuantificación de aminoácidos, hidratos

de carbono, ácidos orgánicos, aditivos y contaminantes.

En el área de control ambiental, permite la identificación de contaminantes y sus metabolitos,

pesticidas, metales pesados e hidrocarburos.

Como todo desarrollo de un área analítica nueva, la incorporación de técnicas acopladas como la
espectroscopia de masa, fluorescencia inducida por laser y otras variantes permiten augurar un
promisorio futuro.
¡FIN!