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Nucleicos
Son macromoléculas
formadas por la unión de
nucleótidos.
LOS NUCLEÓTIDOS
BASES
NITROGENADAS
PIRIMIDINAS
BASES
NITROGENADAS
DERIVADAS O
MENORES
NH2
Grupo fosfato
N
O Carbono 5´
N
-
O P O CH2 N
O N
O- H H Nitrógeno N9
(purina)
Nitrógeno N1
H (pirimidina)
D- Ribosa
OH OH
2´ Desoxirribosa
Pentosa Base
Fosfato Nucleósido
Nucleótido
ATP
AMPc
ÁCIDOS NUCLEICOS
Funciones dedelos
Propiedades losNucleotidos:
Nucleotidos:
Forman
•La parte
presencia dede los ácidos
cargas nucleicos
negativas en los fosfatos los
Nucleótidos
hace polifosforilados:
aún más solubles.
Transporte de grupos fosfatos
• Aparecen solubles en proporciones altas.
Reserva energética: ATP
• Los grupos fosfatos
Activación dan fuerte
energética carácter ácido a la
de moléculas:
molécula, por lo quetienden
UDP-glucosa a asociarse
Síntesis de glucógenoa cationes
solubles (Ca, Mg)
CDP-colina Síntesis de fosfolípidos
Nucleótidos cíclicos:
Segundos mensajeros: AMPc, GMPc
Derivados nucleotídicos:
Coenzimas: NAD, FAD, Coenzima A
5´ NH2
N
N
O P O CH2 N
O N
-
O NH2
N
O N
OH
Enlace O P O CH2 N
O N
fosfodiester -
O NH2
N
O N
OH
Enlace
O P O CH2 N
fosfodiester O N
-
O
O OH
3´
ÁCIDOS NUCLEICOS
Niveles de organización
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN
En 1949, descubre
complementariedad de
bases:
A+G = T+C
A=T
G=C
1.- La composición de bases generalmente varía de una
especie a otra.
2.- El ADN de tejidos diferentes de un organismo tiene
igual composición de bases.
Erwin Chargaff 3.- La composición de bases no varía con la edad, estado
(1905 – 2002) nutricional, variaciones del entorno.
4.-El ADN de especies relacionadas tiene composición de
bases similares.
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN
Rosalind Franklin
(1920 – 1958)
SURCO
MAYOR
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN
FORMAS DE ADN
Tipos de ARN
ARN mensajero o ARNm: lleva las instrucciones para
hacer una proteína en particular, desde el ADN en el
núcleo hasta los cromosomas.
ARN de transferencia o ARNt: lleva los aminoácidos a los
ribosomas, se encuentra en el citoplasma.
ARN ribosomal o ARNr: forma parte de los ribosomas.
Tipos de ARN
ARN mensajero (ARNm)
GENOMA
Es el número total de cromosomas de un organismo, incluido sus genes.
CARIOTIPO HUMANO
CARIOTIPO DE HÁMSTER
Gen: Segmento de ADN que codifica Químicamente para la
producción de proteínas
Gen 1
Gen 2
Cromosoma ADN
-Intrones y exones
-ADN Continuo
-Mayor tamaño
-Menor tamaño
-Núcleo
-Citoplasma
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN
CROMATINA
TOTALIDAD DEL COMPLEJO FORMADO POR ADN DE UNA
CÉLULA Y LAS PROTEÍNAS ASOCIADAS. Masa enmarañada
de fibras de complejo de AND-proteina.
Fibra de 30 nm
NUCLEOSOMAS: bloques estructurales básicos de empaquetamiento del
ADN de la cromatina en un cromosoma
Fibra de 30 nm
HISTONAS
H2A H2B H3 H4 x 2
H1
CROMATOOSOMA
CROMATINA
CROMATINA
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR
Crick
Temin
MODELOS PROPUESTOS PARA LA REPLICACIÓN
-Es semiconservativo.
-Es bidireccional.
-Es semidiscontínuo 5´ 3´
REPLICACIÓN DEL ADN
ADN MOLDE
PRIMASA
PRIMER O CEBADOR
(ARN)
Polimerasa
Procariotas
ADN polimerasa I: Exonucleasa 5´ 3´
ADN polimerasa II: Exonucleasa 3´ 5´
ADN polimerasa III: Exonucleasa 5´ 3´
Eucariotas
ADN polimerasa α
RP-A
ADN polimerasa δ
REPLICACIÒN DE LOS EXTREMOS
Telomeros: repeticiones
consecutivas
De una secuencia
hexanucleotidica
Rica en Guaninas
INHIBIDORES DE LA REPLICACIÓN
5'- CGGCTGT-3'
3'- GCCGACA-5'
Transversión (cambio del par A-T por T-A)
5'- CGTCTGT-3'
3'- GCAGACA-5'
Inserción (colocar un par extra ej: G-C)
5'- CGAGCTGT-3‘
3'- GCTCGACA-5'
Sustitución
Anemia Falciforme
EL ALBINISMO
REPARACIÓN DEL ADN
La reparación del ADN es el conjunto de procesos involucrados en
la corrección del daño en el ADN.
Glicosilasas
Reparación por escisión de nucleótido
Una fragmentación de la doble cadena puede repararse por la
unión de extremos no homólogos. El cromosoma se vuelve a
"pegar", generalmente con una pequeña mutación en el sitio de
la rotura.
Se utiliza la información del cromosoma homólogo que coincide con la del dañado (o de una cromátida
hermana si el ADN se ha copiado) para reparar la fragmentación. En este proceso se acercan los dos
cromosomas homólogos y se utiliza la región sin daños del homólogo o la cromátida como molde para
sustituir la región dañada del cromosoma roto. La recombinación homóloga es "más limpia" que la
unión de extremos no homólogos y no suele causar mutacione
La transcripción consiste en la
síntesis de ARN tomando como
molde ADN.
Los ARN más pequeños son los tARNs, que contienen alrededor de 75
nucleótidos, mientras que el más grande esta entre los mARN, que
pueden tener más de 5.000 nucleótidos.
TIPOS DE ARN
ARN funcionales: ARN que tienen una función o actividad en la
célula y que no se traducen a proteína.
Hebra codificadora
Hebra molde
Transcrito
Asimetria de la transcripción: la
Hebra codificadora
asimetria de la transcripcion significa
que solamente se transcribe para
cada gen una de las dos helices de
ADN
Hebra molde
TRANSCRIPCIÓN DEL ADN
ARN polimerasa
(procariotas)
-Esta formada por subunidades 2‘
-INICIACIÓN
-ELONGACIÓN
-TERMINACIÓN
Secuencias promotoras consenso de E. coli y eucariotas
PROCARIOTAS
-35 -10
Caja de Pribnow 1era Base
transcrita
EUCARIOTAS
Procariotas
Transcripción
Procariotas
Iniciación en Eucariotas
TFIID,TFIIA,B,E,F
Secuencias activadoras o potenciadoras
ARN polimersa II
Iniciación en Eucariotas
ELONGACIÓN
-Alargamiento de la cadena
b)
Procariotas
TERMINACIÓN
Dependiente
de Rho
TERMINACIÓN
Dependiente
de Rho
Procariotas
PROCESAMIENTO DEL ARNhn
1)- Adición de una caperuza o protección por el extremo 5'P del ARN-hn: Esta
caperuza (cap), consiste en la adición de un residuo de 7-metilguanosina
mediante un enlace trifosfato. Existen tres tipos de cap: cap0, cap1 (es el tipo
más frecuente de caperuza) y cap2. Otra posible función de la cap del
extremo 5'P es la suministrar una estructura que sea reconocible por el
ribosoma para iniciar la traducción.
2)-Adición por el extremo 3'OH de una cola de Poli-A: consiste en la adición
de 150 a 200 residuos de adenina por el extremo 3'OH. En primer lugar una
endonucleasa corta el ARN y después una Poli A polimerasa añade la cola de
Poli A. La longitud de la cola de Poli A varia en eucariontes, es de 150 a 200
nucleótidos en células de mamíferos, y de 50 a 60 residuos en levaduras. La
función de la cola de Poli A se cree que puede servir para evitar la
degradación por del ARN por ese extremo e intervenir en el transporte del
ARN hacia el citoplasma.
Complejo
Polimerasa
poliadenilato
Complejo
Enzimatico
3)-Eliminación de segmentos interiores del ARN-hn: Los genes en eucariontes
están fragmentados, de manera, que poseen regiones que se traducen a
aminoácidos en la secuencia del polipéptido y que se denominan Exones y,
regiones que no se traducen a aminoácidos en el polipéptido y que se
denominan Intrones.
SINTESIS PROTEICA
ROBERT HOLLEY
H. KHORANA
F. CRICK
M. NIRENBERG
Es el conjunto de
normas por las que la
información codificada
en el material genético
(secuencias de ADN o
ARN) se traduce en
proteínas (secuencias
de aminoácidos)
CARACTERÍSTICAS DEL CÓDIGO GENÉTICO
-INICIACIÓN
-ELONGACIÓN
-TERMINACIÓN
RIBOSOMAS
ARNr 5S ARNr 5S
21 PROTEÍNAS 33 PROTEÍNAS
PROCARIOTA EUCARIOTA
INICIACIÓN DE LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
2.- Unión del Met-ARNti a la subunidad 40S para formar el complejo de Iniciación 43S
3.-Unión del ARNm al complejo 43S para formar el complejo de preiniciación 48S y
4.-Unión del complejo de preiniciación 48S con la subunidad 60S para formar el
complejo de iniciación 80S
40S
5´ Codón Iniciador
AUG 3´
60S
Factores de
Iniciación
NOMENCLATURA DE LOS FACTORES DE INICIACIÓN DE LA
SÍNTESIS PROTEICA (EUCARIOTAS)
Factores de Función
Iniciación
eIF-1A Antiasociación de ribosomas
eIF-2 Unión GTP-dependiente del Met-ARNt al
ribosoma 40S
eIF-2A Unión AUG-dependiente del ARNt al ribosoma
40S
eIF-2B Intercambio GTP-GDP del eIF-2
eIF-2C Estimula la formación del complejo de
preiniciación 43S
eIF-3 Evita la asociación de las subunidades ribosomales,
uniéndose a la subunidad 40S
Factores de Función
Iniciación
eIF-3A Anti-asociación ribosomal, se une a la subunidad
60S
eIF-4A Estimula la unión del ARN
eIF-4B Estimula la actividad de eIF-4A y el eIF-4F
eIF-4F Reconocimiento del cap
eIF-5 Estimula la unión de los ribosomas
eIF-5A Estimula la formación de la primera unión
peptídica
1.- Disociación de ribosomas en subunidades 40S y 60S
eIF-3 3
40S eIF-1A
eIF-3A
3A
60S
3 1A
40S
2.- Unión del Met-ARNti a la subunidad 40S para formar el complejo de
Iniciación 43S
eIF-2
3 1A
+ eIF-2B Proteína
accesoria
GTP
40S +
eIF-2.GTP.Met-ARNti
3°
3
1A 3°
COMPLEJO DE
40S PREINICIACIÓN 43S
3.-Unión del ARNm al complejo 43S para formar el complejo de
preiniciación 48S
3
1A 3°
m7G 40S
AUG (A)n
reconocimiento
eIF-4A,4B,4F
eIF-4F 3
1A 3°
eIF-4A: ATP dependiente
m7G
AUG (A)n
40S
ATP
ADP
3
1A 3°
COMPLEJO DE m7G
AUG (A)n
PREINICIACIÓN 48S
40S
3
1A 3°
4.-Unión del complejo de m7G
AUG (A)n
preiniciación 48S con la
40S
subunidad 60S para formar
el complejo de iniciación eIF-5
Liberación de
80S
Factores, eIF-2-GDP
Met
m7G (A)n
AUG
40S
eIF-5A
60S
Met
COMPLEJO DE
INICIACIÓN 80S
m7G
AUG (A)n
ELONGACIÓN DE LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
1.- Unión del amionacil-ARNt al sitio A del ribosoma catalizada por el factor eEF-1alfa.
3.-Formación del enlace peptídico catalizada por el centro peptidil transferasa ubicado
en la subunidad 60S.
5´ 3´
2GTP
GTP eEF-1alfa
eEF-2
+ Pi
GDP
eEF-1alfa
GTP
eEF-2
5´ 3´
CICLO
5´ 3´ 5´ 3´
E
1.-MADURACIÓN POR MODIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS
a) Unión de sustituyentes a los aminoácidos
Acetilación: provee de resistencia a la degradación, protege al grupo
Amino, acetila la cadena lateral de las lisinas de las histonas
Carboxilación:
Fosforilación: Ej. Glucogeno fosforilasa b
Hidroxilación: ej: procolágeno
Francois Jacques
Jacob Monod
3.- Un operador (O): región del ADN que posee una secuencia reconocida por
la proteína.
4.- Un gen regulador (i): secuencia de ADN que codifica para la proteína
reguladora que reconoce la secuencia de la región del operador.
Para utilizar la lactosa, las bacterias deben expresar los genes del operón lac, que codifica
enzimas claves para el consumo y el metabolismo de la lactosa. Para ser tan eficiente
como sea posible, E. coli debe expresar el operón lac solamente cuando se cumplan dos
condiciones: La lactosa está disponible y La glucosa no está disponible
CONTROL
NEGATIVO
CONTROL
POSITIVO
CONTROL NEGATIVO
CONTROL NEGATIVO
CONTROL POSITIVO
Algunos operones bacterianos poseen promotores que no pueden ser
usados eficientemente por la ARN polimerasa de forma directa para el
inicio de la transcripción, sino que además, requieren proteínas
auxiliares activadoras
Gen crp: codifica la proteína regulatoria CRP (proteína de represión
catabólica), también conocida como CAP (proteína que une AMPc),
la cual es inactiva en su forma de síntesis.
Gen cya: codifica la adenilatociclasa, enzima que convierte el ATP
en AMPc.
activa
Represor
inactiva inactivo
El operón lac se expresará en niveles altos si se cumplen dos condiciones:
-La lactosa debe estar disponible: si la lactosa está disponible, el represor lac
será liberado del operador (por unión de la alolactosa). Esto permite que la
ARN polimerasa avance sobre el ADN y transcriba el operón.
Estos dos eventos en combinación –la unión del activador y la liberación del
represor– permiten que la ARN polimerasa se una fuertemente al promotor y le dé
una trayectoria clara para la transcripción. Juntos llevan a una fuerte transcripción
del operón lac y a la producción de las enzimas necesarias para la utilización de la
lactosa
CONTROL
POST-TRANSCRIPCIONAL
ARN
ADN Transcrito ARN
CONTROL 1ario Maduro
TRANSCRIPCIÓN
Proteína
Funcional
CONTROL
TRANSCRIPCIONAL
CONTROL
POST-TRANSCRIPCIONAL
CONTROL
POST-TRADUCCIONAL
Proceso por el cual de una misma secuencia de ADN se puede obtener distintas
expresiones o manifestaciones en una célula
-Factores de transcripción
Regulación a corto plazo
-ARN no codificante
-Histonas modificadas
Objetivos:
-Obtener gran cantidad de ADN para distintos fines,
-Determinar la secuencia de una fragmento pequeña de ADN en una
disolución.
Recientemente:
PAC: P1 phage Artificial Chromosome
BAC: Bacterial Artificial Chromosome
Transformación de las células en las cuales se introduce
el híbrido