Estructura Química

• Son antibióticos con una estructura química tetracíclica básica,

formadas por la fusión de cuatro anillos bencénicos.

• Son un grupo de antimicrobianos de amplio espectro.

• Con actividad contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas,

aerobios y anaerobios.

• En el año 1948 aparece el primero de estos antibióticos, la

clortetraciclina, a partir de un cultivo de Streptomyces aureofaciens.
Las tetraciclinas naturales se extraen de las bacterias del
género Streptomyces.

Streptomyces aurofaciens se extraen la clortetraciclina y la

demetilclortetraciclina, de Streptomyces rimosus se extrae la
oxitetraciclina y la tetraciclina, la cual es la representante
genérica del grupo.
• Streptomyces género más extenso de actinobacterias, grupo de
bacterias Gram positivas de contenido GC alto.
• Bactérias Gram positivas: Streptococcus, Diplococcus, Clostridium.
• Bactérias Gram negativas: Neisseria, Brucellas, Escherichia coli,
Klebsiella, Vibrio entre otros.
• Espiroquetas.
• Protozoos: Entamoeba.
• Se unen de manea reversible a los receptores de la subunidad
30s, del ribosoma bacteriano y de esta manera bloquea la
fijación del tRNA al sitio aceptor en el complejo mRNA, con lo
cual evita la incorporación de nuevos aminoácidos a la cadena
peptídica en crecimiento, inhibiendo la síntesis de proteínas.
Cascara de piña como materia prima para la
Fabricación de tetraciclinas.

Esta materia orgánica es un desecho solido

principal de la industria de procesamiento de
zumos, la eliminación de estos residuos se
convierte en un problemas para muchas de estas
industrias alimentarias.
Al ser una material orgánico biodegradable y con
gran cantidad nutrientes, puede ser usado como
sustrato para la fermentación de las tetraciclinas.
• La cascara de piña se seca a 60°C
durante 72 h. para así reducir el
contenido de humedad a alrededor del
5%.

• Después se muele hasta obtener un

tamaño medio de partículas (mm) de 12 x
4, 12 x 2, 6 x 4, 2.8- 2,0; 2,0-1,4 y 1,4-1,0.
• La producción de tetraciclinas se puede realizar
por fermentación líquida y solida.

• La fermentación Liquida o sumergida (SMF),

requiere de altos costos en la producción, lo
cual refleja un elevado costo del producto.

• La fermentación solida (SSF), al contrario es

mas rentable para la producción del metabolito
secundario y tiene muchas ventajas sobre la
fermentación liquida.
 Fermentación de Estado Solido (SSF)
• Es un proceso microbiológico que ocurre
comúnmente en la superficie de materiales sólidos
que tienen la propiedad de absorber y contener
agua, con o sin nutrientes solubles.
Ventajas
• La baja actividad del agua es de gran ayuda para
evitar las contaminaciones, especialmente de
bacterias y de levaduras.
• Los medios de cultivo son simples, generalmente
subproductos agrícolas que presentan un alto
contenido de los nutrientes necesarios.
• La aireación forzada es facilitada por la porosidad
del soporte, lo que permite una alta transferencia de
oxígeno al microorganismo.
 Formulación del medio de cultivo
• El microorganismo Streptomyces aureofaciens se siembra
en la superficie del medio en cajas de Petri y después de 4
a 5 días de incubación a 28ºC.

Cultivos “maestro” y de “trabajo”

• Se escoge una colonia típica la cual se macera en
condiciones asépticas y se siembra en la superficie de 3 ó
4 tubos de ensayo, conteniendo medio de cultivo inclinado
y estéril, Después de dos días de incubación a 28°C, se
seleccionan los tubos que muestren un crecimiento
homogéneo y no estén contaminados.
• Estos cultivos denominados “maestro” se almacenan por un
período de cinco meses a 8°C.
• Estos cultivos ya desarrollados después de incubados a
28°C, constituyen los cultivos de “trabajo” que se
almacenan a 8°C y que serán utilizados en la siembra de
los “inóculos” que se destinarán a la “Planta de
Producción”.
 Composición del medio de cultivo

• Extracto de malta 0.3%

• Glucosa 1%
• Extracto de levadura 0,3%
• Peptona 0,5%
• Agar 2,0%

Composición del cultivo maestro y trabajo

• Extracto de malta 0.3%

• Glucosa 1%
• Extracto de levadura 0,3%
• Peptona 0,5%
• Agar 2,0%
 Formulación del medio de cultivo
“Inoculo’’
• El inóculo consiste en un matraz Erlenmeyer de 2500 ml
conteniendo 1500 ml del medio de cultivo líquido.
• El medio de cultivo del “inóculo” se esteriliza por 60 min, a
121°C y una vez frío, es inoculado en condiciones
asépticas con 5 ml de una suspensión acuosa de esporas
de S. aureofaciens, provenientes de un tubo de “trabajo”.
• Los “inóculos” se incuban por 48h a 28°C en agitación
orbital a 202 rpm.

La composición del medio de inóculo fue

• Almidon soluble 2.5% - Licor de maiz macerado 1.0%
• Sulfato de amonio 0.5% - Carbonato de calcio 2%
• Cloruro de sodio 1% - Fosfato dipotásico 1%
• Sulfato de magnesio 1% - pH 7.5
 Una vez en el biorreactor
1. El parte basal contiene sólido cáscara de piña 100g de este
residuo y sales inorgánicas adicionales (1% p / p).

2. Nitrógeno inorgánico (1% p / p).

3. Nitrógeno orgánico (10% p / p).

4. Carbono (10% p / p).

5. Los contenidos son mezclados a fondo y sometidos

Autoclave a 121°C con (15 psi) durante 20 min.

6. El medio esterilizado se mezcla a fondo con esporas de

Streptomyces aureofaciens a 35°C durante 2-10 días con
agitación una vez al día.
 Streptomyces aureofaciens

-Gram Positiva.
-Aerobia estricta.
-Catalasa positiva.
-Quimiorganotrofas.
-Producen filamentos embellecidos por esporas.
-Forman pigmentos asociados a las esporas.

Debe ser capaz de formar colonias con las siguientes

características:

• Circulares.
• Aplanadas.
• 3-4mm de diámetro.
• Convexas.
• de bordes enteros.
• superficie brillante.
• color naranja intenso.
• pH del medio de cultivo 6,4.
• pH del inoculo 7,5.
• pH de fermentación 5.85.
• T° medio de cultivo 28°C.
• T° cultivo maestro 8°C.
• T° inoculo 28°C.
• T° fermentación 35°C.
• Tiempo medio de Cultivo 4-5 días.
• Tiempo de cultivo Maestro 5 -8 meses.
• Tiempo inoculo 5 a 7 días.
• Tiempo fermentación 2-10 días.
 Streptomyces aureofaciens Se degrade

Agitar repetidas

Elevar el pH y lograr la Tratamiento de efluentes

precipitación del antibiótico .

Contaminantes precipiten y Se recuperan los cristales de

se recojan "tetra-urea’’
1. El "caldo fermentado" se retira del tanque fermentador.
2. se recibe en un tanque con agitación; se acidifica con ácido clorhídrico.
3. Agrega sulfato de sodio para evitar que el antibiótico producido se degrade.
4. Esta mezcla es luego filtrada a través de un filtro prensa..
5. El filtrado se envía a un segundo tanque agitado para continuar el proceso
de extracción, donde se agrega hidróxido de sodio para elevar el pH y
lograr la precipitación del antibiótico.
6. Se agita repetidas veces para lograr el crecimiento de los cristales de
tetraciclina
7. Filtrar a través de filtro prensa.
8. El filtrado se descarta, enviándolo al área de tratamiento de efluentes, y la
“torta” recuperada y húmeda de tetraciclina, se disuelve (1:1) en una
solución de agua-metanol a pH de 1.2, a la cual se agregan, ferrocianuro
de sodio y sulfato de calcio, para lograr que los materiales contaminantes e
insolubles, precipiten y se recojan .
9. Filtrar a través del filtro prensa.
10. El filtrado recuperado se trata con urea a pH de 3.5-4.0
11. Después de centrifugar
12. Se recuperan los cristales de "tetra-urea" que se suspenden en agua-oxitol
a pH de 3.5 para obtener finalmente, los cristales de tetraciclina-base que
son luego centrifugados secados.
• Canale-Guerrero, A., & Chombo-Morales, P., & Soto-Velazco, C. &
Sigüenza-López, R., & Feria-Velasco, A. (2012). BIOSÍNTESIS DE
TETRACICLINAS. e-Gnosis, 10 , 1-10.

• María Antonieta Jara O. MV. MSc. (2007) Avances en Ciencias

Veterinarias - Vol. 22, Nº 1 y Nº 2, TETRACICLINAS: UN MODELO DE
RESISTENCIA ANTIMICROBIANA. pp. 49-55.

• Basavaraj M. Vastrad col. (2011). PRODUCTION AND OPTIMISATION

OF TETRACYCLINE BY VARIOUS STRAINS OF STREPTOMYCES
UNDER SOLID STATE FERMENTATION USING PINEAPPLE PEEL
AS A NOVEL SUBSTRATE. Department of Pharmaceutical
Biotechnology. 577 451.

• Agenes E.A., Abiodun I.S., Olusola B.O., (2005). SOLID STATE

FERMENTATION PRODUCTION OF TETRACYCLINE BY
STREPTOMYCES STRAINS USING SOME AGRICULTURAL WASTES
AS SUBSTRATE. World Journal of Microbiology and Biotechnology. 21,
107-114