CAP

Revisión de pruebas
rápidas serológicas
OBJETIVOS
• Explicar los requisitos de procedimiento de las pruebas
rápidas
• Conocer los principios de prueba relacionados con las
pruebas rápidas de kits serológicos.
• Identificar las fuentes de error del procedimiento con las
pruebas rápidas de kits serológicos.
• Realizar las pruebas de control de calidad según sea
necesario
• Interpretar correctamente los resultados de las pruebas de
control de calidad
• Interpretar los resultados de las pruebas serológicas del kit
rápida
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
Metodología: inmunoensayo
Esto depende de…
• Antígeno o anticuerpo detectable
• Antígeno o anticuerpo que se pueda
aplicar con éxito en un medio de
prueba.
• Que sea especifico para el complentario
que esta probando
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
Metodología: inmunoensayo
Esto depende de…
• Unión Antígeno-Anticuerpo
• Presentación visual si se produce la
reacción
• Un indicador*
 Condición clínica Prueba rapida Antígeno o anticuerpo dirigido en prueba rápida

Virus de la hepatitis c Anti-VHC Anticuerpos contra el VHC

Infección por el virus de la

inmunodeficiencia humana (VIH)
VIH-1 o VIH-2 Anticuerpos VIH-1 y / o VIH-2

Anticuerpos Los antígenos actuales utilizados en la prueba IM no se unen a los anticuerpos

Mononucleosis infecciosa
Heterofilos de Forsmann.

Influenza Gripe A / B Antígeno de influenza A y / o B

ITRI- sospecha de infección viral RSV Antígeno del virus sincicial respiratorio (VSR)

Faringitis - sospecha de infección

Strep A Test Streptococcus pyogenes antígeno del grupo A
estreptocócica
Gonadotropina coriónica humana (hCG): una hormona que actúa como antígeno
El embarazo hCG
en la reacción antígeno / anticuerpo

Sífilis RPR Anticuerpos Reagin (anticuerpos no treponémicos) Reagina Plasmática Rápida

PRINCIPIO DE LA
PRUEBA
 Prueba de
Aglutinación
Antígeno* soluble se agrega a
partículas que presentan
reacción macroscópica

• Las partículas mas utilizadas

son:
• GR, Látex, Carbón
• La aglutinación se produce:
• Sensibilización: las moléculas
de Ac´s se unen al Ag
• Aglutinación: Cada Ac se une
por dos sitios al Ag.
Formando una red.
 Principio de la
prueba de ensayo
de sándwich

Utilizan dos Ac´s en el

sistema de detección
• Ac´s Monoclonales
recubiertos de material
que mejoran en color.
• Formación de
complejo Ag-Ac y
migración
• Adhesión de 2do Ac
• Visualización de color
Insertos de la prueba
¿Importancia??
Los fabricantes de kits de prueba proporcionan
la siguiente información en los insertos de sus
productos:

•Resumen de la prueba •Procedimiento de prueba

•Principio del procedimiento
•Reactivos
•Precauciones
•Kit de estabilidad y
almacenamiento.
•Toma de muestras y manejo
•Procedimientos de control de
calidad
•Interpretación de resultados
•Limitaciones del
procedimiento de ensayo.
•Valores esperados
 •Mantenga el kit fuera de la luz solar
directa.
•Mantenga el frasco que contiene las
varillas de prueba bien cerrado.

Estabilidad y
•Los componentes del kit deben estar a
temperatura ambiente antes de usar

Almacenamiento
Revisión de la caducidad

Si los kits de prueba no se almacenan de acuerdo con las recomendaciones del fabricante, los
reactivos se deteriorarán y los componentes del kit no podrán utilizarse para la prueba del paciente.
ACEPTABILIDAD DE
LA MUESTRA
¿Qué tipo de muestra se puede utilizar con
este procedimiento?
¿Qué temperaturas son aceptables para el
almacenamiento si la prueba no se puede
realizar de inmediato?
¿Cuánto tiempo puede mantenerse una
muestra a temperatura ambiente antes de
la prueba?
¿Qué puede interferir con esta prueba?
 PRUEBA ACEPTABILIDAD DEL ESPECIMEN CONSIDERECIONES ESPECIALES
El espécimen de la primera mañana es óptimo.

La orina muy diluida puede dar como resultado una prueba falsa negativa.
hCG--urine Orina recogida en vidrio limpio o recipiente de plástico.
Las condiciones distintas del embarazo (enfermedad trofoblástica, ciertos
cánceres) pueden causar un falso positivo
hCG--serum Suero NO se puede usar plasma
Hisopo de garganta Algunos medios de transporte pueden interferir con la prueba.
Hisopo nasofaríngeo Use un hisopo recomendado por el fabricante.
Cuando la prevalencia de la enfermedad es relativamente baja, los resultados
Influenza A and B Aspirados nasales
de las pruebas con resultados positivos falsos son más probables.
Lavado nasal
Lavado bronquial
Suero
Plasma (verifique el procedimiento escrito para los
Mono test anticoagulantes específicos que se pueden usar)
La hemólisis bruta puede interferir con algunos procedimientos.
Sangre entera para algunos procedimientos.
Hisopo nasofaríngeo No utilice hisopo con vástago de madera.
Virus sincitial respiratorio Lavado nasal o aspirado El hisopo con vástago flexible debe usarse para la recolección de muestras.
(VSR)
Las muestras deben estar libres de contaminación bacteriana, hemólisis o
Suero calentado o no calentado
lipemia.
Plasma (verifique el procedimiento escrito para los
RPR anticoagulantes específicos que se pueden usar) Las reacciones de Prozone pueden causar falso negativo.

Muchas enfermedades y condiciones pueden causar un falso positivo.

No debe usar hisopo con vástago de madera o punta de algodón.
Strep A Hisopo de garganta El uso de hisopos distintos a los provistos con el kit puede afectar el
rendimiento del kit.
FUENTES DE ERROR

Los resultados falsos positivos o falsos negativos

pueden ser causados ​por errores que se producen
durante la realización de la prueba o previo a esta.
 Causas de errores
• Intercambiar reactivos entre kits • Técnica inadecuada
• Observar el lote • Seguir la instrucción al pie de la
• Mal revisado del inserto del letra
fabricante • Prioridad de las muestras
• Cantidad de muestra de paciente • Condiciones de almacenamiento
requerida • Humedad
• Tiempo de prueba • Temperatura de la prueba
• Tipos de muestras de pacientes • Temperatura de almacenamiento
que pueden usarse para la
prueba
 Fase de prueba Fuente de error Resultado
No mezclar bien el hisopo con los reactivos de
Fase de extracción
extracción.
Se aplica a la garganta y frotis No dejar el hisopo en el reactivo de extracción Se obtiene espécimen insuficiente. Puede llevar a un resultado falso
nasofaríngeos. durante el tiempo requerido. negativo de la prueba.
Expresión inadecuada del líquido del hisopo
después de la extracción.
Fase de lavado
Los restos dejados atrás pueden ser malinterpretados como un
Lavado insuficiente de la superficie de ensayo.
Se aplica a algunos resultado positivo.
procedimientos.
No agregar la cantidad requerida de muestra al La muestra insuficiente podría llevar a un resultado falso negativo
Fase de prueba
dispositivo de prueba. de la prueba.
Usar un dispositivo de prueba que tenga Prueba de falsos positivos si el color se interpreta como un
Dispositivos de un solo uso. decoloración en el área de prueba antes de aplicar resultado positivo. Falso negativo si el color enmascara una reacción
la muestra. positiva débil.

Fase de prueba No se puede esparcir la muestra en toda el área de

Procedimientos basados ​en la
aglutinación.
Fase de prueba
Dispositivos de un solo uso y
procedimientos basados ​en
aglutinación.
La muestra no puede mezclarse correctamente con el
prueba o no se gira la prueba durante el tiempo
requerido. reactivo. Puede leerse como falso negativo o falso positivo.
Sostener incorrectamente un dispositivo
La proporción incorrecta de la muestra al reactivo puede causar un
dispensador de modo que se dispense un volumen
insuficiente. resultado de prueba erróneo.
Como las condiciones de prueba difieren del procedimiento
Usar muestras o reactivos que no estén a
temperatura ambiente al momento de la prueba.
probado y aprobado por el fabricante, los resultados no son
confiables.
La reactividad del reactivo ha disminuido y puede dar como
Utilizando reactivos de prueba caducados.
resultado un resultado falso negativo.
Una muestra de orina de una paciente de 22 años
de edad se recibe en el laboratorio para un
análisis de orina y una prueba de embarazo. Los
resultados del análisis de orina incluyen una
gravedad específica de 1.005, un pH de 6.1 y una
cantidad mínima de proteína.
La prueba de embarazo es negativa. El médico de
la mujer cuestiona el resultado de la prueba de
embarazo porque se sospecha un
embarazo. ¿Qué pudo haber causado un
resultado falso negativo?
A.El pH de la orina debe ajustarse a 7.0 para realiza la prueba
B.La proteína traza esta interfiriendo con la medición
C.La gravedad especifica es muy baja, es sugestivo de una dilución
D.Todas las anteriores
EL medico quiere repetir la prueba, llama al
laboratorio solicitando informes ¿Que
recomendaciones debe de indicar a la paciente,
para evitar un falso negativo?

A.Muestra de catéter
B.Micción limpia
C.Orina de 24 horas
D.Primera orina de la mañana
 Control de calidad
para pruebas
rapidas
¿Qué es Control de
calidad?
Requisitos de control de
calidad para pruebas de
aglutinación
• Se deben probar con control positivo y
control negativo
• Al menos cada día que se realicen pruebas en pacientes
• Cuando se pone en uso un nuevo kit
No es necesario realizar todos los días* o
cada 8 horas
Requisitos de control de
calidad para pruebas únicas
• Prueba única:
• Tira reactiva o un cartucho que contiene todos los reactivos
necesarios para completar una prueba.
Las pruebas únicas fueron tratadas con el
mismo lote de reactivo.
Su control de calidad externo debe de
realizarse con frecuencia de 30 días*
Requisitos de control de
calidad para pruebas únicas
• La prueba única contiene su propio
control de calidad incorporado
Interpretación de
pruebas rapidas
 Kit de
pruebas de
un solo uso

• Observar que la
muestra este bien
colocada
• Observar la tira de
control
• Realizar la
interpretación
 Resultados
de
aglutinación
Cuando el anticuerpo o
antígeno
correspondiente está
presente en una muestra
del paciente, se
producirá aglutinación
como resultado de la
reacción del anticuerpo
/ antígeno.
EFECTO PROZONA EN
PRUEBAS DE AGLUTINACIÓN
• Cuando existe exceso de anticuerpo en
el suero o plasma del paciente. El
antígeno disponible se agota
rápidamente.
• Como consecuencia no habrá aglutinación
• Requiere que se realicen diluciones si se
sospecha clínicamente de esta situación