BACILOS GRAM

NEGATIVOS NO
FERMENTADORES DE
GLUCOSA
CARÁCTERÍSTICAS GENERALES

 Bacilos aerobios
 Móviles flagelos polares ó inmóviles

 No esporulados.

 Algunos poseen la enzima citocromooxidasa.

 NO FERMENTAN LA GLUCOSA

 No utilizan CH, ó lo degradan por vía oxidativa.

BACILOS GRAM NEGATIVOS NO
FERMENTADORES
AMINOÁCIDOS
PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA AZÚCARES

 El caldo rojo de fenol es usado para observar la

fermentación de algún carbohidrato como puede
ser maltosa, glucosa, sacarosa, lactosa, trealosa.
Fundamento: Se basa en que el metabolismo de la
fermentación produce ácidos medianamente fuertes
como el ácido acético, acido fórmico, ácido láctico,
ácido málico, entre otros y también gas en una
campana de Durham.
Indicador: Rojo de fenol
 El caldo debe estar a Ph 7.4 , el color del caldo
queda naranja-rojizo.
 Si hay
fermentación del
carbohidrato el
caldo tornara de
color amarillo

Si no hay
fermentación el
caldo tiene una
coloracion
naranja-rojiza.
 AGAR O.F
OXIDACIÓN-FERMENTACIÓN.
(MEDIO HUGH LEIFSON)
 FUNDAMENTO
La peptona de caseína y el azúcar añadido constituyen la
base nutritiva y energética del medio. El Azul de Bromotimol
permite identificar las variaciones del pH. El di-Potasio
Hidrógeno Fosfato actúa como regulador del pH y el Sodio
Cloruro aporta la salinidad necesaria para el buen
crecimiento de los gérmenes. Los ensayos se hacen por
duplicado en dos tubos, uno cubierto con aceite mineral (F) y
otro sin (O). Además del cambio de color del indicador (de
verde a amarillo) es necesario observar la producción de gas
y el tipo de crecimiento obtenido.
 Indicador: Azul de bromotimol
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Interpretación de resultados:
 -Positivo: Color amarillo

 -Negativo: Color verde

Citocromo-oxidasa
Fundamento: El objetivo de la prueba “oxidasa es buscar
la presencia de la enzima C oxidasa. Se trata de una
enzima que oxida el citocromo C de la cadena
transportadora de electrones.

La enzima citocromo-oxidasa es producido en grandes

cantidades por ciertas bacterias (Pseudomonas,
Pasteurella, Neisseria, Aeromonas, Vibrio, Campylobacter,
Brucella, Acinetobacter, Moraxella, Agrobacterium,
Bordetella, Flavobacterium, Achromobacter,
Micrococcus,Alcaligenes, Plesiomonas, Legionella),y no es
producido por las Enterobacterias ni por Staphylococcus.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Oxidasa positivo: Las colonias desarrollan un color

azul oscuro cuando la enzima reacciona con el alfa-
naftol y la N-N dimetil –p-fenilendiamina en
término de 10 segundos.
Oxidasa Negativo: No se produce cambio de color
antes de 60 segundos.
Control Positivo : Pseudomonas aeruginosa.
Control Negativo: Escherichia coli.
HIDROLISIS DE BILIS Y ESCUELINA
 Fundamento: La escuelina es un glúcido
sustituido que puede ser hidrolizado por ciertas
bacterias para producir glucosa y esculetina. La
escueletina es un compuesto fluorescente y
cuando es hidrolizado la fluorescencia se pierde y
el medio vira a negro debido a la reacción
escueletina con iones férricos presentes en el
medio.
 Sustrato: Escueletina

 Productos:
 Indicador: Citrato férrico y citrato de amonio
(50/50).
 Técnica: Sembrar con asa en punta en el medio.

 Positiva: Engrecimiento del

medio.
 Negativo:No enegrecimiento

del medio.
PRUEBA DE LICUEFACCION DE LA
GELATINA

 Principio: Determinar la capacidad de un

microorganismo de producir enzimas de tipo
proteolítico (gelatinasas) que licuan/ hidrolizan la
gelatina o muestran cambios característicos
debido a los productos de degradación.