CURSO DE

The world leader in serving science

CROMATOGRAFIA DE
GASES

ING. CHRISTIAN LOPEZ L.

APLICACIONES ANALITICAS
Temario

1. Base Teórica.
2. Descripción de Componentes.
3. Análisis Cualitativo.
4. Análisis Cuantitativo.
5. Desarrollo y optimización en GC.
6. Resolución de Problemas.
7. Mantenimiento por parte de Usuario

2
 CAPITULO 1:

BASE TEORICA
The world leader in serving science
 ¿Qué es Cromatografía?

 Cromatografia es una técnica de separación (tal como la destilación u

otras técnicas similares.
 La cromatografía crea una separación en el tiempo.
 Su objetivo es separar y cuantificar un compuesto de una matriz.

Dirección del flujo

Lecho de rio

4
 CROMATOGRAFIA

 Es un método físico de separación donde el soluto se distribuye entre dos

fases :
 Fase Estacionaria y
 Fase Móvil
 Clasificación según las fases involucradas :
• Cromatografía de Gases :
• GAS-LIQUIDO
• GAS-SOLIDO
• Cromatografía Liquida :
• LIQUIDO-SOLIDO
• LIQUIDO-LIQUIDO

5
¿Qué es GC? (1)
 1) Una muestra es vaporizada en un puerto de inyección.
2) La muestra vaporizada es introducida a la columna usando gas de
arrastre.
3) Los multicomponentes analíticos en la muestra son separados dentro de
la columna.
4) Los analitos separados llegan al detector.
 Propósito del GC = Separar componentes
 Los datos obtenidos se grafican en cromatograma. Eje horizontal representa
el tiempo (tiempo de retención) y eje vertical representa intensidad de señal
(concentración).

6
Estructura interna del GC (para columnas capilares)

Split unit

7
 Cromatograma

Picos

Linea base

Tiempo de Retencion
4.014 min 5.180 min
Inyección de
muestra

Un pico normal es del tipo de distribución gauseana

8
TERMINOLOGIA

 TIEMPO DE RETENCION (tn)

• Es el tiempo medido entre la inyección y la
concentración máxima del soluto enésimo
(máxima señal).

 VELOCIDAD LINEAL (u)

• u (cm/seg)= L(cm) / tm

 COEFICIENTE DE REPARTO (K)

K= Concentración en fase líquida
Concentración en fase gaseosa
• K=(tr - tm)/ tm

9
Numero de Platos Teoricos (N) , y
Altura equivalente de Plato Teorico (HETP)

Numero de Platos Teoricos

Este parametero muestra la eficiencia de la columna.
Un valor alto significa mejor eficiencia.

Altura Equivalente de Plato Teorico (HETP)

Este parametro muestra la eficiencia de la columna.
(No depende de la longitud de columna)
Un valor pequeño significa mejor eficiencia

10
Numero de Platos Teoricos (N) , y
Altura equivalente de Plato Teorico (HETP)

 Desviacion Estandar Metano

Altura
Wh Ancho medio(2.355）

t t R‘
0

tr
Wb Ancho en base（4)

2 2
N =  tσR 
2
=  4 x t R  =  2 .355 x t R 
Wb Wh
HET = L
N Ｌ : Longitud de Columna (cm o
mm)
P
11
 SELECTIVIDAD, a

Selectividad es una indicación del

V0 grado de separación entre dos picos.
V1
V2 k'2 V2  V0
Selectivity = 
k'1 V1  V0

12
RESOLUCION , Rs

13
 RESOLUCION, Rs

 a    k' 
R  14 
 a 
1
  
N 
 k'1

N : promedio de N1 y N2
k' : promedio de k'1 y k'2

14
Relación entre la eficiencia de columna (HETP) y el tipo
de gas carrier y la velocidad lineal

HETP：Parametro que muestra la eficiencia de la columna

Ｈ Ｅ Ｔ Ｐ

N2

He

H2
0 20 40 60 80
Velocidad lineal(cm/sec)
Velocidad Lineal: Valor promedio de velocidad con la cual el gas carrier se desplaza
dentro de la columna

HETP pequeño --> Eficiencia de columna buena: Pico fino

15
 Curvas HETP Rtx-1, 30m, 0.25mmi.d., 0.25um

He N2 H2
1400.0

1200.0
Horno 130ºC, muestra n-C15H32 , k =7.6
Oven 130℃, Sample n-C15H32
HETP (µm)

1000.0

800.0

600.0

400.0

200.0

0.0

0 10 20 30 40 50 60 70
Velocidad lineal (cm/sec）

16
 CAPITULO 2

COMPONENTES DE
CROMATOGRAFO DE
The world leader in serving science
GASES
 DESCRIPCION DE COMPONENTES DE
CROMATOGRAFO DE GASES
PREPARACION SEPARACION SISTEMA DE SISTEMA DE
DE MUESTRA CROMATOGRAFICA DETECCION & DATOS
E INYECCION IDENTIFICACION

AUTO MUESTRADORES UNIDAD BASICA GC GC DETECTORES

SISTEMA DE DETECTORES MS
PREPARACION
DE MUESTRAS

GC/SA Benchtop GC/MS

18
 Estructura de GC

Controlador Puerto Detector

de Flujo Inyeccion

Procesador de Datos
Señal
Electrica
Horno de Columna
Gas

Columna

19
 GAS CARRIER
The world leader in serving science
TIPOS DE GAS DE CARRIER

 Condición importante: UHP ó pureza mayor a 99.99% (de

preferencia 5.0)
 Gases de Carrier usados

1. Helio: gas inerte, el mas usado.

2. Hidrógeno: por su alta comprensión tiene buena resolución, su
problema es la peligrosidad en la manipulación.
3. Nitrógeno: el mas económico, largos tiempos de analisis, poca
resolución.

21
Consideraciones Importantes

 En especial los gases carrier deben conectarse con pre filtros:

 Humedad: vapor de agua remanente puede echar a perder el

poder de separación de columna.
 Oxigeno: desactiva los polisiloxanos dentro de la columna
perdiendo poder de separación.
 Hidrocarburos: dando picos falsos o fantasmas, incide en la
cuantificación.

22
 COMO INTRODUCIMOS
LA MUESTRA
The world leader in serving science PUERTO DE INYECCION
Introduciendo la muestra en el GC

Los metodos de inyeccion usados con GC

1) Inyeccion Split
2) Inyeccion Splitless
3) Inyeccion On-column (OCI)
4) Inyeccion Large-volume (PTV)
5) Headspace
6) Concentradores Purga y Trampa
7) Concentradores de Aire
8) Valvulas de Muestreo para liquidos o gases
9) Desorcion Termica

24
Metodos de Inyeccion de GC

 Split
Linea Split esta abierta.
 Solo una parte de la muestra es introducida.
Usada para muestras de concentraciones altas
 Splitless Los mas
Linea Split esta cerrada.
Casi toda la muestra es introducida a la columna.
comunmente
Usada para muestras en bajas concentraciones usados
 OCI
Las muestras son inyectadas directamente a la columna.
Usada para muestras de alto y bajo punto de ebullicion. Usadas para muestras que se descomponen por las altas
temperaturas.
 PTV
Temperatura baja en el puerto de inyeccion Solvente es retirado en el puerto de inyeccion.
Usada para inyecciones de volumenes grandes ( unos cuantos L  unas pocas decenas – cientos L)

25
Que volumen inyectamos en un GC

・Muestra liquida
Volumen de inyecion aproximado１uL
・Muestra Gaseosa
Volumen de inyeccion aproximado 0.2-1mL

Cuando se introduce en la columna, la muestra liquida cambia a gas.

Liquido 1uL－(Vaporizacion）--> Gas varios 100-1000 uL
-->En analisis con una columna capilar, es importante cuan eficientemente
la muestra puede ser introducida dentro de una columna.

26
Volumen de Evaporacion de Muestra Liquida

Volumen de evaporacion de varios solventes

(bajo condiciones de 250 º C y 140kPa en el puerto inyeccion)
Solvente Volumen de inyeccion
1uL 2uL
iso-Octano 110uL 220uL
n-Hexano 140uL 280uL
Tolueno 170uL 340uL
Acetato de etilo 185uL 370uL
Acetona 245uL 490uL
Diclorometano 285uL 570uL
Disulfuro de carbono 300uL 600uL
Acetonitrilo 350uL 700uL
Metanol 450uL 900uL
Agua 1010μL 2020μL

27
Modulo Split/Splitless

28
Modulo Split/Splitless

29
Modulo Split/Splitless

30
Modo Split

31
Modo Splitless

32
 Qué es un Inyector Split?
Split
 Utilizado para análisis
con concentraciones
moderadas, por ejemplo
cientos de ppm.
 Con sistema de purga
del septum para
prevenir picos con cola.

33
Inyector Split

Additional
Septum Insulating
Purge
Carrier
Split Line

50 mm
Syringe
Glass Liner
5 mm ID
Splitting Point
Injector Liner
Chamber

Length of Column
Inside Injector = 40 mm

Carrier Capillary
Pathway Column
7001-1417
970810
Terminal
Fitting Column

34
Cual es el efecto del Inyector Split?

Split ratio Split ratio

1:50 1:200

35
Inyección Splitless

Splitless

 Para análisis de trazas de

componentes.
 Para componentes de bajo punto
de ebullición (efecto solvente).
 Con sistema de purga del septum
para prevenir picos con cola.
 Mínimo volumen muerto.

36
Inyector Splitless

Additional
Septum Insulating
Purge
Carrier
Split Line

70 mm
Syringe

Splitless
Liner

Length of Column
Inside Injector = 64 mm

Capillary 77001-1416
Column 970805

37
Inyector SSL (Como inyectar)

 La muestra puede dejar la aguja de la

vapor/liquido jeringa de dos maneras:
• Formación de Termospray
• Formación de banda líquida

vapor

38
Inyección con Formación Termospray

39
Inyección con Formación de Banda Líquida

40
Optimización

 Termospray
• (A) Corto tiempo de
inserción (0.1 s)
• (B) Correcto tiempo de
inserción (5s)

 Banda Líquida
• (A) Sin empaque
• (B) Empaque con lana de
vidrio

41
Inyector SSL: ¿Termospray ó Banda Líquida?

 Termospray
• La más inerte químicamente
• Uso de liners vacios
• Alta repetibilidad
• Evaporación de muestra confiable también para solventes volátiles
• Compatible con inyección manual
• Menos sensible a acumulación de partículas de septa
• Partículas se acumulan debajo de la entrada de la columna
 Banda Líquida
• Posibilidad de inyecciones de volumenes mayores
• Más robusta para muestras sucias
• Acumulación de productos secundarios no evaporados se quedan en el empaque y no ingresan a la
columna
• Inyección de volumen pequeño (split)
• Adecuado para solventes de altos puntos de ebullición

42
Inyector SSL: ¿Termospray ó Banda Líquida?

 En general Termospray da una evaporación más suave y

confiable
 Use Termospray para compuestos labiles y adsorbentes
 Use Banda Líquida para muestras sucias, particularmente
con columnas de diametro pequeño que son más sensibles
a contaminación
 Use Banda Líquida para inyectar pequeñas cantidades de
muestras concentradas
 Use Banda Líquida evitar pre-picos en analisis isotermico
(o para componentes eluyendo durante el primer paso
isotérmico)

Escoja una técnica y optimizarla

Evitar los mecanismos mezclados

43
 CONTROLADOR DE
The world leader in serving science FLUJO
DPFC Schematic Diagram (SSL / PTV split)

Septum SSL (or PTV)

purge vent
Septum purge On/Off
regulator Valve 1 Pressure
Sensor
3-way
mechanical
switch

Carrier
inlet
Flow Proportional
Filter Sensor 1 valve 1

Column
outlet
Split vent
Flow Proportional Charcoal On/Off
Sensor 2 valve 2 Trap valve 2

45
 HORNO DE
The world leader in serving science COLUMNA
HORNO DE COLUMNA

 Máxima temperatura de uso:

450º C.
 Máxima velocidad de
calentamiento 120 º C/min.
 Rampas de temperaturas
lineales
 Hasta 31 rampas

47
PROGRAMACION DE TEMPERATURA DEL HORNO

 La programación de la
temperatura del horno
depende:
1. Naturaleza de mezcla de
componentes.
2. Cuan separados
necesitamos las señales
para identificar y
cuantificar.

48
 Selección de columnas
Capilares, fases estacionarias
The world leader in serving science y dimensiones
Fases estacionarias
tipos comunes

Polímeros de Siloxano

Glicoles de Poli(etileno)

Polímeros porosos

50
Polisiloxanos
Grupos Funcionales

R
Si O
R
R Nombre
CH 3 Metil

Fenil

CH2CH 2CH 2CN Cianopropil

CH2CH2CF 3 Trifluoropropil

51
Fases estacionarias
% Sustitución

% = # de sitios en los átomos de silicio

ocupados

Balance es metilo

52
Estructura de una columna de fase 5

CH 3
DB-5 DB-5ms
O Si
CH 3 CH 3 O CH 3
Si CH
O 3 Si
Si CH 3 CH 3
O Si
CH 3 Si CH CH 3 O CH 3
3
O Si
CH 3 Si CH 3 CH 3

DB-5 DB-5ms
5% fenil 1.Estabilidad incrementada
2.Selectividad Diferente
3.Optimizada para igualar una DB-5

53
Sangrado: ¿Por qué sucede?

H3C CH3
Si
HO O
CH3 CH3 CH3 CH3 CH3
Si O Si O Si O Si O Si Si
CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH O
3 CH3 CH3
Si O Si O Si O Si O Si O Si O Si OH
CH3
CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3

CH3 CH3 CH3 CH3

Si O Si O Si O Si OH H3C CH3
CH3 CH3 CH3 CH3 + Si
Productos cíclicos
O O son
CH3
H3C Si Si
O CH termodinámicamente
H3C 3

Repite mas estables

54
Fase estacionaria
Poli(etilen) Glicol

HO CH2 CH2 O H
n

100% PEG (WAX)

Menos estable que las de polisiloxanos
Características únicas de separación

55
Poli(Etilen) Glicol
Modificado

Base desactivada
Modificada para ácidos (FFAP)
Rango de temperatura extendidos
(WAXetr)

56
Fases especializadas

Columnas desarrolladas para aplicaciones

particulares

Ejemplos: DB-VRX, DB-MTBE, DB-TPH,

DB-ALC1, DB-ALC2, DB-HTSimDis, DB-
Dioxin, HP-VOC, HP-Blood Alcohol Column

57
Cuatro tipos de fases de bajo sangrado

Fase hechas para igualar polímeros existente

-Ejemplos: 5ms, 35ms, 17ms

Fases nuevas que no están relacionadas a ninguna fase

existente previamente.

-Ejemplos: XLB

Proceso de manufactura optimizado

-1ms, 5ms

58
Selectividad vs. Polaridad

Selectividad: interacciones del soluto con la

fase estacionaria en las separaciones

Polaridad: Característica física de la fase

estacionaria

59
Polaridad

Determinada por la estructura de la fase

estacionaria

Polaridad del grupo funcional

Cantidad de cada grupo funcional

60
Polaridad
No-polar

100% Metil (DB-1, HP-1)

5% Fenil (DB-5, HP-5)

61
Polaridad
Intermedia

35% Fenil (DB-35, HP-35)

50% Fenil (DB-17, HP-50+)

6% Cianopropilfenil (DB-1301, DB-624)

14% Cianopropilfenil (DB-1701)

62
Polaridad
Polar

50% Cianopropilfenil (DB-225)

50% Cianopropil (DB-23)
50% Trifluoropropil (DB-210)

Poli(etileno) glicol (DB-WAX, DB-WAXetr, HP-

INNOWax)

63
Polaridad

Polaridad Estabilidad
Rango de temperatura

64
Polaridad

Polaridad Solubilidad
Fase = Soluto Alta
Fase  Soluto Baja

Alta solubilidad = Alta retención y capacidad

65
Polaridad
Solubilidad y Retención

C10 C12
Hexanol
100% Metil
(no-polar)

0 2 4 6 8

C10 C12

Hexanol 100% PEG

(polar)

0 2 4 6 8

30 m x 0.32 mm ID, 0.25 µm

He at 35 cm/sec
50-170°C at 15°/min

66
Selección de la fase estacionaria
Parte 1

Información existente

Selectividad
Polaridad
Separaciones criticas
Limites de temperatura

67
Selección de la fase estacionaria
Parte 2

Capacidad
Tiempo de Análisis
Sangrado
Versatilidad
Detectores selectivos

68
Dimensiones de la Columna

Diámetro

Longitud

Espesor de película

69
Diámetro de la columna
columnas capilares

I.D. (mm) Nombre Común

0.53 Megabore
0.45 Megabore de alta velocidad
0.32 Ancha
0.20-0.25 angosta
0.18 Minibore

70
Diámetro de la columna Eficiencia teórica

I.D. (mm) N/m

0.10 11905
0.18 6666
0.20 5941
0.25 4762
0.32 3717
0.53 2242
k=5

71
Diámetro de la columna
Presiones en la entrada del puerto de inyección - Helio

I.D (mm) Presión (psig)

0.10 225-250
0.20 25-35
0.25 15-25
0.32 10-20
0.53 2-4
30 metros
Presiones de Hidrogeno x 1/2

72
Eficiencia y Resolución
Relación matemática

N a Rs

Eficiencia X 4 = Resolución X 2

73
Diámetro de la columna
Resolución
180°C isotérmico

R=0.87 R=1.01

n =58,700 n =107,250

0.53 mm 0.32 mm

La raíz cuadrada de la resolución es inversamente proporcional

al diámetro de la columna
74
Diámetro de la columna
Capacidad

I.D. (mm) Capacidad (ng)

0.20 50-100
0.25 75-150
0.32 125-250
0.53 200-400

0.25 µm espesor de película

75
Diámetro de la columna
Velocidad de flujo del gas portador

Diámetros menores para situaciones de flujo

bajo (e.g., GC/MS)

Diámetros mas grandes para situaciones de

flujo alto
(e.g., purga & trampa, espacio de cabeza (headspace))

76
Longitud de la Columna

Mas común: 15-60 metros

Disponible: 5-150 metros

77
Longitud de la Columna
Resolución y Retención
210°C isotérmico

R=0.84 R=1.16 R=1.68

2.29 min 4.82 min 8.73 min

15 m 30 m 60 m

La raíz cuadrada de la resolución es inversamente proporcional

A la longitud
Isotérmico: Retención es proporcional a la longitud
Programa de Temperatura: 1/3-1/2 de los valores isotérmicos
78
Espesor de película

Mas comun: 0.1-3.0 µm

Disponible: 0.1-10.0 µm

79
Espesor de película
Retención
100°C Isotérmico

7.00

0.25 µm

0 2 4 6 8

24.59
1.00 µm

0 5 10 15 20 25

Isotérmico: Retención es proporcional al espesor de la película

Programa de temperatura : 1/3-1/2 de los valores isotérmicos

80
Espesor de película
Capacidad

Espesor (um) Capacidad (ng)

0.10 50-100
0.25 125-250
1.0 500-1000
3.0 1500-3000
5.0 2500-5000
0.32 mm I.D.

81
Espesor de película
Sangrado

Mas fase estacionaria = Mas productos de degradación

82
Dimensiones de la Columna
Resumen del diámetro

Para Incrementar Hacer el Diámetro

Resolución Mas pequeño
Retención Mas pequeño
Presión Mas pequeño
Velocidad de flujo Mas grande
Capacidad Mas grande

83
Dimensiones de la Columna
Resumen del longitud

Para Incrementar Hacer la longitud

Resolución Mayor
Retención Mayor
Presión Mayor
Costo Mayor

84
Dimensiones de la Columna
Resumen de espesor de película

Para incrementar Hacer el espesor

Retención Mayor
Resolución (k<5) Mayor
Resolución (k>5) Menor
Capacidad Mayor
Sangrado Mayor

85
 DETECTOR
The world leader in serving science
Detector de Ionizacion de Flama (FID)

87
Detector de Ionizacion de Flama (FID)

88
Detector de Ionizacion de Flama (FID)

89
Detector de Ionizacion de Flama (FID)

90
Detector de Ionizacion de Flama

 Respuesta universal
 Deteccion por Ionizacion
 Detector masico
 Destructivo

91
Detector de Ionizacion de Flama

 Hidrogeno es mezclado con la

corriente de gas en la parte
inferior del jet y el aire u oxígeno
es suministrado axialmente
alrededor del jet
 Flama de hidrogeno se quema en
la punta, el cual funciona como
catodo y es electricamente
aislado del cuerpo
 Un electrodo recolector esta
arriba de la punta del quemador

92
Detector de Ionizacion de Flama

 Responde a todos los compuestos organicos excepto el acido

formico
 Mayor respuesta con los hidrocarburos y disminuye con la
sustitucion
 Sensibilidad alta debido al bajo nivel de ruido
 No responde a agua, gases permanentes, y compuestos
inorganicos

93
 CAPITULO 3:

ANALISIS
CUALITATIVO
The world leader in serving science
 Que muestra un analisis?

・El tiempo que toma la muestra despues de ser

inyectado hasta que llegue al detector se llama
Tiempo de Retencion. ？
？
→ Que es? :Analisis Cualitativo ？ ？
？

95
 Analisis Cualitativo

Cuando un análisis es realizado bajo las mismas condiciones

analíticas, los mismos compuestos eluyen seguramente al mismo
tiempo.
（Tiempo de Retencion igual）

Muestra

Estandard Compuesto A Compuesto B

(mezcla de compuestos
A yB)

Inyeccion de muestra
Ya que el tiempo de retención es solo de informacion cualitativa, se requiere
el estandar para analisis cuantitativo en GC (fundamentalmente).

96
Formas de identificar

 Tiempo de retención absoluto

 Tiempo de retención relativo

97
 CAPITULO 4:

ANALISIS
The world leader in serving science CUANTITATIVO
 Analisis Cuantitativo

El area de pico (altura) de un compuesto es proporcional a la cantidad del

compuesto que llega al detector (en modo S del FPD, estes es proporcional al
cuadrado de la cantidad del compuesto).
Conc.
Compuesto A (ppm)
Muestra 1uL
100

Area de Pico ： 700 70

Estandard 1uL
(Compuesto A 100ppm) Component A

700 1000
Area pico
Area de pico： 1000

Tambien se requiere estandard para el analisis cuantitativo.

99
 Metodo de Analisis Cuantitativo (1)
-Metodo del porcentaje por Area-

Componente A
Muestra
problema

Area pico 1000 + 2000 + 500 + 1000 = Suma de areas: 4500

La concentracion del componente A es

1000
= 22.2%
4500
・ No requiere de estandar .
・ Deben detectarse todos los componentes de la muestra.
・ La sensibilidad relativa de todos los componentes debe ser igual.
-->Se usa para tener una idea de la concentracion. (No se puede llevar a cabo una
centración exacta)

100
 Metodo de Analisis Cuantitativo(2)
-Metodo de porcentaje de area corregido-

Estandard
(igual a la mezcla de Concentracion del componente
la muestra) A es
Area del Pico
500
1000 + 1500 + 1000 + 500 = 20.7%
Sensibilidad 2 : 3 : 2 : 1 2417
Relativa
Componente A
Muestra
Desconocida

Area Pico 1000 + 2000 500 1000 Suma del area corregida por
Sensibilidad + + = sensibilidad relativa: 2417
Relativa 2 3 2 1

・Es necesario tener la muestra estandard en la cual todos los componentes sean
mezclados con concentracion conocida.
・Todos los componentes en la muestra deben ser detectados.
・La concentracion de cada componente es por sensibilidad relativa.
--> Analisis de la composicion de un cilindro de gas o de una muestra de petroleo, etc.

101
 Metodo de Analisis Cuantitativo (3)
-Metodo de la Curva de Calibracion absoluta-

Concentration
(ppm)

Componente A 100
Muestra
Problema 1uL 70
Peak area : 700

Estandar 1uL Peak area 700 1000

（Componente A Componente A
100ppm）
Concentracion del
componente A es
Peak area : 1000 70ppm
・Se requiere un estandar de concentracion conocida.
・ Si por lo menos es detectable uno de los compuestos, es posible la determinacion
cuantitativa. --> El analisis es comparativamente simple.
・El error en la cantidad de inyección proporciona error en la determinación cuantitativa.

102
 Metodo de Analisis Cuantitativo (4)
-Metodo de Estandard Interno-

Component A Concentracion
Internal Standard：IS ratio
Standard 1uL
Componente A:100ppm
IS(estand.interno):100ppm 1

0.58
Peak area 1200 1000
Peak area ratio 1.2
Internal Standard：IS
Muestra Component A
+IS:100ppm 0.7 1.2
1uL Peak area ratio
Concentracion del componente A es
Area del Pico 1000 Concentracion del IS en la muestra
700
desconocida: 100ppm x
Razon de area 0.7
Concentration ratio: 0.58= 58ppm
de Pico
・Se requiere el estandar (target component +IS) .
・Si es detectable el componente que se desea analizar y el estandard
interno,entonces es posible la determinación cuantitativa.
・Se puede corregir el error por la cantidad de inyeccion.
-->Es el metodo de analisis cuantitativo que mide mas correctamente
・El estandard interno IS debe añadirse en cada muestra desconocida.

103
 Técnicas para la resolución de
problemas en un sistema de
The world leader in serving science cromatografía de gases
Técnicas para la resolución de problemas en un sistema de
cromatografía de gases

105
 En forma lógica divida su sistema en partes

Vea los síntomas

Considere las posibilidades
Aísle el problema

106
 Siempre considere lo obvio

Gases
Fugas
Temperaturas
Misceláneos

Oven temp

107
 Cual es el sintoma?

• Piense en lo que puede haber causado el problema*

• Use las herramientas adecuadas de troubleshooting
para aislar el problema
*refiérase al manual

108
 “Herramientas” de Troubleshooting

Perfil de sangrado: problemas de línea base

Inyección de un pico no retenido: problemas de la

forma de los picos

Mezcla de prueba: todos los problemas

Aislar los componentes: todos los problemas

Prueba de presión estática: revisión de fugas

109
 Generando un perfil de sangrado

Es necesario producirlo cuando la columna

1.3e4
es nueva (para referencias futuras) cuando
hay un problema de línea base
1.2e4

1.1e4

1.0e4

9000

8000

7000

6000
0 5 10 Time (min.) 15 20 25

*DB-1 30m x .32mm I.D., .25µm

programa de temp. // 40°C, mant. 1 min // 20°/min to 320°C, mant. 10
min.

110
 Mezcla de prueba

Se usa para determinar que tan “buena” es la columna si el

problema esta relacionado con las propiedades del analito.

TEST TEMPERATURE: 135°C

mL
CARRIER GAS: (H 2 ) 38.7 cm
sec ( 1.2 )
min

INJECTION: SPLIT ANALYST: ERIK

Max.
Bleed
10.0 pA
325

9.0 pA

135

0 5
RETENTION TIME (MIN)

111
 Componentes de la mezcla de prueba

Compuestos Propósito
Hidrocarburos Eficiencia
Retención
Alcoholes Actividad
FAME’s, PAH’s Retención
Ácidos Carácter acido
Bases Carácter básico

112
 Mezcla de prueba propia

Mas especifica
Detectores selectivos
Concentraciones actuales
Ni hay cambios en las condiciones del
instrumento

113
 Aísle los componentes

Instale una columna nueva de desempeño

conocido
Instale la columna a un GC, puerto de
inyección o detector diferente
Simplifique el sistema:
ejemplo – Inyeccion directa en vez d
einyeccion con purga y trampa

114
 Aislar el detector

Remueva la columna del detector

Tape el detector y enciéndalo
Realice una corrida blanco

115
Aísle los resultados del detector

Detector OK

El detector tiene problemas

116
 Revisión de presión estática

Revise por fugas en el puerto de inyección y

las líneas de gases
Procedimiento general para puertos de
inyección de controles manuales: Procedimiento general para
Selle todas las salidas del puerto de sistema con controles
inyección electrónicos de la neumática:
Abra la salida de gas del cilindro Requiere un procedimiento
hasta 20psi mas arriba de la presión del
diferente el cual se debe
análisis
consultar con el manual de
Cierre el cilindro
operación o el fabricante del
<2 psig por hora deben bajar si el sistema
equipo.
esta libre de fugas

117
 Troubleshooting inteligente

Note cualquier cambio en el sistema

Busque patrones de comportamiento del sistema

Elimine las posibilidades

Aísle los componentes

118
 Recuerde

Sistema completo = Gas portador + puerto

de inyección +
Columna + Detector + Sistema de datos

Múltiples causas y efectos

No cambie demasiadas variables al
mismo tiempo.

119
Y ahora realicemos algún

120
El caso de

121
 Columna DB-624
2.71
Mezcla de control de calidad
1. 1,2-Dicloropropano Columna: DB-624
8.0e4
2. Octano 30m x 53mm I.D., 3.0µm
3. Tetracloroetileno Gas: Helio a 40 cm/sec
7.0e4
4. Clorobenzeno medidos a 35°C
5. Nonano Inyector: Mega Direct, 260°C
6.0e4 Detector: FID, 300°C
7.43 Horno: 35°C por 1.50 min
10.92
30°/min a 65° por 10 min
5.0e4

4.0e4
17.42
12.49

3.0e4

20.78

2.0e4

1.0e4

5 10 15 20 25
Time (min.)

122
Ejemplo de contaminación de la columna
2.21
1.5e4

1.4e4
DB-624 Mezcla de control de calidad*
1.3e4 3.30 Después de 75 Inyecciones de muestra aceitosa

1.2e4

1.1e4

1.0e4

6.03
9000

9.26
8000

10.46
7000 14.40
17.86

6000

0 5 10 15 20
Time (min.)

*programa de temp.// 35°C mant. 1.50 min // 30°/min a 65°C, mant. 10 min

123
Contaminación de la columna y liner

Inlet coil of column

124
 Ejemplo de contaminación de la columna
1.2e4 2.80

1.1e4
Después de cortar 1 1/2 m del lado del inyector *
1.0e4

7.34
9000 10.79

8000 17.19
12.33

7000 20.56

6000

5000
0 5 10 Time (min.) 15 20 25

*Antes de lavar y cocinar la columna

Tprograma de temperatura // 35°C mant. 1.50 min // 30°/min a 65°C, mant. 10 min

125
Se ve arreglada verdad?

126
 Liner contaminado

De la muestra aceitosa

127
 Lavado del inyector

Línea de gas portador

Horno del GC

Cuerpo del Inyector

MeCl2 C6

128
129
Corrida de condicionamiento de una columna de un cliente DB-5ms

Después un mes y medio aminoácidos

derivatizados de tejidos y limpieza mínima
Instale y condicione la columna
35°C por 5 min
20°/min a 325°C,
mantenga por 90 min

Condicionamiento “bueno”

100
20

40

60

80

130
 Segunda corrida de acondicionamiento

D sangrado =
34.2 pA
Normal
D sangrado = 4
pA 100
20 40 60 80

131
 Columna DB-5ms típica

Columna: DB-5ms
Mezcla de
30 m x 0.25 mm I.D., 0.25 µm
P/N:
Horno:
123-5522
125°C
control de 1. Acido 2-Etilhexanoico
Gas:: Helio a 37.2 cm/sec
Inyector:
Detector:
250°C, Split 1:250
320°C, FID calidad 2.
3.
4.
1,6-Hexanodiol
4-Clorofenol
Tridecano
5. 1-Metilnaftaleno
4 5 6. 1-Undecanol
1 7. Tetradecano c
Carrier Gas: (He) ( ) s

8. Dicclohexilamina
Injec tion: Split (1:250)

t: 1.34
2
7
3 6
8

0 5 10

0 5 10
Tiempo de retención (Min.)
Retention Time (Min.)

132
Verifique el desempeño de la columna

C13
Mezcla de prueba
A
Todos los picos tienen cola!
C14

D
A

2 4 6 8 10 12

Temperatura de prueba: 125°C

Gas portador : Helio a 37.2 cm/sec

133
 Lavado de columna

Enjuague con 10ml de cada uno de los siguientes:

Metanol, Cloruro de metileno, Hexano

Columna capilar

Conector especial
y férula

Tubo de teflon
flexible
Línea flexible de teflón de 1/16" Adaptador especial
que conecta a la fuentes de
presión regulada
Tapón
Vial
Beaker para descarte
de solvente Columna capilar

134
 Perfil de sangrado

Después de lavado de la columna

D sangrado =
6.5 pA

10 20 30

horno: 35°C por 5 min, 20°/min a 325°C, mant. por 90 min

Gas portador: Helio a 37.2 cm/sec

135
 Mezcla de prueba

Después de lavado de columna

C14

C13

A
A

D
A
2

6
2 4 6

Temperatura de prueba: 125°C

Gas portador: Helio a 37.2 cm/sec

136
 Comparación del desempeño
Antes de lavado
N ~= 39605
Wb = .17

6 10
N~
= 106309
Despues de lavado Wb = .078
2

Temperatura de prueba: 125°C 6

Gas portador: Helio a 37.2 cm/sec

137
CONTINUA CONTAMINADA?

138
 Corte 1M del lado del inyector

k = 3.1
D k= -0.28

k = 5.63
D k= -0.44

Temperatura de prueba: 125°C

Gas portador: Helio a 37.2 cm/sec

139
 Corte la columna a la mitad

Mezcla de prueba- Lado del detector

Temperatura de prueba: 125°C

Gas portador: Helio a 37.2 cm/sec

140
El misterio de

141
 Una columna DB-1ms nueva

La cola de los picos empeora a medida que el tiempo de retención se

incremente

PAHs Columna: DB-1ms

30 m x 0.25 mm I.D., 0.25 µm
J&W P/N: 123-1522
Temperatura: 80°C por 0.8 min
80-325°C a 15°/min
325°C por 2 min
Gas portador: Helio a 40 cm/sec
Inyector: Sin division, purga en
8 min, 300°C
Liner: Liner enfocado (c/lana de vidrio)
Detector: Línea de transferencia 325°C
Fuente 200°C
Quad 150°C

10 10.5 11 11.5 12 12.5 13 13.5 14 14.5 15 15.5 16 16.5 17 17.5 18 18.5

10.00 10.50 11.00 11.50 12.00 12.50 13.00 13.50 14.00 14.50 15.00 15.50 16.00 16.50 17.00 17.50 18.00 18.50

142
Que causa que la cola de los picos empeore con el tiempo de
retención?

Contaminación de la columna
Puntos fríos (condensación)
Temperatura del inyector muy baja

143
Que pasa con el detector?

144
 Incremente la temperatura del detector

Forma original de los picos

10.00 10.50 11.00

10 10.5 11.50 12.00
11 11.5 12 12.50
12.0 13.00
13 13.50
13.5 14.00
14 14.50
14.5 15.00
15 15.50
15.5 16.00
16 16.50
16.5 17.0017 17.50
17.5 18.0018 18.50
18.5

145
 Instalación, Cuidado y
Mantenimiento de columnas
Capilares para cromatografía de
The world leader in serving science
gases
Instalación de la columna

“Obteniendo un buen inicio”

147
Procedimiento General para la instalación de Columnas

Instale la columna
Revise por fugas e instalación
Acondicione la Columna
Establezca la velocidad de flujo
Corra un perfil de sangrado
Realice una corrida de mezcla de
prueba

148
Instalación de la columna

Que tipo de férula debo usar?

Grafito
Grafito/Vespel

149
Cortando la Columna

Suavemente haga un corte al recubrimiento

de poliamida.
No intente cortar el vidrio.

Herramientas Recomendadas:
Lápices de diamante o zafiro , oblea de
cerámica
Nunca use:
Tijeras, limas, etc.

150
Ejemplo de un mal corte

151
Ejemplos de cortes de Columna

Malo

Bueno

152
Instalación de la Columna
Midiendo la distancia correcta

correcto Septa
(liquid paper)

153
Instalación de la Columna

¿Que tan
apretado es
apretado?

154
Férula sobreapretada

155
Instalación de la Columna
Revisión de fugas

Detector electrónico de fugas

IPA/Agua
Inyecte un pico no retenido

NO USE SNOOP

156
 Acondicionamiento de la Columna

El sistema debe estar libre de fugas antes de acondicionar la

columna

Caliente la columna a:
Temperatura isotérmica máxima o
20° o 30° C arriba de la máxima temperatura de operación del
método

“La programación de la temperatura no es necesaria”

Detenga el acondicionamiento cuando la línea base esté estable:

1 o 2 horas en la mayoría de los casos

157
Generando un perfil de sangrado

Corra un programa de temperatura sin

inyección
1.3e4

1.2e4

1.1e4

1.0e4

9000

8000

7000

6000
0 5 10 15 20 25
Time (min.)

*DB-1 30m x .32mm I.D., .25µm

Programa de temp. // 40°C, mantenga 1 min // 20°/min a 320°C, mantenga 10
min.

158
Mezclas de Prueba

Son utilizadas para determinar que tan “buena”

es la columna

#1

159
Desempeño Cromatográfico

TEMPERATURA DE PRUEBA: 135° C

cm mL
GAS PORTADOR: (H 2) 38.7 sec ( 1.2 ) min

TIPO DE INYECCION: CON DIVIDION ANALISTA: JUAN PEREZ

Max.
Bleed
10.0 pA

325

9.0 pA

135

0 5

TIEMPO DE RETENCION TIME (MIN)

160
Mezcla de prueba propia

Más específica
Detector Selectivo
Concentraciones actuales
No hay cambio en las condiciones o
instrumento

161
Una Onza de Prevención......

162
Causas comunes para la degradación del desempeño de las
columnas

Daño físico a la cubierta de poliamida

Daño térmico
Oxidación (Daño por O2 )
Daño químico por las muestras
Contaminación

163
Daño físico a la cubierta de poliamida

Doblar demasiado la columna al manipularla

Evitar rayar la cubierta de poliamida

Roturas inmediatas no siempre ocurren cuando

hay daño físico.

164
Daño térmico

La degradación de la fase estacionaria se incrementa a mas altas

temperaturas. Rotura a lo largo del esqueleto del polímero.

CH3 CH3 CH3

Si Si Si

O O O O

CH3 CH3 CH3

Dimetilpolisiloxano

165
Daño térmico

Que hacer si esto pasa

Desconecte la columna del detector

“Cocine” durante la noche al limite

isotérmico

Corte 10-15 cm. de cada lado de la

columna

166
Oxidación (Daño por O2)
El oxigeno presente en el gas portador degrada rápidamente la fase
estacionaria. El daño se acelera a temperaturas altas. El daño en el
esqueleto del polímero es irreversible.

CH3 CH3 CH3

Si Si Si

O O O O

CH3 CH3 CH3

O2
Dimetilpolisiloxano

167
Daño por Oxigeno

Daño rápido a la columna

Usualmente resulta en daño irreversible a la

columna

168
Como prevenir el daño a la columna por oxigeno

Usar siempre gas portador de alta calidad y pureza

(99.9998%) o mejor

Sistema completo libre de fugas (inyector, líneas de

gas)

Cambiar la septa.

Dar mantenimiento a las uniones de los reguladores

Usar trampas de impurezas apropiadas

169
Configuración para los purificadores de gases

Trampa Trampa de Trampa

indicadora de oxigeno de alta indicadora de
humedad capacidad oxigeno

OVEN TEMP 100

GC

170
Daño químico

Columnas enlazadas y cruzadas (cross-linked) tienen una excelente

resistencia química excepto para los ácidos y bases inorgánicos

HCl NH3 KOH NaOH

H2SO4 H3PO4 HF etc.

El daño químico será evidente por excesivo sangrado, falta de
inactividad o pérdida de resolución/retención

171
Daño químico

Que hacer si esto pasa

Cortar 1/2 - 1 metro de la parte frontal de la

columna (lado del puerto de inyección)

Casos muy severos pueden requerir que se

corte hasta 5 metros

172
Cual es el sangrado normal

Es la señal de fondo
generada por la elusión de
los productos de
degradación de la fase
estacionaria de la columna

173
El sangrado de la columna esta influenciado por:

1.3e4

1.2e4 Tipo de fase

Temperatura
1.1e4
Dimensiones de la
1.0e4 Columna
9000
DB-624 30M x .53mm I.D., 3.0µm
24 pA / 260°C
8000

7000 DB-1 30m x .32mm I.D., .25µm

12 pA / 320°C

6000
0 5 10 15 20 25
Tiempo (min.)

174
¿Cual es un problema de sangrado?

Una línea base anormal elevada a alta temperatura?

NO
Una línea base alta a baja temperatura
SI

175
Contaminación de la columna

176
Síntomas de Contaminación

Forma de los picos mala

Pérdida de separación (resolución)
Cambios en la retención
Reducción en el tamaño de los picos
Perturbaciones en la línea (solamente
semi-volátiles)

177
Muestras típicas que contienen una gran cantidad de
residuos

Biológicas (Sangre, orina, Tejidos, Plantas)

Suelos Alimentos
Agua de desecho Lodos

Todas las muestras contienen residuos!!

178
Otras fuentes de contaminación

Partículas de la Septa y férula

Impurezas de gas y las trampas (filtros)
Fuentes desconocidas (viales, jeringas, etc.)

179
Residuos no-volátiles

Cualquier porción de la muestra que no sale de la

columna o permanece en el puerto de inyección.

Residuos semi-volátiles
Cualquier porción de la muestra que sale de la columna
después de la corrida cromatográfica

180
Métodos para minimizar problemas con residuos no-volátiles

Limpieza de la muestra

Usar liner adecuados y

cambiarlos

Columnas de respaldo (Guard

columns)

181
Columna de respaldo

INYECTOR DETECTOR

La columna de respaldo es 0.5 - 10 metros de silica fundida desactivada con el

mismo diámetro de la columna analítica. Se conecta con una unión de volumen
muerto especial.

182
Almacenaje de la columna

Selle las puntas de la columna con una septa

Coloque la columna en su caja

183
 SIEMPRE RECUERDE:

-INICIAR CON UNA BUENA INSTALACION DE LA COLUMNA

- MANTENGA EL SISTEMA LIBRE DE FUGAS (AIRE)

- EVITE DAÑO FÍSICO, TÉRMICO Y QUÍMICO

-TOME LOS PASOS NECESARIOS PARA PREVENIR LA

CONTAMINACIÓN

184
Detector de Captura de Electrones (ECD)

185
Detector de Captura de Electrones (ECD)

186
Detector de Captura de Electrones (ECD)

187