¿Qué es el toxoide diftérico?

 El toxoide consiste en toxina tetánica detoxificada con formaldehído y calor, este hecho
fue reportado por primera vez por Descomby en 1920, quien preparó el primer toxoide
tetánico combinado (toxina con aldehido fórmico y calor) y demostró que podía
estimular la formación de anticuerpos en animales de experimentación (Reyes y Flores,
1986).
 El toxoide diftérico es preparado mediante la destoxificación de la toxina producida
durante el crecimiento de Corynebacterium diphtheriae. La fabricación del toxoide se
basa en el sistema de lote semilla. El toxoide diftérico se utiliza para la inmunización,
combinado con el toxoide tetánico (Td, DT), o con toxoide tetánico y pertussis de células
completas (DTP) o con toxoide tetánico y antígenos de pertussis acelular (DTaP).
 DEFINICIONES
 Antibióticos: son usados, con el fin de prevenir
el crecimiento microbiano y la contaminación
bacteriana, durante la manufactura de las
vacunas, por lo tanto, pequeñas cantidades
de los mismos, pueden estar presentes en las
vacunas,
 Formaldehido: se usa para la manufactura, de
ciertas vacunas bacterianas y virales, con el
fin de inactivar virus y detoxificar toxinas
bacterianas, es utilizado de manera diluida en
la manufactura, sin embargo, residuos de este
componente, se pueden encontrar en
vacunas actuales. La exposición frecuente de
formaldehido, puede ocasionar el desarrollo
de cáncer y en animales es cancerígeno.
Vacunas como DPT, hepatitis A y B, contienen
cierta cantidad de este componente
 Acción del formaldehido en la
detoxificacion de la toxina difterica

 La destoxificación de la toxina diftérica se realiza

en la toxina cruda (filtrado del cultivo) o toxina
purificada, mediante un proceso validado. La
purificación de la toxina antes de la
destoxificación resulta en un producto más puro y
permite quitar componentes que son susceptibles
de causar reacciones adversas en seres humanos,
aunque el punto de mayor cuidado será durante
la destoxificación, porque puede aumentar el
riesgo de reversión a la toxicidad. El proceso de
purificación estará validado. El formaldehído
es el reactivo destoxificante más utilizado
Pregunta 3
 Para inmunizar a los niños sanos frente a la difteria se utiliza el toxoide diftérico. Se
prepara tratando la toxina diftérica con formaldehido ¿ que efecto ejerce el
formaldehido sobre a actividad enzimática de la toxina? ¿ que efecto
tiene sobre el formaldehido sobre la especificidad serológica o la
inmunogenecidad de la toxina?

 formaldehído actúa como un agente de entrecruzamiento,

formando enlaces metilénicos intra e intermoleculares que resulta
en polimerización, lo cual podría explicar la disminución en la
actividad floculante específica (Fraenkel y Olcott, 1948)
 Esta polimerización es directamente proporcional a la
concentración de proteína y de formaldehído, es decir que a
mayor concentración de proteína mayor polimerización, mayor
peso molecular del polímero obtenido y por ende mayor
disminución en la actividad floculante
Pregunta 4
 La toxina diftérica tiene un peso molecular de 62 kDa . Cuando se trata con tripsina
durante un breve periodo de tiempo da a lugar a dos fragmentos , el fragmento N-
terminal que tiene un peso molecular de 24 kDa y conserva la actividad
enzimática , el fragmento C- terminal B , tiene un peso molecular de 38 kDa pero
carece de actividad enzimática cuando se estudian por separado ninguno de los
dos inhibe los cultivos de células humanas mientras que la molécula Intacta de la
toxina si, las ratas y los ratones son relativamente resistentes a la enfermedad . Los
cultivos de células L de ratón son insensibles tanto a los fragmentos como a la
toxina intacta , sin embargo la síntesis proteica en extractos acelulares de células
L es sensible tanto al fragmento A , como la toxina intacta . A la vista de estos
datos explique que función debe tener el fragmento B de la toxina .
 CELULAS L: componen menos del 1 por ciento de las células que habitan en el
intestino y están diseminadas a lo largo de la mayor parte del tracto
gastrointestinal. "Hasta hace poco no había sido posible identificar una célula L
viva de sus vecinas y por este motivo eran grandes desconocidas:
 EL DT es un miembro de la familia de la toxina
bacteriana entre las que se incluyen la toxina
del cólera (CT) y la toxina pertussis,
 Es una proteína monómera de 535 residuos que
se escinde con facilidad después de sus
residuos, mediante tripsinas y enzimas similares .
 Esta hidrolisis se produce cerca del momento
en que la toxina diftérica encuentra su célula
blanco para dar dos fragmentos A y B, que
permanecen unidos por un enlace disulfuro
 El dominio C- terminal del fragmento B se une a
un receptor especifico sobre la membrana
plasmática de las células susceptibles y así
induce la captación de DT en los endosomas
 El fragmento A libre carece de actividad
toxica.